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polysaccharide in 3 times were 7.43%,7.64%,7.80%(RSD=1.01%,n=3). After modeling,except for blank group,other
groups suffered from loose stools,thin body and reduced food intake,and the body weight and serum level of D-xylose were
decreased significantly compared with blank group (P<0.01). After last medication,above symptoms of administration groups
were improved to different extents. Except for model group,body weight and serum contents of D-xylose in other groups were
increased significantly than those before modeling or before medication(P<0.05 or P<0.01). Compared with blank group,body
weight and serum content of GAS were decreased significantly in model group,while serum content of VIP was increased
significantly (P<0.01). Compared with model group, body weight of Shengmaiyin medium-dose group and Shengmaiyin
polysaccharide low-dose and high-dose groups,serum contents of D-xylose and GAS in Shengmaiyin medium-dose and high-dose
groups and Shengmaiyin polysaccharide low-dose and medium-dose groups were increased significantly,while serum contents of
VIP in Shengmaiyin groups and Shengmaiyin polysaccharide low-dose and medium-dose groups were all decreased significantly
(P<0.05 or P<0.01). CONCLUSIONS:The optimized extraction technology of Shengmaiyin polysaccharide is stable and
feasible. Shengmaiyin and its polysaccharide contribute to the recovery of intestinal function of spleen deficiency model rat,the
effects of which may be associated with the secretion regulation of GAS and VIP.
KEYWORDS Shengmaiyin;Polysaccharide;Extraction rate of polysaccharide;Extraction technology;Orthogonal test;Spleen
deficiency model;Gastrin;Vascoactive intestinal peptide;Rats
生脉饮为中医经典名方,首载于金代张元素的《医 化工试剂厂,批号:2015080101,规格:25 g);D-木糖检
学启源》,云“麦门冬气寒,味微苦甘,治肺中伏火,脉气 测试剂盒(间苯三酚法,批号:20170111)、胃泌素(GAS)
欲绝。加五味子、人参二味,为生脉饮,补肺中元气不 试 剂 盒 [ 酶 联 免 疫 吸 附 测 定(ELISA)法 ,批 号 :
足,须用之”。该方在中医临床上应用历史悠久,已成为 20170113]、血管活性肠肽(VIP)试剂盒(ELISA 法,批
治疗心血管疾病的常用方,且其相关研究也多集中在心 号:20170113)均购自南京建成生物工程研究所;蒽酮、
[1]
血管疾病治疗方面 。生脉饮组方中人参(为炮制品“红 硫酸等其余试剂均为分析纯,水为蒸馏水。
参”)、麦冬、五味子均含有大量多糖,对肠道具有一定的 1.3 动物
调节作用,如人参多糖能够改善气虚模型大鼠的肠道 SPF 级雄性 SD 大鼠,7 周龄,体质量为 200~220 g,
[2]
菌群失调 ;麦冬多糖(MDG-1)对糖尿病小鼠和非糖尿 购自成都达硕实验动物有限公司[动物生产许可证书:
病小鼠的肠道微生态平衡均具有一定的调节作用 [3-5] ,同 SCXK(川)2015-030]。
时还可改善膳食诱导的肥胖模型小鼠的肠道菌群多样 2 方法与结果
[6]
性,促进肠道益生菌的繁殖 ;五味子多糖可改善5-氟尿 2.1 溶液的制备
嘧啶引起的小鼠肠道黏膜炎症 ,同时还可促进肠道双 2.1.1 对照品溶液 精确称取干燥至恒定质量的葡萄
[7]
歧杆菌的生长 。然而,目前有关生脉饮及其多糖对肠 糖对照品10 mg,置于100 mL量瓶中,加水溶解并定容,
[8]
道功能调节作用的研究尚未见报道。为此,本研究在优 得质量浓度为0.1 mg/mL的葡萄糖对照品溶液。
化生脉饮多糖提取工艺的基础上,以脾虚模型大鼠为对 2.1.2 供试品溶液 按质量比1 ∶ 2 ∶ 1的比例称取红参、
象,考察了生脉饮及其多糖对脾虚泄泻致肠道菌群紊乱 麦冬、五味子饮片各适量,混合,以水为溶剂按料液比
大鼠相关指标的影响,并初步探索两者对大鼠肠道的调 1 ∶ 8[质量(以各药材质量总和计)体积比,g/mL,下同]提
节作用,以期为该方的进一步开发利用提供参考。 取2次,每次45 min,提取温度为80 ℃。提取液滤过后,
1 材料 合并,低温蒸发浓缩至原体积的 17%,加 4 倍体积的
1.1 仪器 95%乙醇,于 4 ℃冰箱中静置过夜后,抽滤,依次用乙
Varioskan Flash 2.4.3 型全波长多功能酶标仪(美国 醇、丙酮、乙醚洗涤(各2次),经冷冻干燥后,即得生脉饮
Thermo Fisher Scientific公司);U-1810型紫外-可见分光 多糖。精密称取上述多糖 0.5 g,加水溶解并定容至 100
光度计(北京普析通用仪器有限责任公司);Alleregra mL量瓶中,滤过,取滤液,即得供试品溶液。
X30R 型多功能台式高速冷冻离心机[贝克曼库尔特商 2.1.3 空白对照溶液 以水作为空白对照溶液。
贸(中国)有限公司]。 2.1.4 硫酸-蒽酮溶液 取蒽酮 0.1 g,加 80%硫酸溶液
1.2 药材与试剂 100 mL,溶解,即得(现用现配)。
红 参 饮 片(批 号 :1602008)、麦 冬 饮 片(批 号 : 2.2 生脉饮多糖含量测定方法的建立
[9]
1604042)、五味子饮片(批号:1603102)、大黄饮片(批 采用硫酸苯酚法 测定生脉饮多糖的含量。
号:1606080)均购自四川新荷花中药饮片股份有限公 2.2.1 标准曲线的绘制 分别精密吸取“2.1.1”项下葡
司;葡萄糖对照品(成都曼斯特生物科技有限公司,批 萄糖对照品溶液 0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL 至
号:MUST-17012905,纯度:≥98%);D-木糖(成都科龙 离心管中,加水至 2.0 mL(质量浓度为 0.021 0~0.094 5
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