Page 95 - 《中国药房》2026年10期
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表1 3种待测药物及其内标的MRM参数                           2.4 方法学考察
          待测药物/内标 母离子m/z  子离子m/z  去簇电压/V  碰撞电压/V  扫描时间/ms 保留时间/min  按照 2020 年版《中国药典》（四部）通则的相关要
          维奈克拉    868.4  636.3  185.1  36.0   80     1.76    求 ，对所建LC-MS/MS方法进行方法学考察。
                                                               [15]
                  876.4  644.5  178.2  37.1   80     1.74
          维奈克拉-D 8                                           2.4.1 专属性
          白消安     264.1  151.1  35.0   15.5   80     0.61
                  272.1  159.1  44.0   15.1   80     0.59        分别选取 6 个不同来源的健康人空白血浆，“2.2.3”
          白消安-D 8
          伏立康唑    350.1  224.0  185.1  36.0   80     1.31    项下的LLOQ、HQC血浆样品，以及实测血浆样品（某联
          泊沙康唑    701.4  614.4  146.0  53.0   80     1.68    用维奈克拉和伏立康唑患者的血浆样品），按照“2.3”项
          储备溶液；精密称取白消安、伏立康唑各5.0 mg，分别置                       下方法处理（空白血浆不加内标），再按“2.1”项下条件进
          于5 mL容量瓶中，加甲醇溶解并定容，制成质量浓度均                         样分析，记录色谱图。结果显示，维奈克拉、维奈克
          为 1 mg/mL 的储备溶液。将上述储备溶液于－40 ℃下                     拉-D8、白消安、白消安-D8、伏立康唑、泊沙康唑色谱峰峰
          保存。临用前，分别取上述维奈克拉、伏立康唑、白消安                          形良好，内源性物质对上述成分的检测基本无影响，提
          储备溶液100、100、30 μL，混匀，加入50%乙腈770 μL，                示方法专属性良好（限于篇幅，具体MRM图可扫描本文
          制得质量浓度分别为100 000、100 000、30 000 ng/mL的             首页二维码查看“增强出版”板块中的附图1）。
          混合标准品溶液。取该混合标准品溶液，用50%乙腈依                          2.4.2 线性关系与LLOQ考察
          次稀释，得维奈克拉和伏立康唑质量浓度分别均为                                 取“2.2.3”项下系列混合标准曲线血浆样品，按“2.3”
          100 000、50 000、25 000、12 500、2 500、1 000、500 ng/mL，  项下方法处理后，再按“2.1”项下条件进样分析，记录峰
          白消安质量浓度分别为 30 000、15 000、7 500、3 750、              面积。以各待测药物与对应内标的峰面积比值为纵坐
          750、300、150 ng/mL 的混合系列标准溶液。同时，同法                  标、待测药物质量浓度为横坐标，采用最小加权法（加权
                                                                     2
          配制维奈克拉、伏立康唑质量浓度分别均为 80 000、                        系数1/X ）进行线性回归。结果（表2）显示，维奈克拉和伏
          16 000、1 333.3 ng/mL和白消安质量浓度分别为24 000、             立康唑检测质量浓度的线性范围均为50～10 000 ng/mL
                                                                2
          4 800、400 ng/mL的混合质控样品溶液。                         （R 分别为0.999 0、0.999 9），LLOQ均为50 ng/mL；白消
                                                                                                           2
          2.2.2 内标溶液                                         安检测质量浓度的线性范围为 15～3 000 ng/mL（R ＝
                                                             0.999 0），LLOQ为15 ng/mL。
              精密称取维奈克拉-D8对照品1.0 mg，置于1 mL EP
          管中，加 DMSO 溶解，制成质量浓度为 1 mg/mL 的内标                       表2 3种药物定量分析的回归方程和线性范围
          储备溶液；精密称取白消安-D8、泊沙康唑对照品各 1.0                        待测药物            回归方程          R  2  线性范围/（ng/mL）
                                                                               －4
          mg，置于1 mL EP管中，加甲醇溶解，制成质量浓度均为                       维奈克拉      Y＝4.184 42×10 X+0.001 97  0.999 0  50～10 000
                                                              白消安       Y＝4.314 01×10 X－9.710 52×10 －5  0.999 0  15～3 000
                                                                               －4
          1 mg/mL的内标储备溶液。取维奈克拉-D8、白消安-D8、                     伏立康唑      Y＝4.524 73×10 X+1.015 59×10 －5  0.999 9  50～10 000
                                                                               －4
          泊沙康唑内标储备液，用 50% 乙腈稀释，得上述内标质
                                                             2.4.3 精密度与准确度
          量浓度分别为 0.01、0.02、0.2 mg/mL 的混合内标溶液，
                                                                 取“2.2.3”项下 3 种待测药物的 LLOQ、LQC、MQC、
          于－40 ℃下保存，备用。
                                                             HQC血浆样品，按“2.3”项下方法处理后，再按“2.1”项下
          2.2.3 混合标准曲线血浆样品和质控血浆样品
                                                             条件进样分析，重复 6 次，考察日内精密度（以 RSD 表
              精密量取空白血浆 45 μL，分别加入上述混合系列
                                                             示）；连续测定3 d，考察日间精密度（以RSD表示）；以实
          标准溶液各5 μL，制成维奈克拉和伏立康唑质量浓度分
                                                             测质量浓度与理论质量浓度进行比较，考察准确度[以
          别均为 10 000、5 000、2 500、1 250、250、100、50 ng/mL，
                                                             相对误差（relative error，RE）表示]。结果（表3）显示，日
          白消安质量浓度分别为 3 000、1 500、750、375、75、30、
                                                             内、日间精密度试验的 RSD 均小于 10%（n＝6 或 n＝
          15 ng/mL的系列混合标准曲线血浆样品。同法配制3种
                                                             18），RE为－10.00%～12.96%。
          待测药物的混合定量下限（lower limit of quantification，
                                                             2.4.4 提取回收率与基质效应
          LLOQ）、低质量浓度质控（low-level quality control，LQC）、          按“2.2.3”项下方法配制维奈克拉、白消安、伏立康
          中质量浓度质控（medium-level quality control，MQC）、         唑的LQC、MQC、HQC血浆样品，按“2.3”项下方法处理
          高质量浓度质控（high-level quality control，HQC）血浆样         后，再按“2.1”项下条件进样测定，记录各待测药物与对
          品（维奈克拉和伏立康唑分别均为50.00、133.33、1 600.00、              应内标的峰面积比值（A）。以初始流动相为溶剂，配制
          8  000.00  ng/mL，白 消 安 分 别 为 15.00、40.00、480.00、        相应质量浓度的待测药物溶液（最终质量浓度与上述质
          2 400.00 ng/mL），备用。                                控样品一致），按“2.1”项下条件进样测定，记录各待测药
          2.3 血浆样品预处理                                        物与对应内标的峰面积比值（B）。取6份不同来源的空
              取血浆样品50 μL，置于1.5 mL离心管中，加入含内                   白血浆，按“2.3”项下方法处理后，再加入维奈克拉、白消
          标的混合沉淀剂（含“2.2.2”项下混合内标溶液 10 μL 和                   安、伏立康唑相应质量浓度对照品溶液（最终质量浓度
          乙腈 290 μL）300 μL，涡旋混匀 1 min 后，于 4 ℃下以              与上述质控样品一致），再按“2.1”项下条件进样测定，记
          14 000 r/min离心8 min，取上清液5 μL进样分析。                  录各待测药物与对应内标的峰面积比值（C）。每质量浓


          中国药房  2026年第37卷第10期                                              China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 10    · 1325 ·
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