Page 19 - 《中国药房》2026年10期
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炒苦杏仁(安徽协和成药业饮片有限公司,批号分别为 2 方法
25043006、25090226),蜜麻黄(郑州瑞龙制药股份有限 2.1 药液的制备
公司,批号 25060104),姜厚朴、黄芩、蜜紫菀、蜜款冬花 取炒紫苏子、炒葶苈子、蜜麻黄、炒苦杏仁、姜厚朴、
(安徽普仁中药饮片有限公司,批号分别为 2507105、 黄芩、地龙、蜜紫菀、蜜款冬花、炙甘草饮片(质量比 10∶
2501221、2501102、2506082),炙甘草(河南绿禾药业有 10∶6∶10∶10∶10∶10∶10∶10∶6),混合,加8倍量水浸泡30
限公司,批号250409),均由河南中医药大学第一附属医 min 后,武火煮沸,再文火慢煎 30 min,过滤;取药渣,同
院中药房提供,经该院药学部陈天朝主任药师鉴定均为 法煎煮30 min,过滤;合并两次滤液,分别浓缩成0.414、
真品。 0.828、1.656 g/mL(以生药量计)的药液,备用。取阳性
醋酸地塞米松片(批号1710047,规格0.75 mg,天津 对照药醋酸地塞米松片,研磨成粉末,用0.5%羧甲基纤
力生制药股份有限公司)由河南中医药大学第一附属医 维素钠溶液配制成0.1 mg/mL的混悬液,备用。
院提供;卵清蛋白(批号A5253-250G)购自美国Sigma公 2.2 分组、造模与给药
司;4%氢氧化铝凝胶佐剂(批号BE0324)购自陕西中晖 所有大鼠经 7 d 适应性饲养后,按随机数字表法分
赫彩生物医药科技有限公司;苏木精-伊红(HE)染色液 为空白组,模型组,STPC 低、中、高剂量组(STPC-L、
(批号 RS3340)购自金克隆(北京)生物技术有限公司; STPC-M、STPC-H 组),地塞米松组,每组 8 只。按预实
丙二醛(malondialdehyde,MDA)检测试剂盒、总超氧化 验方法构建哮喘模型:于实验第0、7天,予模型组和各药
物组大鼠腹腔注射含0.2 mg卵清蛋白和100 μL氢氧化
物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)检测试剂盒、IL-1β
铝凝胶佐剂的致敏液 0.2 mL;从实验第 14 天开始,将模
酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒、IL-18 ELISA 试剂
型组和各药物组大鼠置于20 cm×20 cm×15 cm大小的
盒、TUNEL 染色试剂盒(批号分别为 E-BC-K025-M、
自制雾化箱内,使其雾化吸入 1% 卵清蛋白生理盐水溶
E-BC-K020-M、E-EL-R0012、E-EL-R0567、E-CK-A320)
液,每天雾化30 min,雾化气流量为3 mL/min,连续7 d,
均购自武汉伊莱瑞特生物科技股份有限公司;TRIzol试
进行雾化激发。在上述过程中,空白组大鼠同步腹腔注
剂(批号 15596026)购自赛默飞世尔科技(中国)有限公
射和雾化吸入等体积生理盐水。
®
®
司; ReverTra Ace qPCR 逆转录试剂盒、SYBR Green
自首次雾化激发之日(实验第 14 天)起,STPC-L、
RT- qPCR 预混液(批号分别为 FSQ-101、QPK-201)均
M、H 组大鼠分别灌胃 STPC 药液 4.14、8.28、16.56 g/kg
购自日本TOYOBO公司;兔抗NLRP3抗体、兔源剪切型
[11]
(以生药量计;剂量按人与大鼠等效剂量换算法计算 ,
胱天蛋白酶 1(cleaved caspase-1)抗体、兔抗 GSDMD 氮
分别为临床等效剂量的0.5、1、2倍);地塞米松组大鼠灌
端片段(gasdermin D-N-terminal domain,GSDMD-N)抗
胃地塞米松混悬液 1 mg/kg(剂量参考预实验结果及相
体、兔抗 GSDMD 抗体(批号分别为 DF7438、AF4005、
[12]
关文献 设置);空白组和模型组大鼠灌胃等体积的生
DF13758、AF4012)均购自美国Affinity公司;兔抗caspase-1
理盐水。各组均于每天雾化前1 h给药1次,持续7 d。
抗体、兔抗甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)抗体(批号分
2.3 大鼠行为学观察
别为 GTX134551、GTX100118)均购自美国 Genetex 公
在整个实验过程中,每天密切观察并记录各组大鼠
司;辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔免疫球蛋白
的精神状态、活动情况、皮毛光泽度、体重变化、摄食及
G(IgG)二抗(批号 SA00001-2)购自武汉三鹰生物技术
饮水量,特别注意观察并记录大鼠在雾化激发期间是否
有限公司;所用PCR引物由苏州金唯智生物科技有限公
出现烦躁不安、毛发竖立、萎靡不振、点头样呼吸、呼吸
司设计、合成。 频率增快、挠鼻、喷嚏样等症状(若出现上述症状,则视
1.3 实验动物 为造模成功)。
健康 SPF 级雄性 SD 大鼠 48 只,4~6 周龄,体重 2.4 样本采集与处理
180~220 g,购自辽宁长生生物技术股份有限公司,生产 末次给药后且禁食、不禁水12 h后,随机选取每组6
许可证号为 SCXK(辽)2025-0001。所有大鼠均饲养于 只大鼠,以腹腔注射2.5%三溴乙醇进行麻醉,采用钝性
河南中医药大学动物实验中心屏障级实验室[温度为 分离法暴露其颈部气管,切开气管、插入导管并结扎右
(21±2)℃,相对湿度为(50±10)%,每 12 h 明暗交替循 侧主支气管,使用注射器经气管缓慢注入生理盐水 0.5
环],自由摄食、饮水。本实验所有操作程序均严格遵守 mL,反复灌洗 3 次,收集支气管肺泡灌洗液(broncho-
实验动物管理相关法规,并经过河南中医药大学实验动 alveolar lavage fluid,BALF;液体回收率不低于80%),以
物伦理委员会审查批准(批准编号IACUC-202504049)。 2 000 r/min 离心 10 min,取上清液于-80 ℃下保存,用
中国药房 2026年第37卷第10期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 10 · 1253 ·

