Page 49 - 《中国药房》2026年8期

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Fluo-3 AM FITC-A Fluo-3 AM FITC-A
A.正常对照组 B.佐剂处理组 A.正常对照组 B.佐剂处理组
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Fluo-3 AM FITC-A Fluo-3 AM FITC-A
C.红花提取物诱导致敏组 D. OVA诱导致敏组
C.红花提取物诱导致敏组 D. OVA诱导致敏组
2+
图3 超剂量红花提取物致敏血清诱导后RBL-2H3细胞 图4 超剂量红花提取物致敏血清诱导后细胞中Ca 光
染色显微图 谱图
表1 超剂量红花提取物致敏血清诱导对组胺含量、 作为体外模型，观察红花提取物直接诱导以及超剂量红
β-Hex 释放率和 IL-6、TNF-α 水平的影响（x±s， 花提取物致敏血清诱导这两种方式，对RBL-2H3细胞免
n＝3） 疫毒性的影响。本课题组前期预实验结果显示，红花提
取物作用于 RBL-2H3 细胞 24 h 的 IC50为 12.63 mg/mL，
组别 组胺/（μmol/L） β-Hex释放率/% IL-6/（pg/mL） TNF-α/（ng/L）
正常对照组 0.171±0.037 11.1±0.4 13.7±0.7 54.1±2.4 因此本研究选择红花提取物10 mg/mL作为红花提取物
佐剂处理组 0.198±0.034 11.7±0.3 14.5±0.7 57.1±3.9 直接诱导的细胞干预浓度。该浓度与 IC50较为接近，一
红花提取物诱导致敏组 0.325±0.031 a 21.1±2.2 a 16.6±0.9 a 64.9±2.7 a 方面能够维持细胞的基本活性，另一方面也足以诱导出
OVA诱导致敏组 0.359±0.021 a 23.3±0.7 a 18.9±1.9 a 71.0±5.1 a
显著的脱颗粒效应，能够较好地模拟红花提取物在接近
a：与佐剂处理组比较，P＜0.01。
有效浓度区间内的生物活性与毒性作用，同时还避免了
3.2.3 对IL-6、TNF-α水平的影响
因浓度过高导致的细胞损伤、干扰功能学实验结果等问
与正常对照组比较，佐剂处理组 RBL-2H3 细胞中
题。此外，为模拟临床超剂量使用情景下机体可能产生
IL-6、TNF-α 水平均升高，但差异无统计学意义（P＞
的免疫应答，本研究采用红花提取物的最大可配制浓度
0.05）；与佐剂处理组比较，红花提取物诱导致敏组、OVA
（2.04 g/mL）对大鼠进行多次致敏，取致敏后血清干预
诱导致敏组RBL-2H3细胞中IL-6、TNF-α水平均显著升
RBL-2H3 细胞。该剂量远高于红花临床常用给药剂量
高（P＜0.01）。结果见表1。
（通常为每日 3～10 g 生药），属于严格意义上的超剂量
3.2.4 对Ca 浓度的影响
2+
暴露条件。
正常对照组、佐剂处理组、红花提取物诱导致敏组、 本研究结果显示，在10 mg/mL干预浓度下，红花提
2+
OVA 诱导致敏组 RBL-2H3 细胞中 Ca 平均荧光强度分
取物直接诱导后的 RBL-2H3 细胞中组胺含量和 β-Hex
4
4
别为（9.6±0.1）×10 、（10.2±0.7）×10 、（15.7±0.1）× 2+
释放率、细胞内Ca 浓度均显著升高。组胺释放、β-Hex
4
4
10 、（19.2±0.1）×10 。与正常对照组比较，佐剂处理组
2+
分泌及Ca 浓度升高是肥大细胞活化脱颗粒的核心特征
RBL-2H3细胞中Ca 平均荧光强度升高，但差异无统计 指标，该结果直接证实红花提取物在接近 IC50剂量时可
2+
学意义（P＞0.05）；与佐剂处理组比较，红花提取物诱导 有效触发肥大细胞活化。超剂量红花提取物致敏血清
2+
致敏组、OVA诱导致敏组RBL-2H3细胞中Ca 平均荧光 诱导结果与红花提取物直接诱导结果高度一致。这提
强度均显著增加（P＜0.01）。结果见图4。 示，红花提取物可能通过两条途径激活肥大细胞：一是
4 讨论 直接结合细胞表面非免疫球蛋白 E（immunoglobulin E，
红花在临床上属于常用的传统中药材，已有研究证 IgE）受体（如Toll样受体），激活下游信号通路 [17―18] ；二是
实，其脂溶性活性成分具有较强的致敏性，且这种致敏 通过致敏血清中的IgE与细胞表面高亲和力IgE受体交
[13]
性与类过敏反应机制密切相关 ，这表明在临床应用 联，激活钙信号通路促进Ca 内流 [19―21] 。虽然路径不同，
2+
中，红花存在一定的致敏风险和促炎反应的安全隐患。 但最终都介导了肥大细胞的脱颗粒。
因此，系统考察红花的免疫毒性特征，并阐释其潜在的 本研究还发现，红花提取物能同步上调辅助性T细
免疫炎症相关作用机制，对于明确红花临床安全用药范 胞2（helper T cell 2，Th2）型细胞因子IL-6和Th1型细胞
畴意义重大。考虑到类肥大细胞 RBL-2H3 是目前研究 因子 TNF-α 的表达，打破机体正常 Th1/Th2 免疫平衡，
肥大细胞脱颗粒机制理想的替代模型，故本研究选择其 且红花提取物直接诱导与超剂量红花提取物致敏血清
中国药房 2026年第37卷第8期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 8 · 1007 ·