Page 48 - 《中国药房》2026年8期

500 μL细胞悬液接种至圆片上。待细胞贴壁30 min后，
在培养皿中补充完全培养液 500 μL，随后置于 37 ℃培
养箱中培养过夜。将经过上述处理后的细胞分为正常
对照组、佐剂处理组、红花提取物诱导致敏组、OVA诱导
致敏组。正常对照组加入1 mL含15%正常大鼠血清的
完全培养液，佐剂处理组加入 1 mL 含 15% 佐剂处理的
大鼠血清的完全培养液，红花提取物诱导致敏组加入 1 A.正常对照组 B.红花提取物组
图1 红花提取物直接诱导后 RBL-2H3 细胞染色显微
mL含15%红花提取物诱导致敏的大鼠血清的完全培养
图
液，OVA 诱导致敏组加入 1 mL 含 15%OVA 诱导致敏的
大鼠血清的完全培养液。后续步骤同“2.3.1”项。 β-Hex 释放率分别为（13.4±1.4）%、（21.3±1.4）%；与正
2.4.4 组胺含量检测 常对照组比较，红花提取物组 RBL-2H3 细胞中组胺含
取处于对数生长期的 RBL-2H3 细胞，接种于 96 孔 量、β-Hex释放率均显著升高（P＜0.01）。
板中，接种密度为 1×10 mL ，每孔接种体积为 100 3.1.3 对IL-6、TNF-α水平的影响
－1
5
μL，随后将其置于培养箱中培养过夜。按“2.4.3”项下方 正常对照组和红花提取物组 RBL-2H3 细胞中 IL-6
法进行分组并加入 1 mL 相应大鼠血清；后续步骤同 水平分别为（12.9±0.3）、（16.3±0.5）pg/mL，TNF-α水平
“2.3.2”项。 分别为（46.1±1.5）、（57.7±3.7）ng/L；与正常对照组比
2.4.5 β-Hex释放率计算 较，红花提取物组 RBL-2H3 细胞中 IL-6、TNF-α 水平均
取处于对数生长期的 RBL-2H3 细胞，接种于 96 孔 显著升高（P＜0.01）。
－1
2+
5
板中，接种密度为 1×10 mL ，每孔接种体积为 100 3.1.4 对Ca 浓度的影响
2+
μL，随后将其置于培养箱中过夜培养。按“2.4.3”项下方 正常对照组和红花提取物组RBL-2H3细胞中Ca 平
4
4
法进行分组并加入 100 μL 相应大鼠血清；后续步骤同 均荧光强度分别为（3.6±0.0）×10 、（10.9±0.8）×10 。
“2.3.3”项。 与正常对照组比较，红花提取物组RBL-2H3细胞中Ca 2+
2.4.6 IL-6、TNF-α水平检测 平均荧光强度显著增加（P＜0.01）。结果见图2。
取处于对数生长期的 RBL-2H3 细胞，接种于 96 孔 1-2：P1 2-2：P1
5
－1
板，接种密度为1×10 mL ，每孔接种体积为100 μL，随 400 400
后将其置于培养箱中培养过夜。按“2.4.3”项下方法进
行 分 组 并 加 入 100 μL 相 应 大 鼠 血 清 ；后 续 步 骤 同 Count 200 Count 200
“2.3.4”项。
0 0
2.4.7 Ca 浓度检测 1×10 1×10 1×10 1×10 1×10 6 1×10 1×10 1×10 1×10 1×10 6
3
2+
5
4
2
2
4
3
5
Fluo-3 AM FITC-A Fluo-3 AM FITC-A
取处于对数生长期的 RBL-2H3 细胞，取密度为 2× A.正常对照组 B.红花提取物组
2+
10 mL 的细胞悬液 2 mL，接种于 6 孔板中，置于 37 ℃ 图2 红花提取物直接诱导后细胞中Ca 光谱图
－1
5
培养箱中培养过夜。按“2.4.3”项下方法进行分组并加 3.2 超剂量红花提取物致敏血清对RBL-2H3细胞的免
入2 mL相应大鼠血清；后续步骤同“2.3.5”项。 疫毒性
2.5 统计学方法 3.2.1 对细胞形态学及脱颗粒的影响
采用GraphPad 8.0软件对数据进行统计分析。计量 正常对照组、佐剂处理组、红花提取物诱导致敏组、
资料满足正态分布以x±s表示，多组间比较采用方差分 OVA诱导致敏组的细胞形态无明显差异（图3），上述各
析，进一步两两比较采用LSD-t检验。检验水准α＝0.05。 组 RBL-2H3 细 胞 的 脱 颗 粒 率 分 别 为（5.7±1.0）% 、
3 结果 （7.3±1.8）%、（10.8±2.3）%、（11.5±3.5）%。与正常对
3.1 红花提取物直接诱导对RBL-2H3细胞的免疫毒性 照组比较，佐剂处理组 RBL-2H3 细胞脱颗粒率升高，但
3.1.1 对细胞形态学及脱颗粒的影响 差异无统计学意义（P＞0.05）；与佐剂处理组比较，红花
甲苯胺蓝染色结果显示，正常对照组RBL-2H3细胞 提取物诱导致敏组、OVA 诱导致敏组 RBL-2H3 细胞脱
呈成纤维细胞样，细胞体积较大；红花提取物组 RBL- 颗粒率均显著升高（P＜0.01）。
2H3 细胞体积明显缩小，细胞密度减少（图 1）。与正常 3.2.2 对组胺含量、β-Hex释放率的影响
对照组[（0.82±0.67）%]比较，红花提取物组RBL-2H3细 与正常对照组比较，佐剂处理组RBL-2H3细胞中组
胞脱颗粒率[（8.85±2.07）%]显著升高（P＜0.01）。 胺含量及β-Hex释放率升高，但差异无统计学意义（P＞
3.1.2 对组胺含量、β-Hex释放率的影响 0.05）；与佐剂处理组比较，红花提取物诱导致敏组、OVA
正常对照组和红花提取物组 RBL-2H3 细胞中组胺 诱导致敏组 RBL-2H3 细胞中组胺含量及 β-Hex 释放率
含量分别为（0.116±0.010）、（0.233±0.023）μmol/mL， 均显著升高（P＜0.01）。结果见表1。

· 1006 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 8 中国药房 2026年第37卷第8期