Page 46 - 《中国药房》2026年8期
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常规毒理学研究方法存在明显的局限性，难以全面揭示                            tinctorius L.的干燥花。MEM培养基、胎牛血清、非必需
          中药临床应用过程中的潜在安全风险                  [4―6] 。这一现状，      氨基酸溶液（批号分别为 3237291、2233790P、3209589）
          已成为中药安全性评价领域亟待解决的关键问题。因                             均购自美国 Gibco 公司；胰蛋白酶、青霉素-链霉素溶液
          此，中药风险评估需突破传统认知范畴，结合药性特征、                          （100×）（批号分别为 A068240916、A143803405）均购
          临床用药经验及不良反应数据，开展更具针对性的毒理                            自上海碧云天生物技术有限公司；对硝基苯-N-乙酰-
          学研究。                                                β -D- 氨 基 葡 萄 糖 苷（4-nitrophenyl-N-acetyl- β -D-
              红花作为一种传统中药材，含有醌氏查尔酮类、黄                          glucopyranoside，PNP-NAG）、弗氏完全佐剂、弗氏不完全
          酮类、生物碱等多种活性成分，具有抗炎、抗氧化、免疫                           佐剂、卵清蛋白（ovalbumin，OVA）、二甲基亚砜（批号分
          调节等药理作用       [7―8] 。鉴于其成分的多样性与药理作用                 别 为 0000491065、0000440881、0000406764、0000289190、
          的广泛性，红花单味制剂及相关配伍复方制剂在临床中                            BNBK6092）均购自美国 Sigma 公司；甲苯胺蓝染色液
                                                                                                    2+
                                                        [9]
          的应用日趋广泛，有关其不良反应的报道亦随之增多 。                          （细胞专用）、组胺检测试剂盒、Fluo-3 AM Ca 浓度检测
          但目前关于红花毒性的研究仍存在明显不足：绝大多数                            试剂盒（批号分别为 YP24008001、2412008、2410016）均
          研究聚焦于注射剂（如红花注射液、注射用红花黄色素、                           购自北京索莱宝科技有限公司；碳酸氢钠、碳酸钠、柠檬
          羟基红花黄色素A等）所引发的类过敏反应                  [10―12] ，而对于   酸 、柠 檬 酸 钠（批 号 分 别 为 G2422303、F2413210、
          非注射剂型的红花单用及复方制剂（如红花口服液、桃                            A2418239、F2411443）均购自北京化学工业集团有限责
          红四物汤等），尚缺乏系统的不良反应监测与安全性评                            任公司；白细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）、肿瘤坏死因
          价研究，尤其是超剂量使用场景下的免疫毒性研究，更                            子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）酶联免疫吸附测定
          是匮乏。                                               （ELISA）试剂盒（批号分别为 202501、202501）均购自北
              肥大细胞作为人体固有免疫细胞，在受到特定刺激                          京晶美生物工程有限公司；水合氯醛（批号I2214469）购自
          后会发生脱颗粒反应，进而引发一系列的生理或病理效                            阿拉丁试剂（上海）有限公司。
          应；这一脱颗粒过程，本质上是分泌介质与细胞因子的                            1.3 实验动物与细胞
          过程，在过敏性疾病、类过敏反应及神经性炎症等病理                                SPF 级雄性 SD 大鼠 4 只，体重 250～300 g，由江苏
          进程中均起着关键作用           [13―14] 。大鼠嗜碱性白血病细胞            华创信诺医药科技有限公司提供，生产许可证号：SCXK
          株RBL-2H3，由于具备与肥大细胞相似的细胞结构和脱                        （苏）2020-0009。本实验在遵循优良实验室规范的实验
          颗粒途径，成为模拟肥大细胞脱颗粒病理过程、探究其                            室中开展，饲养环境：12 h 光暗交替，温度控制在 23～
          作用机制的理想替代模型            [15―16] ，为红花免疫毒性的机制          25 ℃，湿度约55%。本实验经重庆市中药研究院实验动
          研究提供了可靠的实验载体。基于此，本文以RBL-2H3                         物福利伦理审查委员会批准（伦理号：YLS2022-58）。
          细胞为研究对象，探究红花提取物直接诱导以及超剂量                                大鼠嗜碱性白血病细胞株 RBL-2H3 购自中国科学
          红花提取物致敏血清诱导，对RBL-2H3细胞免疫毒性的                         院上海细胞库。
          影响及潜在机制，旨在为红花临床合理用药及相关风险                            2 方法
          防控提供科学依据，同时也为中药的潜在风险探究提供                            2.1 红花提取物的制备
          一种可行的研究范式。                                              根据本课题组前期建立的方法，将红花药材用10倍
          1 材料                                                量水煎煮 2 次（1.5 h/次），滤过，合并提取液，喷雾干燥，
          1.1 主要仪器                                            待用。红花提取物的生药含量为4.486 g，高效液相色谱
              YXQ-LS-100A 型 电 热 压 力 蒸 汽 消 毒 器 、GZX-           法测定其含量约为0.9%（以羟基红花黄色素A计）。
          9140MBE 型电热恒温鼓风干燥箱、BSC-1300ⅡA2 型生                   2.2 细胞培养
          物安全柜、SW-CJ-2F 型超净工作台均购自上海博迅实                            将 RBL-2H3 细胞置于含 15% 优质胎牛血清、1% 青
          业有限公司，Elix3 型纯水仪购自美国 Millipore 公司，                  霉素-链霉素双抗以及1%非必需氨基酸溶液的MEM培
          MCO-15AC型CO2培养箱购自日本Sanyo公司，HW.SY-P                  养基中培养，每 2～3 d 更换 1 次培养液。当细胞融合度
          型智能恒温水浴锅购自北京东方精瑞科技发展有限公                             达 80% 时，按照 1∶3 的比例进行传代，置于 37 ℃饱和湿
          司，ECLIPSE Ti-s 型倒置荧光显微镜购自日本 Nikon 公                 度的培养箱中培养，取处于对数生长期的细胞进行传代
          司，TDL-50B型台式低速离心机购自上海安亭科学仪器                         及后续实验。
          厂，DW-HL328型超低温冷冻储存箱购自中科美菱低温                         2.3 红花提取物直接诱导对RBL-2H3细胞免疫毒性的
                                   TM
          科技股份有限公司，Varioskan  LUX型多功能酶标仪购                     影响
          自美国 Thermo Fisher Scientific 公司，CytoFLEX 型流式        2.3.1 细胞形态学观察及脱颗粒计数
          细胞仪购自美国Beckman Coulter公司。                               取处于对数生长期的RBL-2H3细胞，经消化液消化
          1.2 主要药物与试剂                                         处理后，使用完全培养基对细胞进行重悬，并将细胞密
                                                                            4
                                                                               －1
              红花药材购自浙江永宁药业股份有限公司，经北京                          度调整至 2×10  mL 。于无菌 12 孔板中铺设细胞圆
          大学药学院屠鹏飞教授鉴定为菊科植物红花Carthamus                        片，取 500 μL 细胞悬液接种于圆片之上。待细胞贴壁

          · 1004 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 8                              中国药房  2026年第37卷第8期
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