Page 54 - 《中国药房》2026年6期
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2.2.5 硬尖神香草及活性成分对 HASMCs 上清液中                       二维码查看“增强出版”板块中的附图3。
          TNF-α、IL-6水平的影响                                     2.2.7 硬尖神香草及活性成分对 HASMCs 的 ROS 水平
              取对数生长期的 HASMCs，按“2.2.3”项下方法分                    的影响
          组、干预、培养后，收集各组细胞上清液，按照试剂盒说                               取对数生长期的 HASMCs，按“2.2.3”项下方法分
          明书操作，使用酶标仪检测其 TNF-α、IL-6 水平。结果                      组、干预、培养后，收集细胞，按照 ROS 检测试剂盒说明
         （表 1）显示，与正常组比较，模型组细胞上清液中 IL-6、                       书操作，使用酶标仪测定并以正常组为参照计算ROS相
          TNF-α 水平均显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，各药                     对比值。结果（表1）显示，与正常组比较，模型组细胞中
          物组细胞上清液中 IL-6、TNF-α 水平均显著降低（P＜                      的ROS相对比值显著升高（P＜0.05）；与模型组比较，各
          0.05），且硬尖神香草低、中、高质量浓度组的变化呈浓度                        药物组细胞中的 ROS 相对比值均显著降低（P＜0.05），
          依赖趋势。                                               且硬尖神香草低、中、高质量浓度组的变化呈浓度依赖
          2.2.6 硬尖神香草及活性成分对HASMCs迁移的影响                        趋势。
             （1）划痕实验：取对数生长期的HASMCs，按“2.2.3”                   2.2.8 硬尖神香草及活性成分对HASMCs形态的影响
          项下方法分组、干预。使用无菌枪头在孔板内垂直划                                 取对数生长期的 HASMCs，按“2.2.3”项下分组、干
          痕，分别于培养0、24 h时使用显微镜观察，采用Image J                     预、培养后，收集细胞，使用显微镜观察其形态并拍照。
          软件计算划痕面积，并按下式计算细胞迁移率：迁移率                            结果（图1）显示，正常组细胞呈典型多角形或长梭形，胞
         （%）＝（0 h 划痕面积－24 h 划痕面积）/0 h 划痕面积×                   质丰富，轮廓清晰，排列密集成束，具有明显的“峰谷”结
          100%。结果（表 1）显示，随时间延长，正常组细胞的迁                        构；与正常组比较，模型组细胞在形态上无明显差异；经
          移速度加快、迁移细胞数量增多；与正常组比较，模型组                           不同质量浓度的硬尖神香草干预后，细胞收缩变圆，数
          细胞的划痕面积明显缩小，迁移率显著升高（P＜0.05）；                        量逐渐减少且呈浓度依赖性趋势；经新绿原酸、金合欢
          与模型组比较，各药物组细胞的划痕面积明显增大，迁                            素、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷酸干预后，少数细胞变
          移率均显著降低（P＜0.05），且硬尖神香草低、中、高质                        圆并伴有数量减少；经丹酚酸B干预后，细胞形态和数量
          量浓度组的变化呈浓度依赖趋势。各组细胞划痕实验                             改变较为明显，多数细胞变圆。
          的显微图可扫描本文首页二维码查看“增强出版”板块                            2.2.9 硬尖神香草及活性成分对HASMCs周期的影响
          中的附图2。                                                  取对数生长期的 HASMCs，按“2.2.3”项下分组、干
             （2）Transwell 实验：将 HASMCs 接种于 Transwell 小         预、培养后，收集细胞，用预冷的磷酸盐缓冲液洗涤，于
          室上层，将完全培养基加入小室下层。细胞按“2.2.3”项                        4 ℃下以1 500 r/min离心10 min，收集细胞沉淀，逐滴加
          下方法分组、干预、培养后，取出小室，清洗；收集上层底                          入预冷的 75% 乙醇，于 4 ℃下固定过夜；以 1 500 r/min
          部未穿膜的细胞，依次经0.4%中性甲醛固定、0.5%结晶                        离心10 min，收集细胞沉淀，加入PI/RNase染液，室温避
          紫染色后，使用显微镜观察并计数，并按下式计算Trans-                        光15 min后，使用流式细胞仪测定细胞周期并记录不同
          well穿过率：穿过率（%）＝给药组穿膜细胞数量/正常组                        周期的细胞比例。结果（表2）显示，与正常组比较，模型
          穿膜细胞数量×100%。结果（表 1）显示，与正常组比                         组的 G0/G1期细胞比例显著降低，S、G2/M 期细胞比例显
          较，模型组的穿膜细胞数量增多，Transwell 穿过率显著                      著升高（P＜0.05）；与模型组比较，各药物组的G0/G1期细
          升高（P＜0.05）；与模型组比较，各药物组的穿膜细胞数                        胞比例均显著升高，S、G2/M 期细胞比例大部分显著降
          量明显减少，Transwell穿过率均显著降低（P＜0.05），且                   低（P＜0.05）。值得注意的是，硬尖神香草中质量浓度
          硬尖神香草低、中、高质量浓度组的变化呈浓度依赖趋                            组和丹酚酸B组的S期细胞比例显著升高（P＜0.05），表
          势。各组细胞 Transwell 实验的显微图可扫描本文首页                      明硬尖神香草在不同质量浓度下表现出不同的阻滞位










                 A.正常组               B.模型组         C.硬尖神香草高质量浓度组       D.硬尖神香草中质量浓度组       E.硬尖神香草低质量浓度组









                F.新绿原酸组             G.金合欢素组             H.丹酚酸B组       I.槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷      J.地塞米松组
                                                                              酸组
                                              图1 各组细胞形态比较显微图


          · 736 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 6                               中国药房  2026年第37卷第6期
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