Page 75 - 《中国药房》2026年5期
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60 2.4.3 NIR照射后GA-ICG-Lip-gel对细胞活力的影响
37 ℃条件下不加明胶酶 37 ℃条件下加明胶酶
取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
42 ℃条件下不加明胶酶 42 ℃条件下加明胶酶 3
40
累积释放率/% 的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为不同浓度
GA-ICG-Lip 组 、GA-ICG-Lip+NIR 组 、GA-ICG-Lip-gel
组、GA-ICG-Lip-gel+NIR组(GA质量浓度均分别为0.5、
20
0.6、0.8、1.0 μg/mL,浓度根据“2.4.2”项下结果设置),每
0 组设 6 个复孔;各组加入相应药液培养 4 h 后,GA-ICG-
0 10 20 30 40 50 60 70 80 Lip+NIR 组 和 GA-ICG-Lip-gel+NIR 组 采 用 NIR(808
t/h 2
图5 GA-ICG-Lip-gel在不同条件下的体外释药曲线 nm,2.5 W/cm)照射3 min,继续培养至24 h;再同“2.4.2”
项下方法处理,计算细胞抑制率。结果(图7)显示,不同
2.4.2 GA-ICG-Lip-gel对细胞活力的影响
GA浓度下,与NIR照射前相比,NIR照射后GA-ICG-Lip
3
取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
和 GA-ICG-Lip-gel 对细胞的抑制率均显著升高(P<
的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为不同浓度
0.05),且与 GA-ICG-Lip+NIR 组相比,GA-ICG-Lip-gel+
GA 组、GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-gel 组(GA 质量浓
NIR 组细胞抑制率有升高趋势。这表明 NIR 照射能有
度为 0.5、0.6、0.8、1.0 μg/mL,浓度根据预实验结果设
效激发GA-ICG-Lip-gel的光热协同抗肿瘤效应。
置),另设置空白对照组(不含细胞,含 CCK-8 试剂)、阴
120 GA-ICG-Lip组
性对照组(含细胞和完全培养基),每组设6个复孔。各 100 GA-ICG-Lip+NIR组
GA-ICG-Lip-gel组
GA-ICG-Lip-gel+NIR组
组加入相应药液/培养基,继续培养 24 h,然后加入 100 80 a b
μL 10% CCK-8 试剂,继续培养 2 h;然后采用酶标仪于 细胞抑制率/% 60 b a b
450 nm波长下检测各孔光密度(optical density,OD)值, 40 a b a
并 计 算 细 胞 抑 制 率 ,细 胞 抑 制 率 =(OD 阴性对照组 - 20
OD 给药组)/(OD 阴性对照组-OD 空白对照组)×100%。同法考察药 0
0.5 0.6 0.8 1.0
物干预48、72 h后的效果。采用GraphPad Prism 9.5.0软 GA质量浓度/(μg/mL)
a:与GA-ICG-Lip组比较,P<0.05;b:与GA-ICG-Lip-gel组比较,
件进行统计分析,数据以 x±s 表示;多组间比较采用单
P<0.05。
因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;检验水 图7 NIR照射后各组细胞抑制率比较(x±s,n=6)
准 α=0.05。结果(图 6)显示,干预 24、48、72 h 后,在不
2.4.4 细胞对GA-ICG-Lip-gel的摄取行为考察
同 GA 浓度下,与 GA 组比较,GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-
3
取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
Lip-gel 组 MCF-7 细胞抑制率均显著升高(P<0.05);另
的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为 ICG 组(因
外,与GA-ICG-Lip组比较,GA-ICG-Lip-gel组MCF-7细
GA 无荧光特性,故以 ICG 等效代替 GA,质量浓度为
胞抑制率有升高趋势。这表明 GA-ICG-Lip-gel 可有效
0.09 μg/mL)和 GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-gel 组(GA
抑制乳腺癌细胞增殖。
质量浓度均为 0.6 μg/mL),每组设 3 个复孔。各组细胞
120 GA组 120 GA组
GA-ICG-Lip组 GA-ICG-Lip组
100 GA-ICG-Lip-gel组 100 GA-ICG-Lip-gel组 a a a a 加入相应药液培养后,分别于不同时间点(0.5、1、2、4 h)
细胞抑制率/% 80 a a a a a 细胞抑制率/% 80 a a a 收集细胞,经磷酸盐缓冲液清洗后,以 4% 多聚甲醛固
a
60
60
定,再使用DAPI进行细胞核染色,采用荧光显微镜观察
40
40
20 a a a 20 (摄取后呈玫红色荧光),并拍照。结果(图8)显示,不同
0 0
0.5 0.6 0.8 1.0 0.5 0.6 0.8 1.0 时间点下,与 ICG 组比较,GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-
GA质量浓度/(μg/mL) GA质量浓度/(μg/mL)
A.干预24 h B.干预48 h gel 组细胞的玫红色荧光均增强,且 GA-ICG-Lip-gel 组
120 GA组
GA-ICG-Lip组 a a 更明显。这表明 MCF-7 细胞对 GA-ICG-Lip-gel 的摄取
100 GA-ICG-Lip-gel组 a a 作用较强。
a
细胞抑制率/% 80 a a a 2.4.5 GA-ICG-Lip-gel对细胞迁移的影响
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40
3
20 取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
0 的密度接种于6孔板中,培养24 h后,在细胞表面划痕。
0.5 0.6 0.8 1.0
GA质量浓度/(μg/mL) 划痕完成后,采用Image J软件测量划痕面积(记为S 初 ),
C.干预72 h
a:与相应浓度GA组比较,P<0.05。 再将细胞分为空白组和 GA 组、GA-ICG-Lip 组、GA-
图6 各组细胞抑制率比较(x±s,n=6) ICG-Lip-gel 组、GA-ICG-Lip+NIR 组、GA-ICG-Lip-gel+
中国药房 2026年第37卷第5期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 5 · 617 ·

