Page 75 - 《中国药房》2026年5期
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60                                        2.4.3 NIR照射后GA-ICG-Lip-gel对细胞活力的影响
                        37 ℃条件下不加明胶酶  37 ℃条件下加明胶酶
                                                                 取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
                        42 ℃条件下不加明胶酶  42 ℃条件下加明胶酶                                                      3
                   40
                   累积释放率/%                                   的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为不同浓度
                                                             GA-ICG-Lip 组 、GA-ICG-Lip+NIR 组 、GA-ICG-Lip-gel
                                                             组、GA-ICG-Lip-gel+NIR组(GA质量浓度均分别为0.5、
                   20
                                                             0.6、0.8、1.0 μg/mL,浓度根据“2.4.2”项下结果设置),每
                    0                                        组设 6 个复孔;各组加入相应药液培养 4 h 后,GA-ICG-
                      0    10   20   30   40   50   60   70   80  Lip+NIR 组 和 GA-ICG-Lip-gel+NIR 组 采 用 NIR(808
                                  t/h                                    2
          图5 GA-ICG-Lip-gel在不同条件下的体外释药曲线                     nm,2.5 W/cm)照射3 min,继续培养至24 h;再同“2.4.2”
                                                             项下方法处理,计算细胞抑制率。结果(图7)显示,不同
          2.4.2 GA-ICG-Lip-gel对细胞活力的影响
                                                             GA浓度下,与NIR照射前相比,NIR照射后GA-ICG-Lip
                                                    3
              取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
                                                             和 GA-ICG-Lip-gel 对细胞的抑制率均显著升高(P<
          的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为不同浓度
                                                             0.05),且与 GA-ICG-Lip+NIR 组相比,GA-ICG-Lip-gel+
          GA 组、GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-gel 组(GA 质量浓
                                                             NIR 组细胞抑制率有升高趋势。这表明 NIR 照射能有
          度为 0.5、0.6、0.8、1.0 μg/mL,浓度根据预实验结果设
                                                             效激发GA-ICG-Lip-gel的光热协同抗肿瘤效应。
          置),另设置空白对照组(不含细胞,含 CCK-8 试剂)、阴
                                                                         120   GA-ICG-Lip组
          性对照组(含细胞和完全培养基),每组设6个复孔。各                                      100   GA-ICG-Lip+NIR组
                                                                               GA-ICG-Lip-gel组
                                                                               GA-ICG-Lip-gel+NIR组
          组加入相应药液/培养基,继续培养 24 h,然后加入 100                                  80                  a  b
          μL 10% CCK-8 试剂,继续培养 2 h;然后采用酶标仪于                              细胞抑制率/%  60  b  a  b
          450 nm波长下检测各孔光密度(optical density,OD)值,                          40  a  b  a
          并 计 算 细 胞 抑 制 率 ,细 胞 抑 制 率 =(OD 阴性对照组 -                         20
          OD 给药组)/(OD 阴性对照组-OD 空白对照组)×100%。同法考察药                           0
                                                                              0.5             0.6             0.8               1.0
          物干预48、72 h后的效果。采用GraphPad Prism 9.5.0软                                 GA质量浓度/(μg/mL)
                                                                a:与GA-ICG-Lip组比较,P<0.05;b:与GA-ICG-Lip-gel组比较,
          件进行统计分析,数据以 x±s 表示;多组间比较采用单
                                                             P<0.05。
          因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验;检验水                          图7 NIR照射后各组细胞抑制率比较(x±s,n=6)
          准 α=0.05。结果(图 6)显示,干预 24、48、72 h 后,在不
                                                             2.4.4 细胞对GA-ICG-Lip-gel的摄取行为考察
          同 GA 浓度下,与 GA 组比较,GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-
                                                                                                       3
                                                                 取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
          Lip-gel 组 MCF-7 细胞抑制率均显著升高(P<0.05);另
                                                             的密度接种于 96 孔板中,培养 24 h 后,分为 ICG 组(因
          外,与GA-ICG-Lip组比较,GA-ICG-Lip-gel组MCF-7细
                                                             GA 无荧光特性,故以 ICG 等效代替 GA,质量浓度为
          胞抑制率有升高趋势。这表明 GA-ICG-Lip-gel 可有效
                                                             0.09 μg/mL)和 GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-gel 组(GA
          抑制乳腺癌细胞增殖。
                                                             质量浓度均为 0.6 μg/mL),每组设 3 个复孔。各组细胞
           120   GA组                120   GA组
                 GA-ICG-Lip组              GA-ICG-Lip组
           100   GA-ICG-Lip-gel组    100   GA-ICG-Lip-gel组  a a  a  a  加入相应药液培养后,分别于不同时间点(0.5、1、2、4 h)
           细胞抑制率/%  80  a  a  a  a  a  细胞抑制率/%  80  a  a  a  收集细胞,经磷酸盐缓冲液清洗后,以 4% 多聚甲醛固
                                              a
                                     60
            60
                                                             定,再使用DAPI进行细胞核染色,采用荧光显微镜观察
                                     40
            40
            20  a a  a               20                     (摄取后呈玫红色荧光),并拍照。结果(图8)显示,不同
            0                        0
               0.5          0.6          0.8              1.0  0.5          0.6          0.8              1.0  时间点下,与 ICG 组比较,GA-ICG-Lip 组、GA-ICG-Lip-
                 GA质量浓度/(μg/mL)           GA质量浓度/(μg/mL)
                   A.干预24 h                 B.干预48 h         gel 组细胞的玫红色荧光均增强,且 GA-ICG-Lip-gel 组
                       120  GA组
                            GA-ICG-Lip组  a  a                更明显。这表明 MCF-7 细胞对 GA-ICG-Lip-gel 的摄取
                       100  GA-ICG-Lip-gel组  a  a            作用较强。
                                 a
                       细胞抑制率/%  80  a  a  a                  2.4.5 GA-ICG-Lip-gel对细胞迁移的影响
                        60
                        40
                                                                                                       3
                        20                                       取对数生长期的 MCF-7 细胞适量,以 5×10 个/孔
                        0                                    的密度接种于6孔板中,培养24 h后,在细胞表面划痕。
                           0.5          0.6          0.8              1.0
                             GA质量浓度/(μg/mL)                  划痕完成后,采用Image J软件测量划痕面积(记为S 初 ),
                               C.干预72 h
             a:与相应浓度GA组比较,P<0.05。                            再将细胞分为空白组和 GA 组、GA-ICG-Lip 组、GA-
                图6 各组细胞抑制率比较(x±s,n=6)                        ICG-Lip-gel 组、GA-ICG-Lip+NIR 组、GA-ICG-Lip-gel+
          中国药房  2026年第37卷第5期                                                 China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 5    · 617 ·
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