Page 80 - 《中国药房》2026年3期

2.5.5 加样回收率试验 μm）的分离效果、色谱峰峰形均较好。此外，本研究还
取已知含量的样品（编号 S7）6 份，每份 1.0 g，置于 分别考察了不同流动相（甲醇-水、甲醇-0.1% 磷酸、乙
100 mL具塞锥形瓶中，加甲醇30 mL使其溶解。分别按 腈-0.1% 磷酸和甲醇-0.1% 甲酸）及不同检测波长（220、
各成分含量 100% 的比例加入 319 μL NGA 对照品储备 230、250、270、290、310、330 nm），经综合比较色谱峰数
液、472 μL CHA 对照品储备液、409 μL CGA 对照品储 量、峰面积、峰形、分离度和基线稳定性等关键参数，最
备液、1 504 μL FTA对照品储备液、203 μL 3，5-O-DA对 终确定流动相为甲醇-0.1% 磷酸、检测波长为 330 nm。
照品储备液、254 μL 4，5-O-DA 对照品储备液、115 μL 3.2 供试品溶液制备方法的确定
AGC对照品储备液，按“2.2.2”项下方法制备加样回收试 本研究以色谱峰的信息丰富度、峰形和相对峰面积
验用供试品溶液，然后按“2.1”项下色谱条件进样测定， 作为综合评估标准，系统探讨了不同提取溶剂（50%、
记录峰面积，并计算加样回收率。结果显示，NGA、 70%、100%甲醇）、超声时间（30、45、60 min）以及蒸发干
CHA、CGA、FTA、3，5-O-DA、4，5-O-DA、AGC 的平均加 燥后所用溶剂（水、100%甲醇、50%甲醇和10%甲醇）对
样 回 收 率 分 别 为 96.12%、95.71%、96.08%、96.44%、 目标成分提取效果的影响。经实验分析，最终确定供试
97.01%、103.20%、102.24%，RSD 分别为 1.99%、0.91%、 品溶液的最佳制备条件为：采用体积分数为 100% 的甲
2.38%、2.31%、1.15%、1.81%、0.70%（n＝6），表明该方法 醇作为提取溶剂，设定超声提取时间为 30 min，蒸干后
的准确度较好。 使用10%甲醇溶解。
2.5.6 多成分含量测定 3.3 指纹图谱化学模式识别的结果分析
取14批清瘟护肺颗粒样品，按“2.2.2”项下方法制备 本研究通过聚类分析和 PCA 与 OPLS-DA 发现，14
供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面 批清瘟护肺颗粒样品可被分为3类，表明不同批次清瘟
积，并采用外标法计算7个成分的含量。平行测定3次， 护肺颗粒成分存在一定差异。这种差异可能与中药饮
取平均值。结果（表 3）显示，NGA、CHA、CGA、3，5-O- 片原料质量的批次间差异以及制剂生产工艺等导致的
DA、FTA、4，5-O-DA、AGC 的含量范围分别为 0.210 4～ 成分含量变化有关。本研究以 VIP 值＞1 为条件，共筛
0.458 7、0.269 1～0.506 3、0.228 1～0.461 1、0.443 9～ 选出 5 个影响批次间质量差异的主要成分，分别为 4 号
1.044 6、0.066 7～0.155 7、0.062 8～0.143 8、0.057 4～ 峰（未知）、11号峰（FTA）、8号峰（未知）、9号峰（未知）、1
0.105 7 mg/g。该结果提示，各批次样品中相同成分的含 号峰（未知）。本课题组后续将对仍未指认的成分进行
量存在一定波动。其中，S3、S4、S7、S8样品中各成分的 研究确认，以更全面地评价清瘟护肺颗粒的质量。
含量较其他批次样品高。 3.4 含量测定成分的选择
表3 14 批清瘟护肺颗粒中 7 个成分的含量测定结果 清瘟护肺颗粒以金银花、连翘为君，疏解风热、清热
（mg/g，n＝3） 解毒；大青叶、玄参、麦冬、防风、紫苏叶、淡竹叶、茵陈为
编号 NGA CHA CGA 3，5-O-DA FTA 4，5-O-DA AGC 臣，助君清肺止咳、透邪生津、兼利湿邪；桔梗、浙贝母、
S1 0.210 4 0.277 8 0.228 1 0.896 6 0.072 6 0.070 9 0.081 3 苦杏仁、党参、茯苓、炒白术为佐，宣肺化痰、健脾益气、
S2 0.219 3 0.269 1 0.229 5 0.707 6 0.067 1 0.065 2 0.057 4
S3 0.439 1 0.481 2 0.440 3 1.010 2 0.152 9 0.143 1 0.100 6 防邪复犯；甘草为使，调和诸药。全方共奏疏解风热、清
[11]
S4 0.454 0 0.505 6 0.461 1 1.044 6 0.154 4 0.142 6 0.104 6 肺止咳、固护脾胃之功 。NGA、CHA、CGA、FTA、3，5-
S5 0.220 6 0.271 4 0.231 8 0.716 0 0.066 7 0.062 8 0.058 6 O-DA、4，5-O-DA、AGC 多为样品色谱图中响应值较高
S6 0.214 0 0.284 8 0.234 6 0.9386 0.078 8 0.076 3 0.079 5 的成分，且大多是该制剂中君药金银花、连翘在 2020 年
S7 0.458 7 0.506 3 0.460 4 1.044 5 0.155 7 0.143 8 0.105 7
S8 0.437 7 0.480 4 0.439 1 0.997 0 0.144 0 0.132 7 0.100 7 版《中国药典》（一部）中收录的含量测定指标性成分。
S9 0.297 2 0.358 9 0.296 2 0.447 9 0.087 7 0.092 9 0.096 7 其中，CHA、3，5-O-DA、4，5-O-DA 为金银花的指标性成
S10 0.243 8 0.345 7 0.263 3 0.813 9 0.087 4 0.100 1 0.081 8 分，FTA 为连翘的指标性成分，AGC 为臣药玄参的指标
S11 0.239 2 0.337 1 0.258 4 0.810 8 0.082 4 0.094 0 0.080 3
[12]
S12 0.243 1 0.344 8 0.262 3 0.806 3 0.081 3 0.092 9 0.079 8 性成分 。现代药理学研究表明，CHA具有抗菌、抗炎、
S13 0.297 3 0.358 9 0.295 3 0.443 9 0.083 5 0.087 5 0.098 2 抗病毒等多种生理活性，可通过调控微 RNA-223/NOD
S14 0.239 2 0.337 2 0.258 5 0.805 2 0.080 6 0.091 9 0.084 9
样受体蛋白3信号轴降低脂多糖诱导的急性肺损伤小鼠
3 讨论 的炎症反应，缓解肺组织病理损伤 ；3，5-O-DA 能降低
[13]
3.1 色谱条件的优化 炎症因子水平，对脂多糖诱发的急性肺损伤小鼠具有保
[14]
[15]
清瘟护肺颗粒为复方制剂，由多味药材组成，且所 护作用 。Wu 等 研究发现，CHA、3，5-O-DA、4，5-O-
含化学成分极性差异较大。本研究对比其他色谱柱 DA 等咖啡酰奎宁酸类化合物均有一定的化痰功效，且
[TC-C18 （2）（250 mm×4.6 mm，5 μm）、Poroshell 120 PFP 在氨水致小鼠咳嗽模型中具有延长咳嗽潜伏期、降低咳
（150 mm×4.6 mm，2.7 µm）] 发 现 ，使 用 Agilent 嗽频率的作用。FTA作为连翘的活性成分，已被证实具
ZORBAX Eclipse Plus-C18 色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 有抗炎、抗氧化、抗感染、调节免疫等药理学特性，还能

· 342 · China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 3 中国药房 2026年第37卷第3期