Page 52 - 《中国药房》2026年2期
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2 方法与结果
          2.1 HQD-SAN的制备与表征
          2.1.1 HQD-SAN的制备
                           [9]
              参考相关文献 采用高速离心结合透析法制备
          HQD-SAN：按质量比 3∶2∶2∶2 称取黄芩、白芍、炙甘草、
          大枣饮片，混匀，加入 10 倍量水，煎煮 1 h，趁热滤过；药                     A.透射电子显微镜图（标尺为0.5 µm） B.透射电子显微镜图（标尺为200 nm）
          渣加8倍量水，煎煮1 h，趁热滤过；合并2次滤液，浓缩，                           图1 TBF-HQD-SAN NPs的透射电子显微镜图
          制成每 1 mL 含 1 g 生药的 HQD 提取液，以 12 000 r/min
                                                              0.4 mL TBF-HQD-SAN NPs溶液加入经过预饱和的超滤
          离心 30 min，取上清液，加至透析袋（每次 5 mL，共 54
                                                              离心管（0.5 mL，截留分子量 3 000 Da）上层，以 8 000
          mL）中，随即将透析袋装入加有 300 mL水的烧杯中，于
                                                              r/min 离心 10 min 后，将下层溶液取出 100 µL，加甲醇 2
          25 ℃以200 r/min透析30 min；取出透析袋中的样品，以
                                                              倍稀释，经 0.45 μm 微孔滤膜滤过后，行 HPLC 进样分
          12 000 r/min 离心 30 min，收集上层液。上述透析-离心
                                                              析，作为 TBF-HQD-SAN NPs 中未包封的 TBF 量（W1 ），
          操作重复2次，收集透析袋中的样品即为HQD-SAN，真
                                                              实 验 重 复 3 次 。 EE（%）＝（W2－W1 ）/W2×100%；DL
          空冷冻干燥24 h，得相应冻干粉，备用。
                                                             （%）＝（W2－W1 ）/W3×100%（W3为 HQD-SAN 药物称样
          2.1.2 Zeta电位、粒径、多分散系数的测定
                                                              质量）。HPLC 色谱条件：以岛津 Shim-pack GIS C18 （4.6
              取HQD-SAN冻干粉适量，加水超声（功率50 W，频
                                                              mm×250 mm，5 μm）为色谱柱；以甲醇（A）-0.1% 磷酸
          率 40 kHz）分散后，采用纳米粒度电位仪测定其 Zeta 电
                                                              溶液（B）为流动相进行等度洗脱（0～60 min，41%A）；检
          位、粒径、多分散系数（polydispersity index，PDI），共测定
                                                              测波长为 222 nm；柱温为 40 ℃；流速为 1 mL/min；进样
          3 次。结果显示，HQD-SAN 的 Zeta 电位为（－8.81±
                                                              量为5 µL。结果显示，TBF-HQD-SAN NPs中TBF的EE
          0.57）mV，粒径为（128.90±2.87）nm，PDI 为 0.288 2±
                                                              为（99.49±0.71）%，DL为（3.22±0.10）%（n＝3）。
          0.020 0。                                            2.3 皮肤样品中TBF测定的方法学考察
          2.2 TBF-HQD-SAN NPs的制备与表征                           2.3.1 TBF对照品储备液的配制
          2.2.1 TBF-HQD-SAN NPs的制备                                精密称取 TBF 对照品 5.07 mg，用甲醇溶解并定容
                            [10]
              参 考 相 关 文 献 制 备 TBF-HQD-SAN  NPs：称 取            于 25 mL 容量瓶中，配制成质量浓度为 202.8 µg/mL 的
          22.4 mg HQD-SAN 冻干粉和 5 mg TBF 于 10 mL 西林瓶           TBF对照品储备液，4 ℃保存备用。
          中，加入 4 mL 蒸馏水，超声（功率 50 W，频率 40 kHz）30               2.3.2 色谱与质谱条件
          min，加入搅拌子放置于磁力搅拌器上，以760 r/min搅拌                         色谱条件：以岛津 Shim-pack Scepter C18 （2.1 mm×
          1.5 h，样品过 0.8 μm 的滤膜，即得 TBF-HQD-SAN NPs             100 mm，3 μm）为色谱柱；以0.1%甲酸水溶液（A）-甲醇
          溶液，冻干保存。                                           （B）为流动相进行梯度洗脱（0～1.1 min，5%B；1.1～2.0
          2.2.2 Zeta电位、粒径、PDI的测定                              min，5%B→95%B；2.0～4.0 min，95%B；4.0～4.01 min，
              取 TBF-HQD-SAN NPs 适量，加蒸馏水稀释后，采                  95%B→5%B；4.01～5.0 min，5%B）；流速为0.3 mL/min；
          用纳米粒度电位仪测定其 Zeta 电位、粒径、PDI，共测定                      柱温为40 ℃；进样量为1 μL。
          3 次。结果显示，TBF-HQD-SAN NPs 的 Zeta 电位为                     质谱条件：离子源为电喷雾离子源；正离子模式测
         （－14.63±0.85）mV，粒径为（177.60±2.57）nm，PDI 为             定；离子源喷雾电压为 4.5 kV；离子源温度为 550 ℃；喷
          0.197 4±0.007 9。                                    雾气压力为 55 psi；辅助加热气压力为 55 psi；气帘气压
          2.2.3 形态观察                                          力为33 psi；扫描模式为正离子多反应监测模式，通过母
              取 TBF-HQD-SAN NPs 适量，加蒸馏水稀释后，取                  离子（Q1，292.6 Da）至子离子（Q3，141.0 Da）的质荷比转
          一滴加至铜网上，红外灯干燥后，置于透射电子显微镜                            换进行检测，去簇电压、碰撞能量、碰撞室出口电压和入
          下观察形态并拍照。结果显示，TBF-HQD-SAN NPs 呈                     口电压分别为65、25、20、10 V。
          球形，粒径150～250 nm，与“2.2.2”项下粒径测定结果基                   2.3.3 空白皮肤样品的采集
          本一致。结果见图1。                                              取 1 只 SD 大鼠，经戊巴比妥钠腹腔注射麻醉后，使
          2.2.4 包封率和DL的测定                                     用脱毛膏脱去腹部毛，取腹部皮肤，立即置于－20 ℃冰
              采用超滤离心法测定 TBF-HQD-SAN NPs 的包封                   箱冷冻保存备用。
          率（encapsulation efficiency，EE）和 DL。取 1 mL TBF-      2.3.4 皮肤样品的处理
          HQD-SAN NPs溶液至5 mL容量瓶中，加甲醇超声溶解                          将皮肤组织置于室温解冻后，取适量大鼠皮肤样品
          并定容至刻度，经0.45 μm微孔滤膜滤过后，行HPLC进                       于10 mL EP管中，剪碎，加入5 mL甲醇，超声（功率50 W，
          样分析，作为 TBF-HQD-SAN NPs 中 TBF 总量（W2 ）；取              频率 40 kHz）提取 10 min，以 13 000 r/min 离心 10 min，


          · 182 ·    China Pharmacy  2026 Vol. 37  No. 2                               中国药房  2026年第37卷第2期
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