Page 83 - 《中国药房》2026年1期

carry-over effect did not interfere with the determination. The results of clinical application showed that the mean plasma drug
concentrations of isoniazid， rifampicin and pyrazinamide in patients with spinal tuberculosis were （3.62±2.80）， （8.55±4.57）， and
（20.12±6.56） μg/mL， respectively. The incidences of plasma drug concentrations falling below the effective peak concentrations
were 49.06%， 58.49% and 60.38%， respectively. CONCLUSIONS The method established in this study is rapid， accurate， and
demonstrates good stability， making it suitable for clinical monitoring of the plasma concentrations of isoniazid， rifampicin and
pyrazinamide in patients with spinal tuberculosis.
KEYWORDS spinal tuberculosis； anti-tuberculosis drugs； therapeutic drug monitoring； LC-MS/MS method； isoniazid；
rifampicin； pyrazinamide

结核病是一种由结核分枝杆菌感染导致的慢性感 药品检定研究院；甲醇为质谱纯，甲酸为分析纯，水为屈
染性疾病。世界卫生组织 2024 年度全球结核病防控报 臣氏蒸馏水。
告指出，全球因结核病导致的死亡病例约125万例，该疾 2 方法与结果
[1]
病仍然是全球重大公共卫生挑战之一 。目前，我国结 2.1 溶液的配制
核病的发病率在全球排名前3位，是结核病高负担国家 2.1.1 标准品和内标储备液的配制
[1]
之一 。 称取异烟肼、利福平、吡嗪酰胺标准品适量，以甲醇
脊柱结核是常见的肺外结核，临床特征以疼痛为 为溶剂，分别配制成质量浓度均为 10 mg/mL 的标准品
主；其病程发展缓慢，若不能及时诊断和治疗，易导致患 储备液，然后置于棕色玻璃瓶中，于－80 ℃低温冰箱中
者出现不可逆的神经损伤甚至瘫痪 [2―3] 。目前，脊柱结 避光保存。另取苯海拉明标准品适量，同法处理，配制
核的治疗以异烟肼、利福平、吡嗪酰胺等一线药物为 成质量浓度为10 mg/mL的内标储备液。
[4]
主 ，由于脊柱结核患者的感染通常较为严重，因此临床 2.1.2 标准曲线工作溶液和质控工作溶液的配制
上需联合多种抗结核药物（如异烟肼+利福平+吡嗪酰胺 精密移取“2.1.1”项下异烟肼、利福平和吡嗪酰胺标
[4]
联合方案）进行治疗，以提高患者治愈率 。研究发现， 准品储备液适量，置于同一容量瓶中混匀，用甲醇稀释
脊柱结核患者经抗结核药物治疗后，体内血药浓度存在 配制成上述成分质量浓度分别为 160、640、800 μg/mL

较大差异，从而影响抗结核药物疗效甚至导致治疗失 的混合标准品溶液。随后将混合标准品溶液进行梯度
[5]
败 。因此，对脊柱结核患者开展个体化药物治疗监测 稀释，制得异烟肼质量浓度分别为 5、10、20、40、80、160
具有重要意义。基于此，本研究拟采用液相色谱-串联 μg/mL，利福平质量浓度分别为20、40、80、160、320、640
质谱（LC-MS/MS）技术建立一种可同时测定脊柱结核患 μg/mL，吡嗪酰胺质量浓度分别为25、50、100、200、400、
者血浆中异烟肼、利福平与吡嗪酰胺浓度的方法，并将 800 μg/mL的系列混合标准曲线工作溶液。
其应用于临床，以期为脊柱结核患者的合理用药提供科 精密移取“2.1.1”项下异烟肼、利福平和吡嗪酰胺标
学依据。 准品储备液适量，用甲醇稀释配制成异烟肼质量浓度分
1 材料 别为 10、80、120 μg/mL，利福平质量浓度分别为 40、
1.1 主要仪器 320、480 μg/mL，吡嗪酰胺质量浓度分别为 50、400、600
AB Sciex TRIPLETM 4500 MD 型质谱仪购自美国 μg/mL的质控工作溶液。
AB SCIEX公司；Jasper 型高效液相色谱仪、AUW220D 2.1.3 内标工作溶液的制备
TM
型电子天平购自日本 Shimadzu 公司；GENIUS 6K-C 型 精密量取内标储备液适量，用甲醇稀释配制成苯海
低速自动平衡离心机购自湖南鑫奥科学仪器有限公司； 拉明质量浓度为5 μg/mL的内标工作溶液。

H2-16KR 型高速冷冻离心机购自可成科技股份有限 2.1.4 标准曲线样品与质控样品的制备
公司。 精密量取 90 μL血浆（由健康志愿者提供），分别加
1.2 主要药品与试剂 入10 μL系列混合标准曲线工作溶液或质控工作溶液，
异烟肼、利福平、吡嗪酰胺标准品（批号分别为 分别配制成标准曲线样品（异烟肼质量浓度为 0.5～16
RO1019TA13、R14A11Z121405、Y18D9C77841，纯度均 μg/mL、利福平质量浓度为2～64 μg/mL、吡嗪酰胺质量
为 98%）均购自上海源叶生物科技有限公司；苯海拉明 浓度为2.5～80 μg/mL）或质控样品（异烟肼低、中、高质
（内标）标准品（批号240309，纯度99.9%）购自中国食品 量浓度分别为1、8、12 μg/mL，利福平低、中、高质量浓度

中国药房 2026年第37卷第1期 China Pharmacy 2026 Vol. 37 No. 1 · 73 ·