Page 91 - 《中国药房》2025年23期

2.2 血浆样品的处理 察方法的准确度与精密度。每个浓度水平平行取3个样
取冷藏保存的全血样品，以 2 500 r/min离心 5 min， 品，在2 d内完成。各血浆样品按“2.2”项下方法处理后，
得到上层血浆样品。精密吸取血浆样品50 μL，置于1.5 按“2.1”项下色谱和质谱条件进行分析。准确度通过相
mL 离心管中，加入 200 μL 甲醇沉淀剂[含内标工作液， 对误差（relative error，RE）表示，精密度则以变异系数
其中内标∶甲醇＝1∶100（V/V），血浆∶甲醇＝1∶4（V/V）]， （coefficient of variation，CV）来体现。结果显示，各浓度
以 2 500 r/min 涡旋振荡 5 min，再以 12 000 r/min 离心 5 血浆样品批内和批间精密度考察的CV均不高于8.76%，
min后，取上清液20 μL至1.5 mL离心管中，加水100 μL 准确度考察的RE为－6.46%～5.49%，详见表2。
稀释，涡旋1 min混匀后用于进样分析。 2.6 血浆稳定性考察
2.3 专属性考察
取 5-FU 低、中、高浓度血浆质控品（浓度分别为
分别取空白血浆、5-FU血浆校准品S1、5-FU血浆校
202、1 024、5 038 ng/mL），每个浓度水平平行取 3 个样
准品S6和待测血浆样品，按“2.2”项下方法处理后，再按
品，按“2.2”项下方法处理后，按“2.1”项下色谱和质谱条
“2.1”项下色谱与质谱条件进样分析。结果（图1）显示，
件进行分析，考察血浆样品在室温放置 8 h、4 ℃冰箱放
5-FU的保留时间约为0.49 min，空白血浆中的内源性物
置 7 d、－20 ℃冰箱冻存 30 d、－80 ℃反复冻融 3 次及
质不影响5-FU的测定，表明该方法专属性良好。
10 ℃自动进样器放置 24 h 的稳定性。结果显示，5-FU
2.4 线性关系考察
低、中、高浓度血浆质控品稳定性考察的 CV 均不高于
取 5-FU 血浆校准品（S1～S6），分别按“2.2”项下方
13.94%，RE为－7.69%～7.09%，表明各血浆样品在上述
法处理后，按“2.1”项下色谱和质谱条件进行分析。以5-
各条件下的稳定性均良好，详见表3。
FU 浓度为横坐标（X），以 5-FU 峰面积与内标峰面积的
比值为纵坐标（Y），采用加权最小二乘法进行线性回归 2.7 全血稳定性考察
分析。结果显示，5-FU的线性回归方程为Y＝0.001 45X+ 2.7.1 不同体积稳定剂对全血样品中5-FU稳定性的影响
0.005 49（r＝0.997 7），其在 50～10 000 ng/mL 范围内线 取“1.3”项下不同患者全血样品，混合后于4 ℃冷藏
性关系良好。 保存。使用前，将全血样品置于 37 ℃恒温环境中孵育
2.5 准确度和精密度考察 20 min。精密量取氟尿嘧啶注射液适量，用0.9%氯化钠
取5-FU血浆校准品S1（浓度为50 ng/mL）和低、中、高 注射液稀释并定容，得到低（4 μg/mL）、高（100 μg/mL）
浓度血浆质控品（浓度分别为202、1 024、5 038 ng/mL）考 浓度的氟尿嘧啶工作溶液。精密量取 1 mL 全血样品，
900 900
600 600
cps cps
300 300
0 0
0.2 0.4 0.6 0.8 0.2 0.4 0.6 0.8
时间/min 时间/min
A.空白血浆
1 650 12 000 2
1 100 1 8 000
cps cps
550 4 000
0 0
0.2 0.4 0.6 0.8 0.2 0.4 0.6 0.8
时间/min 时间/min
B. 5-FU血浆校准品S1
180 000 1 12 000 2
120 000 8 000
cps cps
60 000 4 000
0 0
0.2 0.4 0.6 0.8 0.2 0.4 0.6 0.8
时间/min 时间/min
C. 5-FU血浆校准品S6
3 600 12 000 2
1
2 400 8 000
cps cps
1 200 4 000
0 0
0.2 0.4 0.6 0.8 0.2 0.4 0.6 0.8
时间/min 时间/min
D.待测血浆样品
13
1：5-FU；2：5-FU- C，N 2。
15
图1 5-FU和内标的典型色谱图
中国药房 2025年第36卷第23期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 23 · 2965 ·