Page 90 - 《中国药房》2025年23期
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after  blood  draw）.  This  approach  ensures  analytical  quality  while  offering  greater  adaptability  to  real-world  clinical  sampling
          conditions， significantly improving practical feasibility.
          KEYWORDS     5-fluorouracil； whole blood； stability； therapeutic drug monitoring； clinical sampling and delivery procedures


              5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-FU）是经典的抗代谢              色谱质谱联用仪（美国 AB 公司）、MIX-30S 型涡旋混合
          类化疗药物，广泛应用于结直肠癌、头颈部癌及其他实                            仪（杭州米欧仪器公司）、移液器（德国Eppendorf公司）、
          体肿瘤的联合化疗方案中。目前，5-FU在临床常规给药                          Fresco 21 型高速冷冻离心机（美国 Thermo Fisher Scien‐
          时主要基于患者体表面积进行剂量计算，但有研究表                             tific公司）、HYCD-282C型医用冷藏冷冻箱（青岛海尔股
          明，基于体表面积给药的患者群体中，5-FU 在个体间的                         份有限公司）。
          暴露水平差异可达 100 倍左右，多数患者未能达到理想                         1.2 试剂
          的药物暴露量      [1―2] 。国内外权威指南强烈推荐对接受 5-                    抗肿瘤药物样品萃取液（包括沉淀剂、稀释剂，批号
          FU 治疗的结直肠癌、头颈部癌等癌症患者实施治疗药                           K2402022），5-FU 稳定剂（成分为吉美嘧啶，浓度为 2
          物监测（therapeutic drug monitoring，TDM），以实现精准          mg/mL），5-FU血浆校准品（共6份，编号S1～S6，浓度分
          化、个体化的抗肿瘤药物治疗 。                                     别为50、100、500、1 000、2 500、10 000 ng/mL），5-FU低、
                                   [3]
              目前，5-FU 的血药浓度检测在技术上存在显著挑                        中、高浓度（202、1 024、5 038 ng/mL）血浆质控品试剂盒
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          战，这主要归因于其药代动力学特性——约 80% 的 5-                        和内标5-FU- C，N2工作液均购自浙江迪赛思诊断技术
          FU 可在体内经二氢嘧啶脱氢酶（dihydropyrimidine de‐               有限公司（批号均为 RM2404050）；氟尿嘧啶注射液（批
          hydrogenase，DPD）作用分解代谢为非活性产物 。全血                    号 FA241002，规格为 10 mL∶0.25 g）购自上海旭东海普
                                                  [3]
          是进行5-FU TDM的理想样品类型，但在外周静脉血中                         药业有限公司；甲醇（色谱纯，批号1I351607426）购自美
          仍存在具有活性的DPD，在体外条件下该酶会持续催化                           国 Merck 公司；甲酸（质谱纯，批号 214911）购自美国
          5-FU 的降解反应，导致 5-FU 在全血中不稳定。笔者通                      Thermo Fisher Scientific公司；水为超纯水。
          过文献调研发现，既往关于 5-FU 方法学稳定性的研究                         1.3 全血样品
          多聚焦于血浆样品，关于其在全血状态下的稳定性，即                                本研究已获北京大学肿瘤医院（以下简称“本院”）
          从采样到离心获得血浆这一预处理阶段的研究，尚未见                            医学伦理委员会审批（批件号为 2024KT84），实验所用
          充分报道    [4―6] ；此外，目前市售试剂盒产品的分析流程及                   全血样品均来源于本院，所有入组患者均知情同意并签
          质控标准虽然涵盖了离心后血清/血浆样品的稳定性验                            署知情同意书。使用EDTA抗凝采血管采集血样，每位
          证，但普遍缺乏对血液样品在送达实验室进行前处理                             患者静脉全血不少于 2 mL。采血后立即将采血管轻柔
         （离心）前的转运条件要求的相关研究。全血样品的稳                             颠倒混匀8～10次，避免剧烈振荡，于2～8 ℃保存备用。
          定性是 TDM 分析前阶段的关键环节，对后续血浆药物                          2 方法与结果
          浓度测定结果的准确性具有决定性影响。研究显示，血                            2.1 色谱与质谱条件
          液样品在室温下放置1 h即可引起某些分析物浓度发生                           2.1.1 色谱条件
                        [7]
          超过20%的变化 ；此外，样品运输中的温度波动及标准                              采用 C18 （2.1 mm×50 mm，2.6 μm）色谱柱，以 0.1%
          化操作程序的缺失，亦是导致分析前误差的重要来                              甲酸-2 mmol/L乙酸铵水溶液为流动相 A、0.1% 甲酸-甲
          源 [8―9] 。由于 TDM 需在特定药代动力学时间点（如达到                    醇溶液为流动相 B 进行梯度洗脱（0～0.8 min，80%A；
          峰浓度或谷浓度时）对采集的单次样品进行评估，若因                            0.8～1.3 min，80%A→10%A；1.3～2.5 min，10%A；2.5～
          分析前变量失控导致结果失真，临床将难以通过重复采                            2.6 min，10%A→80%A；2.6～3.0 min，80%A）；流速为
          样进行补救。因此，严格控制从采血至离心的时间间                             0.6 mL/min；柱温为45 ℃；进样量为2 μL。
          隔、规范运输与储存温度等分析前变量，是保证5-FU血                          2.1.2 质谱条件
          药浓度测定结果可靠性的必要措施。                                        离子源类型为电喷雾离子源，采用负离子扫描方
              本研究模拟了临床实际采样转运条件，采用高效液                          式；离子源电压为－4 500 V；离子源温度为550 ℃；气帘
          相色谱-串联质谱（HPLC-MS/MS）法系统考察了在分析                       气压强为 30 psi（1 psi＝6.895 kPa）；喷雾气压强为 60
          前阶段不同储存温度和时间下5-FU在全血样品中的稳                           psi；辅助加热气压强为55 psi；采用多反应监测模式。质
          定性，旨在为建立标准化的5-FU TDM临床采样转运流                         谱参数见表1。
          程提供科学依据。                                                       表1 5-FU和内标的质谱参数
          1 材料                                                待测物      母离子（m/z）  子离子（m/z）  去簇电压/V  碰撞能/V  扫描时间/ms  用途
                                                              5-FU      122.884  41.900  －55.00  －28.00  100  定量
          1.1 仪器                                              5-FU      129.100  42.100  －55.00  －26.00    50  定性
                                                  MD
                                                                  15
              本研究所用的主要仪器有AB SCIEX 4500 型液相                    5-FU- C，N 2  131.906  43.900  －20.00  －28.00  100  内标
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          · 2964 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 23                            中国药房  2025年第36卷第23期
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