Page 54 - 《中国药房》2025年23期

2.4 大鼠标准血浆样品和质控样品的配制 和日间精密度的 RSD 均小于 13%，准确度为 93.66%～
吸取大鼠空白血浆样品适量，加入100 μL利伐沙班 102.70%，符合2020年版《中国药典》生物样本的测定要
系列标准溶液和 200 μL 内标工作液，按“2.3”项下方法 求。结果见表1。

处理后，取上清液，即得系列标准血浆样品。另取“2.2” 2.8 基质效应考察
项下各质控工作液适量，同法配制定量下限和低、中、高 取大鼠空白血浆样品适量，共 6 份，按“2.3”项下方
质量浓度（0.66、1.64、160.00、1 000.00 ng/mL）的质控样 法处理后（不加内标工作液），即得空白基质；向空白基
品，备用。 质中加入定量下限和低、中、高质量浓度（0.66、1.64、
2.5 专属性考察 160.00、1 000.00 ng/mL）的利伐沙班质控工作液和内标
取大鼠空白血浆样品（不加内标）、定量下限质量浓 工作液，再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样分析，获得
度质控样品、给药 1 h 后血浆样品（即“2.11.1”项下利伐 利伐沙班峰面积与内标峰面积比值（A）；另用纯水替代
沙班单用组大鼠给予利伐沙班 1 h 后的血浆样品）各适 空白基质，其余操作同上，获得利伐沙班峰面积与内标
量，分别按“2.3”项下方法处理后，按“2.1”项下色谱与质 峰面积比值（B）。每个质量浓度均平行 6 份，基质效应
谱条件进样分析，记录色谱图（图1）。由图1可知，柳胺 用 A 与 B 的比值表示。结果显示，利伐沙班的基质效应
酚和利伐沙班的保留时间分别为1.46、1.50 min，两者检 范围为88.69%～106.16%，符合2020年版《中国药典》生
测通道互不影响，血浆中的内源性物质也不干扰测定， 物样本的测定要求。

表明该方法专属性良好。 2.9 稳定性考察
2.6 线性关系考察 按“2.4”项下方法配制低、高质量浓度（1.64、1 000.00
取“2.4”项下系列标准血浆样品适量，按“2.1”项下 ng/mL）的质控样品，每个质量浓度均平行 6 份，分别考
色谱与质谱条件进样分析，记录峰面积，以利伐沙班质 察其在室温（25 ℃）放置4 h、4 ℃放置24 h、－20 ℃反复
量浓度为横坐标（x，ng/mL）、利伐沙班与内标的峰面积 冻融3次、－20 ℃冻存7 d的稳定性。结果显示，在上述
比值为纵坐标（y）进行线性回归分析。结果显示，利 条件下，利伐沙班峰面积的 RSD 均小于 15%（n＝6），表
伐沙班的回归方程为y＝0.013 9x+0.023 9（r＝0.999 0）， 明样品稳定性良好。
线 性 范 围 为 0.66～1 000.00 ng/mL，定 量 下 限 为 0.66 2.10 提取回收率考察
ng/mL。 取大鼠空白血浆样品适量，共6份，加入定量下限和
2.7 精密度与准确度考察 低、中、高质量浓度（0.66、1.64、160.00、1 000.00 ng/mL）
分别取“2.4”项下定量下限和低、中、高质量浓度的 的利伐沙班质控工作液适量，按“2.3”项下方法处理后，
质控样品适量，每个质量浓度平行6份；同日内连续进样 再按“2.1”项下色谱与质谱条件进样分析，记录峰面积，
3 次以考察日内精密度，连续进样 3 d 以考察日间精密 并计算提取回收率。结果显示，利伐沙班的提取回收率
度，测得结果均以相对标准偏差（RSD）表示；准确度以 为94.71%～102.24%，符合2020年版《中国药典》生物样

实测值与理论值的比值表示。结果显示，利伐沙班日内 本的测定要求。
180 2.5×10 5 1 2.2×10 5 1

强度/cps 强度/cps 强度/cps

0 1 2 3 4 0 1 2 3 4 0 1 2 3 4
t/min t/min t/min
130 900 2 4.4×10 5 2
强度/cps 强度/cps 强度/cps

0 1 2 3 4 0 1 2 3 4 0 1 2 3 4
t/min t/min t/min
A.空白血浆样品 B.定量下限质量浓度质控样品 C.给药1 h后血浆样品
1：柳胺酚；2：利伐沙班。
图1 专属性考察结果

· 2932 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 23 中国药房 2025年第36卷第23期