Page 37 - 《中国药房》2025年23期
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表1 引物序列及产物扩增长度                           3.2 肾必宁颗粒对IgAN大鼠血清生化指标的影响
          引物名称                 引物序列              扩增长度/bp         与空白组比较,模型组大鼠血清中 BUN、Scr、ALT
          CXCL12       5′-AGTGACGGTAAGCCAGTCAGC-3′  115      水平均显著升高(P<0.05),Alb 水平显著降低(P<
                       3′-GGGCACAGTTTGGAGTGTTGAG-5′
          CXCR4        5′-AGACTATGACTCCAACAAGGAACCC-3′    81  0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠血清中 BUN、Scr、
                       3′-AAATAGATGGTGGGCAGGAAGAT-5′         ALT 水平均显著降低(P<0.05),Alb 水平均显著升高
          STAT3        5′-CAGTTCTCGTCCACCACCAA-3′  215      (P<0.05);并且,肾必宁颗粒高剂量组大鼠血清中BUN
                       3′-TCATTCCAAAGGGCCAAGAT-5′
          GAPDH        5′-CTGGAGAAACCTGCCAAGTATG-3′  138     水平显著低于肾必宁颗粒低剂量组(P<0.05),Scr 水平
                       3′-GGTGGAAGAATGGGAGTTGCT-5′
                                                             显著低于醋酸泼尼松组和肾必宁颗粒低剂量组(P<
          加 入 CXCL12、CXCR4、STAT3、p-STAT3、β -actin 一 抗        0.05)。结果见表3。
         (稀释比例均为1∶1 000),在4 ℃下孵育过夜;加入相应                      表3 各组大鼠血清中 BUN、Scr、Alb、ALT 水平比较
          二抗(稀释比例为 1∶3 000),在室温下孵育 30 min。以                       (x±s)
          ECL 发光液显影,利用化学发光成像系统成像,应用                           组别          n   BUN/(mmol/L) Scr/(μmol/L)  ALT/(U/L)  Alb/(g/L)
          Image J 软件分析条带灰度值。以目标蛋白与内参                          空白组           9  5.01±0.31  53.87±5.01  33.10±2.59  33.19±2.13
                                                              模型组         10  7.90±0.41 a  79.22±3.47 a  54.16±4.14 a  22.16±1.07 a
         (β-actin)蛋白条带灰度值的比值表示目标蛋白的相对表
                                                              醋酸泼尼松组      12  6.03±0.62 b  64.86±4.47 b  43.46±2.43 b  26.40±1.41 b
          达水平,以p-STAT3与STAT3蛋白条带灰度值的比值表                       肾必宁颗粒低剂量组   12  6.34±0.51 b  65.71±2.77 b  43.14±4.25 b  26.39±2.25 b
          示STAT3蛋白的磷酸化水平。                                     肾必宁颗粒高剂量组   12  5.93±0.34 bc  61.67±3.55 bcd  44.23±2.98 b  26.53±1.45 b
          2.8 肾组织中IL-6水平检测                                      a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与肾必宁
                                                             颗粒低剂量组比较,P<0.05;d:与醋酸泼尼松组比较,P<0.05。
              采用ELISA法检测。取“2.2”项下-80 ℃保存的大
                                                             3.3 肾必宁颗粒对IgAN大鼠肾组织病理形态学的影响
          鼠肾组织,解冻后制备组织匀浆,离心收集上清液,按照
                                                                 空白组大鼠肾小球结构完整,肾小管上皮细胞排列
          试剂盒说明书操作,采用酶标仪检测肾组织中IL-6水平。
                                                             规整。模型组大鼠肾组织可见肾小球系膜区基质增生,
          2.9 统计学方法
                                                             肾小管上皮细胞广泛变性伴局灶性坏死。醋酸泼尼松
              采用 SPSS 26.0 软件进行数据的统计分析,采用
                                                             组大鼠仅见局限性肾小管扩张。肾必宁颗粒低剂量组
          GraphPad Prism软件绘图。满足正态分布的计量资料以
                                                             大鼠肾小管腔内可见嗜酸性物质沉积,伴有间质淋巴细
          x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析;方差齐时
                                                             胞浸润。肾必宁颗粒高剂量组大鼠肾小管上皮细胞肿
          组间两两比较采用LSD检验,方差不齐时组间两两比较
                                                             胀及空泡变性程度较模型组显著减轻。结果见图1。
          采用Dunnett’s T3检验。检验水准α=0.05。
                                                             3.4 肾必宁颗粒对IgAN大鼠肾小球系膜区IgA沉积的
          3 结果
                                                             影响
          3.1 肾必宁颗粒对IgAN大鼠尿液指标的影响
                                                                 与空白组大鼠肾小球系膜区 IgA 光密度值[0.93±
              与空白组比较,模型组大鼠 24 h-UTP、尿红细胞计
                                                             0.20,n=3(下同)]比较,模型组大鼠肾小球系膜区 IgA
          数均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大
                                                             光密度值(1.93±0.07)显著升高(P<0.05);与模型组比
          鼠尿液中上述指标均显著降低(P<0.05)。结果见表2。
                                                             较,醋酸泼尼松组和肾必宁颗粒低、高剂量组大鼠肾小
          表2 各组大鼠尿液中24 h-UTP和红细胞计数比较(x±s)
                                                             球系膜区 IgA 光密度值(分别为 1.20±0.07、1.25±0.26、
          组别                n      24 h-UTP/mg  尿红细胞计数/(个/μL)
          空白组                 9     6.20±1.11   7.26±0.95    1.17±0.05)均显著降低(P<0.05)。结果见图2。
          模型组               10     17.46±2.29 a  18.07±2.11 a  3.5  肾 必 宁 颗 粒 对 IgAN 大 鼠 肾 组 织 中 CXCL12、
          醋酸泼尼松组            12     10.88±1.44 b  11.04±1.39 b  CXCR4、STAT3 mRNA表达的影响
          肾必宁颗粒低剂量组         12     11.31±1.76 b  11.18±1.12 b
          肾必宁颗粒高剂量组         12     10.74±2.08 b  10.89±1.45 b    与空白组比较,模型组大鼠肾组织中 CXCL12、
             a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。                CXCR4、STAT3 mRNA 的相对表达量均显著升高(P<








                 A.空白组              B.模型组             C.醋酸泼尼松组          D.肾必宁颗粒低剂量组         E.肾必宁颗粒高剂量组
             红色箭头:肾小球系膜区基质增生;绿色箭头:肾小管上皮细胞变性、坏死或空泡变性;深蓝色箭头:肾小管扩张;黄色箭头:嗜酸性物质沉积;
          浅蓝色箭头:间质淋巴细胞浸润。
                                    图1 各组大鼠肾组织病理学变化观察结果(HE染色)


          中国药房  2025年第36卷第23期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 23    · 2915 ·
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