Page 37 - 《中国药房》2025年23期
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表1 引物序列及产物扩增长度 3.2 肾必宁颗粒对IgAN大鼠血清生化指标的影响
引物名称 引物序列 扩增长度/bp 与空白组比较,模型组大鼠血清中 BUN、Scr、ALT
CXCL12 5′-AGTGACGGTAAGCCAGTCAGC-3′ 115 水平均显著升高(P<0.05),Alb 水平显著降低(P<
3′-GGGCACAGTTTGGAGTGTTGAG-5′
CXCR4 5′-AGACTATGACTCCAACAAGGAACCC-3′ 81 0.05)。与模型组比较,各给药组大鼠血清中 BUN、Scr、
3′-AAATAGATGGTGGGCAGGAAGAT-5′ ALT 水平均显著降低(P<0.05),Alb 水平均显著升高
STAT3 5′-CAGTTCTCGTCCACCACCAA-3′ 215 (P<0.05);并且,肾必宁颗粒高剂量组大鼠血清中BUN
3′-TCATTCCAAAGGGCCAAGAT-5′
GAPDH 5′-CTGGAGAAACCTGCCAAGTATG-3′ 138 水平显著低于肾必宁颗粒低剂量组(P<0.05),Scr 水平
3′-GGTGGAAGAATGGGAGTTGCT-5′
显著低于醋酸泼尼松组和肾必宁颗粒低剂量组(P<
加 入 CXCL12、CXCR4、STAT3、p-STAT3、β -actin 一 抗 0.05)。结果见表3。
(稀释比例均为1∶1 000),在4 ℃下孵育过夜;加入相应 表3 各组大鼠血清中 BUN、Scr、Alb、ALT 水平比较
二抗(稀释比例为 1∶3 000),在室温下孵育 30 min。以 (x±s)
ECL 发光液显影,利用化学发光成像系统成像,应用 组别 n BUN/(mmol/L) Scr/(μmol/L) ALT/(U/L) Alb/(g/L)
Image J 软件分析条带灰度值。以目标蛋白与内参 空白组 9 5.01±0.31 53.87±5.01 33.10±2.59 33.19±2.13
模型组 10 7.90±0.41 a 79.22±3.47 a 54.16±4.14 a 22.16±1.07 a
(β-actin)蛋白条带灰度值的比值表示目标蛋白的相对表
醋酸泼尼松组 12 6.03±0.62 b 64.86±4.47 b 43.46±2.43 b 26.40±1.41 b
达水平,以p-STAT3与STAT3蛋白条带灰度值的比值表 肾必宁颗粒低剂量组 12 6.34±0.51 b 65.71±2.77 b 43.14±4.25 b 26.39±2.25 b
示STAT3蛋白的磷酸化水平。 肾必宁颗粒高剂量组 12 5.93±0.34 bc 61.67±3.55 bcd 44.23±2.98 b 26.53±1.45 b
2.8 肾组织中IL-6水平检测 a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05;c:与肾必宁
颗粒低剂量组比较,P<0.05;d:与醋酸泼尼松组比较,P<0.05。
采用ELISA法检测。取“2.2”项下-80 ℃保存的大
3.3 肾必宁颗粒对IgAN大鼠肾组织病理形态学的影响
鼠肾组织,解冻后制备组织匀浆,离心收集上清液,按照
空白组大鼠肾小球结构完整,肾小管上皮细胞排列
试剂盒说明书操作,采用酶标仪检测肾组织中IL-6水平。
规整。模型组大鼠肾组织可见肾小球系膜区基质增生,
2.9 统计学方法
肾小管上皮细胞广泛变性伴局灶性坏死。醋酸泼尼松
采用 SPSS 26.0 软件进行数据的统计分析,采用
组大鼠仅见局限性肾小管扩张。肾必宁颗粒低剂量组
GraphPad Prism软件绘图。满足正态分布的计量资料以
大鼠肾小管腔内可见嗜酸性物质沉积,伴有间质淋巴细
x±s 表示,多组间比较采用单因素方差分析;方差齐时
胞浸润。肾必宁颗粒高剂量组大鼠肾小管上皮细胞肿
组间两两比较采用LSD检验,方差不齐时组间两两比较
胀及空泡变性程度较模型组显著减轻。结果见图1。
采用Dunnett’s T3检验。检验水准α=0.05。
3.4 肾必宁颗粒对IgAN大鼠肾小球系膜区IgA沉积的
3 结果
影响
3.1 肾必宁颗粒对IgAN大鼠尿液指标的影响
与空白组大鼠肾小球系膜区 IgA 光密度值[0.93±
与空白组比较,模型组大鼠 24 h-UTP、尿红细胞计
0.20,n=3(下同)]比较,模型组大鼠肾小球系膜区 IgA
数均显著升高(P<0.05)。与模型组比较,各给药组大
光密度值(1.93±0.07)显著升高(P<0.05);与模型组比
鼠尿液中上述指标均显著降低(P<0.05)。结果见表2。
较,醋酸泼尼松组和肾必宁颗粒低、高剂量组大鼠肾小
表2 各组大鼠尿液中24 h-UTP和红细胞计数比较(x±s)
球系膜区 IgA 光密度值(分别为 1.20±0.07、1.25±0.26、
组别 n 24 h-UTP/mg 尿红细胞计数/(个/μL)
空白组 9 6.20±1.11 7.26±0.95 1.17±0.05)均显著降低(P<0.05)。结果见图2。
模型组 10 17.46±2.29 a 18.07±2.11 a 3.5 肾 必 宁 颗 粒 对 IgAN 大 鼠 肾 组 织 中 CXCL12、
醋酸泼尼松组 12 10.88±1.44 b 11.04±1.39 b CXCR4、STAT3 mRNA表达的影响
肾必宁颗粒低剂量组 12 11.31±1.76 b 11.18±1.12 b
肾必宁颗粒高剂量组 12 10.74±2.08 b 10.89±1.45 b 与空白组比较,模型组大鼠肾组织中 CXCL12、
a:与空白组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 CXCR4、STAT3 mRNA 的相对表达量均显著升高(P<
A.空白组 B.模型组 C.醋酸泼尼松组 D.肾必宁颗粒低剂量组 E.肾必宁颗粒高剂量组
红色箭头:肾小球系膜区基质增生;绿色箭头:肾小管上皮细胞变性、坏死或空泡变性;深蓝色箭头:肾小管扩张;黄色箭头:嗜酸性物质沉积;
浅蓝色箭头:间质淋巴细胞浸润。
图1 各组大鼠肾组织病理学变化观察结果(HE染色)
中国药房 2025年第36卷第23期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 23 · 2915 ·

