Page 41 - 《中国药房》2025年23期
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decoction can inhibit autophagy in ovarian granular cells by activating the PI3K/AKT/mTOR pathway， regulate the secretion of sex
          hormones，  alleviate  pathological  damage  in  ovarian  tissues，  and  promote  normal  follicular  development，  thereby  exerting  an
          ameliorative effect on PCOS rats.
          KEYWORDS    Huatan tongmai decoction； polycystic ovary syndrome； PI3K/AKT/mTOR pathway； autophagy； granular cells



              多囊卵巢综合征（polycystic ovary syndrome，PCOS）        由广西中医药大学第一附属医院一次性购入，经该院药
          以卵泡微环境失衡为核心特征，主要表现为窦前-窦卵                           学部主任中药师田元春鉴定均为真品；盐酸二甲双胍片
          泡过度阻滞、无周期性排卵等，可引发生殖-代谢双重障                         （批号1207097，规格0.5 g/片）购自中美上海施贵宝制药
            [1]
          碍 。临床队列研究显示，PCOS合并胰岛素抵抗者发生                         有限公司；来曲唑片（批号 H19991001，规格 2.5 mg/片）
          子宫内膜癌的风险较普通女性提高了 2.7～4.3 倍；在无                      购自江苏恒瑞医药股份有限公司；羧甲基纤维素钠（批
          排卵性不孕人群中，PCOS患病率已达50%～70%，且仍                       号F20070608）购自国药集团化学试剂有限公司；促卵泡
                    [2]
          呈上升态势 。在病因学层面，PCOS 被归为“多因素疑                        素（follicle stimulating hormone，FSH）、睾酮（testosterone，
          难病”，且现有证据指出其发病原因可能与颗粒细胞                            T）、雌二醇（estrogen，E2 ）、促黄体素（luteinizing hormone，
                                                [3]
         （granular cells，GCs）凋亡-自噬稳态破坏有关 。磷脂酰                LH）酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent
          肌醇3-激酶（phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K）/蛋白激     assay，ELISA）试剂盒（批号分别为 JL13251、JL12462、
          酶 B（protein kinase B，AKT）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白              JL11525、JL11706）均购自上海江莱生物科技有限公司；
         （mammalian target of rapamycin，mTOR）通路作为 GCs        苏木素（批号710051）购自珠海贝索生物技术有限公司；
          自噬的上游枢纽，兼具调控炎症和细胞增殖、存活的多                           伊红（批号 880920）购自北京化学工业集团有限责任公
          效功能；该通路被过度激活后可通过抑制 mTOR 表达、                        司；兔荧光二抗（批号ZLI-9556）购自北京中杉金桥生物
          加剧自噬应激，参与 PCOS 卵泡发育异常的分子病理                         技术有限公司；Monzol 升级款 RNA 提取试剂（批号
          过程 。                                               140713）购自莫纳（苏州）生物科技有限公司；兔抗微管
              [4]
              化痰通脉饮是广西中医药大学第一附属医院林寒                          相关蛋白 1 轻链 3（microtubule-associated protein 1 light
          梅教授汲取首届国医大师、广西中医药大学教授班秀文                           chain 3，LC3）抗体、兔抗PI3K抗体、兔抗磷酸化PI3K（p-
          先生的大量医案及学术经验后提炼而来。该方以“治经                           PI3K）抗体、兔抗 AKT 抗体、兔抗 p62 抗体（批号分别为
          先治血，理血不忘瘀”为理，药取丹参、半夏、鸡血藤、苍                         ab192890、ab191606、ab138364、ab8805、ab109012）均购
          术、白术、茯苓、陈皮、当归、川芎、香附、桃仁、瓦楞子、泽                       自英国 Abcam 公司；兔抗磷酸化 AKT（p-AKT）抗体、兔
          兰，共奏健脾化痰、活血化瘀之功。本课题组前期临床                           抗mTOR抗体、兔抗磷酸化mTOR（p-mTOR）抗体、兔抗
          研究表明，该方联合二甲双胍使用可有效调节 PCOS 患                        苄氯素 1（Beclin-1）抗体（批号分别为 4060S、2983S、
          者在月经周期、性激素水平等方面的诸多问题，显示出                           5536S、3738S）均购自美国 CST 公司；兔抗甘油醛-3-磷
                              [5]
          一定的中医药治疗优势 。此外，本课题组前期基础研                           酸脱氢酶（GAPDH）抗体（批号10494-1-AP）购自武汉三
          究发现，该方可通过回调 PCOS 异常病理进程中的过度                        鹰生物技术有限公司；山羊抗兔免疫球蛋白 G 二抗、
                                      [6]
          炎症反应来减轻血管内皮损伤 。基于此，本研究以                            DAPI 染色液（批号分别为 BA1054、AR1177）均购自武
          PCOS 模型大鼠为研究对象，探讨该方是否可作用于                          汉博士德生物工程有限公司。
          PI3K/AKT/mTOR 通路进而调控自噬，阐明化痰通脉饮                     1.3 动物
          治疗 PCOS 的作用机制，为丰富中药复方对 PCOS 的治                         本研究所用动物为 40 只 SPF 级雌性 SD 大鼠，鼠龄
          疗依据提供参考。                                           为6周，体重为200～220 g，由湖南斯莱克景达实验动物
          1 材料                                               有限公司提供，实验动物生产许可证号为 SCXK（湘）
          1.1 主要仪器                                           2019-0004。大鼠购入后分笼饲养，饲养环境温度为
              本研究所用的主要仪器有：BX43 型光学显微镜、                       20～25 ℃，每日 8：00 至 22：00 光照，相对湿度为 35%～
          BX51 型荧光显微镜（日本 Olympus 公司），TL-650Y 型               45%。本研究中全部实验均得到广西中医药大学实验
          超声波细胞破碎仪（江苏天翎仪器有限公司），DS-11 型                       动 物 福 利 伦 理 委 员 会 的 批 准（ 批 准 编 号 为
          核酸蛋白定量仪（美国DeNovix公司），CFX Connect 型                 DW20240603-175）。
                                                     TM
          荧光定量 PCR 仪（美国 Bio-Rad 公司），RM2135 型切片               2 方法
          机（德国 Leica 公司），Multiskan MK3 型酶标仪（美国               2.1 化痰通脉饮的制备
          Thermo Fisher Scientific 公司），H-7650 型透射电子显微            取化痰通脉饮的组方饮片（半夏15 g、陈皮6 g、白术
          镜（日本Hitachi公司）。                                    15 g、茯苓20 g、当归10 g、鸡血藤20 g、桃仁10 g、丹参15 g、
          1.2 主要药品与试剂                                        泽兰15 g、川芎10 g、瓦楞子10 g、香附15 g、苍术15 g），
              化痰通脉饮组方饮片（半夏、陈皮、白术、茯苓、当                        加入 6 倍量蒸馏水浸泡 2 h，采用文火分别煎煮 2 次，合
          归、鸡血藤、桃仁、丹参、泽兰、川芎、瓦楞子、香附、苍术）                       并2次滤液并浓缩至含生药量为4.8 g/mL的药液，即得。


          中国药房  2025年第36卷第23期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 23    · 2919 ·
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