Page 27 - 《中国药房》2025年19期

technology and Western blot. RESULTS The results of network pharmacology showed that there were 296 intersection targets
between ZSD and perimenopausal insomnia. Protein kinase B1 （Akt1） was a key target for treating insomnia with ZSD. After
administration of ZSD， the sleep latency of mice was shortened， the sleep duration was prolonged significantly， and the mean
optical density value of neuron-specific nuclear protein in the hippocampal CA1 region was significantly increased （P＜0.01）.
Additionally， hippocampal neuron damage in OVX mice was significantly alleviated. The results of transcriptome sequencing
showed that ZSD significantly upregulated the transcriptional levels of Nfe2l2 gene in hippocampal tissue of OVX mice （P＜0.05）.
After administration of ZSD， protein expressions of nuclear factor E2 related factor 2 （Nrf2） and heme oxygenase-1 （HO-1） in
hippocampal tissue of OVX mice， as well as the phosphorylated Akt level， were increased significantly （P＜0.01）.
CONCLUSIONS ZSD can ameliorate hippocampal oxidative stress injury of hippocampal neurons in perimenopausal insomnia
mice by activating the Akt/Nrf2/HO-1 signaling pathway.
KEYWORDS Zhichi suanzaoren decoction； perimenopausal insomnia； hippocampal neurons； genomics； oxidative stress

我国围绝经期女性的失眠发病率不断攀升，并伴随 型石蜡包埋机（德国 Leica 公司），HM-340E 型石蜡切片
焦虑、抑郁和情绪波动等情绪调节不良问题，对个人工 机、Gemini AS 型染色机（美国 Thermo Fisher Scientific
[1]
作、生活和社会均产生了严重的负面影响 。目前对于 公司），VS200型数字切片扫描仪（日本Olympus公司），
围绝经期失眠采取的措施主要为激素补充或替代治疗 AXIO SCOPE.A1 型正置荧光显微镜（德国 Zeiss 公司），
以及镇静催眠类药物治疗，但以上治疗方式存在较多禁 12-0625型电泳仪（美国Bio-Rad公司），GD50202型化学
[2]
忌证或药物依赖等风险 。研究表明，睡眠作为一种保 发光成像仪[莫纳（苏州）生物科技有限公司]。
护机制可抵御氧化应激带来的损伤，长期失眠会导致体 1.2 主要药品与试剂
内氧化应激水平升高，进而损害海马体的细胞结构和功 酸枣仁、知母、川芎、茯苓、焦栀子、淡豆豉、生地黄
[3]
能 。因此，通过调节氧化应激来探索更为有效的围绝 和炙甘草饮片（批号均为 221201）均购自浙江中医药大
经期失眠及其相关损伤的治疗方法，具有重要的临床意 学中药材饮片有限公司，并由浙江中医药大学药学院中
义和社会价值。 草药栽培与鉴定教研室沈晓霞教授鉴定均为真品；右佐
栀豉酸枣仁汤（Zhichi suanzaoren decoction，ZSD） 匹克隆片（批号H20100074，规格为3 mg）购自成都康弘
是浙江省名中医张永华教授基于中医经典理论并结合 药业集团股份有限公司；兔抗神经元特异性核蛋白
多年临床经验总结而成的经验方，由酸枣仁、知母、川 （neuron-specific nuclear protein，NeuN）抗体、兔抗核因
芎、茯苓、焦栀子、淡豆豉、生地黄和炙甘草 8 味中药组 子E2相关因子2（nuclear factor E2 related factor 2，Nrf2）
成，具有清火养阴、除烦安神的功效，尤其是对围绝经期 抗体和兔抗血红素加氧酶 1（heme oxygenase-1，HO-1）
[4]
失眠、焦虑性失眠的治疗具有独特优势 。本团队前期 抗 体（批 号 分 别 为 26975-1-AP、16396-1-AP、10701-1-
研究表明，ZSD可对失眠患者的睡眠和焦虑情绪进行双 AP）均购自武汉三鹰生物技术有限公司；兔抗蛋白激酶
重调节，降低觉醒水平，改善睡眠深度与持续时间，且停 B（protein kinase B，Akt）、Alexa Fluor 488 标记的山羊抗
药后无明显的失眠反跳和戒断症状 [5―6] ；其机制可能与 兔免疫球蛋白 G 多克隆抗体（批号分别为 ET1609-51、
[7]
调节 5-羟色胺转运体 、下丘脑-垂体-肾上腺轴有关，但 HA1121）均购自杭州华安生物技术有限公司；兔抗磷酸
具体机制仍需进一步研究。网络药理学通过构建“化合 化Akt（p-Akt）抗体（批号4060）购自美国CST公司；兔抗
物-蛋白/基因-疾病”网络，可以提供一种高效的方法来 β-肌动蛋白（β-actin）抗体（批号GB15003-100）购自武汉
识别化学成分并探究药理作用。该方法已被广泛应用 塞维尔生物科技有限公司；辣根过氧化物酶（HRP）标记
于中药作用机制研究、证候生物学基础研究以及新药开 的山羊抗兔免疫球蛋白G二抗（批号S0001）购自江苏亲
[8]
发，体现了综合药理学策略的应用价值 。基于此，本研 科生物研究中心有限公司。
究以网络药理学为基础，结合基因组学与动物实验，进 1.3 动物
一步探析 ZSD 缓解围绝经期失眠导致氧化应激损伤的 本研究所用动物为SPF级雌性C57BL/6小鼠，共60
作用机制，为ZSD治疗围绝经期失眠提供药理学依据。 只，6～8 周龄，体重（20±2） g，购自上海斯莱克实验动
1 材料 物有限责任公司，生产许可证号为 SCXK（沪）2022-
1.1 主要仪器 0004。小鼠饲养于浙江中医药大学实验动物中心，环境
本研究所用的主要仪器有Allegra X-30型台式高速 温度为 20～23 ℃、相对湿度为 40%～60%、12 h 明暗交
冷凝型离心机（美国 Beckman Coulter 公司），Arcadia H 替。所有小鼠随机分笼（每笼5只）饲养，饲养期间可自

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