Page 58 - 《中国药房》2025年14期

造模成功。与模型组比较，5% 含药血清组细胞存活率 平显著升高（P＜0.05），中药含药血清组上清液中 ET-1
[ （72.99±2.85）%]未能显著提升（P＞0.05），10%、15%、 水平显著降低、NO水平显著升高（P＜0.01或P＜0.05）。
20% 含药血清组细胞存活率[（81.76±4.53）%、（84.06± 与自噬激动剂组比较，中药联合自噬激动剂组上清液中
2.63）%、（85.16±1.65）%]均显著升高（P＜0.01），且 3 组 ET-1水平显著降低（P＜0.05）。结果见表1。
间比较差异无统计学意义（P＞0.05），故选择 10% 含药 3.5 含药血清对RAECs线粒体活性氧的影响
血清进行后续研究。 正常组、模型组、空白血清组、中药含药血清组、自
3.2 含药血清对RAECs形态学的影响 噬阻断剂组、自噬激动剂组、中药联合自噬激动剂组
细胞成像分析结果显示，正常组 RAECs 生长状态 RAECs 线粒体活性氧水平分别为 20.17±2.88、54.30±
良好，呈典型的铺路石样结构。与正常组比较，模型组、 2.85、51.56±4.88、45.62±3.37、33.38±4.89、64.14±3.76、
空白血清组RAECs均显著受损，细胞数量减少，胞体裂 57.25±4.96。 与 正 常 组 比 较 ，模 型 组 、空 白 血 清 组
解，铺路石样结构减少或消失。与模型组比较，自噬阻 RAECs线粒体活性氧水平均显著升高（P＜0.01）。与模
断剂组 RAECs 显著缓解，而自噬激动剂组 RAECs 损伤 型组比较，自噬阻断剂组和中药含药血清组RAECs线粒
进一步加重；中药含药血清组RAECs数量显著增加，同 体活性氧水平均显著降低（P＜0.01），自噬激动剂组
时细胞恢复铺路石样结构。与自噬激动剂组比较，中药 RAECs 线粒体活性氧水平显著升高（P＜0.01）。结果
联合自噬激动剂组能一定程度逆转自噬激动剂所致的 见图2。
RAECs形态结构受损。结果见图1。 3.6 含药血清对RAECs线粒体膜电位的影响
3.3 含药血清对RAECs存活率的影响 正常组、模型组、空白血清组、中药含药血清组、自
与正常组比较，模型组、空白血清组 RAECs 存活率 噬阻断剂组、自噬激动剂组、中药联合自噬激动剂组
显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，自噬阻断剂组 RAECs 线粒体红绿荧光强度比值分别为 4.07±0.84、
RAECs 存 活 率 显 著 升 高（P＜0.01），自 噬 激 动 剂 组 0.29±0.03、0.28±0.05、1.27±0.14、2.11±0.12、0.18±
RAECs存活率显著降低（P＜0.05）。与自噬激动剂组比 0.03、0.51±0.10。与正常组比较，模型组、空白血清组
较，中药联合自噬激动剂组 RAECs 存活率显著升高 RAECs 线粒体红绿荧光强度比值均显著降低（P＜
（P＜0.01）。结果见表1。 0.01）。与模型组比较，自噬阻断剂组和中药含药血清组
表1 各组 RAECs 存活率和上清液中 ET-1、NO 水平比 RAECs 线粒体红绿荧光强度比值均显著升高（P＜
较（x±s，n＝4） 0.01）。结果见图3。
3.7 含药血清对PINK1/Parkin信号通路相关蛋白表达
组别 细胞存活率/% ET-1/（pg/mL） NO/（pg/mL）
正常组 100.00±9.57 23.79±1.73 77.98±6.28 的影响
模型组 64.34±2.82 ａ 57.53±2.84 a 50.66±5.43 a 与正常组比较，模型组、空白血清组 RAECs 中
空白血清组 66.49±5.31 ａ 59.79±0.97 a 50.08±7.50 a PINK1、Parkin、LC3蛋白相对表达量均显著升高，p62蛋
中药含药血清组 72.23±5.38 51.20±2.22 ｂ 62.00±4.13 ｃ
自噬阻断剂组 78.26±4.11 ｃ 37.87±3.04 ｃ 70.48±3.31 ｃ 白相对表达量显著降低（P＜0.01）。与模型组比较，自
自噬激动剂组 52.70±6.82 ｃ 63.31±2.40 ｂ 44.90±8.82 噬激动剂组RAECs中Parkin、LC3蛋白相对表达量均显
中药联合自噬激动剂组 65.94±2.18 ｄ 56.27±8.40 e 53.43±8.57
著升高（P＜0.01），自噬阻断剂组 RAECs 中 PINK1、Par‐
a：与正常组比较，P＜0.01；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与模型组
kin、LC3蛋白相对表达量均显著降低，p62蛋白相对表达
比较，P＜0.01；d：与自噬激动剂组比较，P＜0.01；e：与自噬激动剂组比
较，P＜0.05。 显著升高（P＜0.01）；中药含药血清组RAECs中PINK1、
3.4 含药血清对上清液中ET-1及NO水平的影响 Parkin、LC3 蛋白相对表达量均显著降低，p62 蛋白相对
与正常组比较，模型组、空白血清组上清液中 ET-1 表达量显著升高（P＜0.01）。与自噬激动剂组比较，中
水平显著升高、NO水平显著降低（P＜0.01）。与模型组 药联合自噬激动剂组RAECs中PINK1、Parkin、LC3蛋白
比较，自噬阻断剂组上清液中ET-1水平显著降低、NO水 相对表达量均显著降低，p62 蛋白相对表达量显著升高
平显著升高（P＜0.01），自噬激动剂组上清液中 ET-1 水 （P＜0.01）。结果见图4、表2。

Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ
Ⅰ：正常组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：空白血清组；Ⅳ：中药含药血清组；Ⅴ：自噬阻断剂组；Ⅵ：自噬激动剂组；Ⅶ：中药联合自噬激动剂组；黑色箭头：正
常RAECs；红色箭头：损伤的RAECs。
图1 各组RAECs形态学显微图（游标尺：100 μm）

· 1740 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 14 中国药房 2025年第36卷第14期