Page 62 - 《中国药房》2025年14期
P. 62

建立完善的质量标准体系，通过多维度综合评价确保中                            2 方法与结果
          药制剂质量。                                              2.1 色谱条件
              中药指纹图谱在中药整体质量控制中应用广泛，是                          2.1.1 HPLC-UV条件
                                            [1]
          全面评价中药及其制剂质量的有效方法 。网络药理学                                以 Shim-pack GIST C18 （4.6 mm×250 mm，5 µm）为
          能多维度阐释中药“化合物-靶点-通路”的相互作用关                           色谱柱；以乙腈（A）-0.1%磷酸溶液（B）为流动相进行梯
                                            [2]
          系，预测其有效化学成分及其作用机制 。本研究采用                            度洗脱（0～30 min，12%A→15%A；30～35 min，15%A→
          高效液相色谱-紫外-蒸发光散射联用技术（high perfor‐                    17%A；35～95 min，17%A→25%A；95～105 min，25%A→
          mance liquid chromatography with ultraviolet and evapo‐  29%A；105～120 min，29%A→32%A；120～130 min，
                                                              32%A→40%A；130～135 min，40%A→45%A；135～140
          rative light scattering detection，HPLC-UV-ELSD）建立银
                                                              min，45%A→50%A；140～160 min，50%A→12%A）；流
          丹活血通瘀颗粒的指纹图谱，对其共有峰进行指认；采
                                                              速为1.0 mL/min；柱温为35 ℃；检测波长为245 nm（0～
          用网络药理学探索银丹活血通瘀颗粒抗IS的药效成分，
                                                              100 min）和203 nm（100～160 min）；进样量为10 µL。
          并在此基础上建立药效成分的定量分析方法，旨在为银
                                                              2.1.2 HPLC-ELSD条件
          丹活血通瘀颗粒的质量评价提供参考。
                                                                  以 Agilent 5 TC-C18 （4.6 mm×250 mm，5 µm）为色
          1 材料
                                                              谱柱；以甲醇（A）-水（B）为流动相进行梯度洗脱（0～10
          1.1 主要仪器
                                                              min，25%A→33%A；10～20 min，33%A→42%A；20～40
              Agilent  1260 型 HPLC 仪 购 自 美 国 Agilent 公 司 ；
                                                              min，42%A→50%A；40～50  min，50%A；50～58  min，
          Eppendorf 5810R型低温高速离心机购自德国Eppendorf                50%A→60%A；58～77 min，60%A→80%A；77～85 min，
          公 司 ；AUW120D 型 十 万 分 之 一 电 子 天 平 购 自 日 本            80%A）；流速为1.0 mL/min；柱温为30 ℃；ELSD检测器
          Shimadzu 公司；Milli-Q 型超纯水仪购自美国 Millipore             漂移管温度为 70 ℃；雾化器为氮气；体积流量为 1.5
          公司；KQ5200E 型超声仪购自昆山市超声仪器有限                          L/min；进样量为20 µL。
          公司。                                                 2.2 溶液的制备
          1.2 主要药品与试剂                                         2.2.1 供试品溶液
              芒 柄 花 素 、紫 草 酸 对 照 品（批 号 分 别 为 MUST-               （1）HPLC-UV供试品溶液：精密称取银丹活血通瘀
          19033005、MUST-21102314，纯度均不低于97.71%）均购              颗粒细粉（过五号筛）1.0 g，置于具塞锥形瓶中，精密加
          自成都曼思特生物科技有限公司；咖啡酸、芦丁、芒柄花                           入 50% 甲醇 5 mL，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40
          苷、迷迭香酸、丹酚酸B、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、人参皂苷                          kHz）处理45 min，放至室温，用50%甲醇补足减失质量，
          Rb1、人参皂苷Rd、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C、                       以12 000 r/min离心10 min（离心半径为18.7 cm，下同），
          三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、黄芪甲苷对照                        取上清液，经0.45 µm微孔滤膜过滤，取滤液，即得。
          品（批号分别为DST191030-013、DST200902-017、DSTDC-              （2）HPLC-ELSD供试品溶液：精密称取银丹活血通
          004401、DST191027-027、DSTDD00903、DST200619-          瘀颗粒细粉（过五号筛）1.5 g，置于圆底烧瓶中，精密加
          013、DST191212-006、DST190702-015、DST210601-095、      入含 4% 浓氨试液的 80% 甲醇（取浓氨试液 4 mL，加
                                                              80%甲醇至100 mL，摇匀即得）50 mL，密塞，称定质量，
          DSTDY009601、DSTDY009701、DSTDS005001、DST200722-
                                                              加热回流1 h，放至室温，再次称定质量，用含4%浓氨试
          009、DSTDR001401、DSTDH001501，纯 度 均 不 低 于
                                                              液的80%甲醇溶液补足减失质量；滤过，滤液蒸干，残渣
          98.00%）均购自成都德思特生物技术有限公司；水为自
                                                              用80%甲醇复溶，转移至5 mL容量瓶中，并用80%甲醇
          制超纯水。
                                                              定容，摇匀，以 12 000 r/min 离心 10 min，取上清液，经
              丹参、黄芪和三七饮片均由漯河市中心医院中药房
                                                              0.45 µm微孔滤膜过滤，取滤液，即得。
          提供，银杏叶提取物购自中国食品药品检定研究院，经
                                                              2.2.2 混合对照品溶液
          漯河市中心医院主任中药师于晓涛鉴定，分别为唇形科
                                                                  取咖啡酸、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芦丁、迷迭香酸、
          植物丹参 Salvia miltiorrhiza Bge. 的干燥根、豆科植物荚
                                                              芒柄花苷、紫草酸、丹酚酸 B、芒柄花素、人参皂苷 Rb1、
          膜黄芪Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.的干燥根、         人参皂苷Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成上述各
          五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F. H. Chen的          成 分 质 量 浓 度 分 别 为 21.5、20.0、1.8、20.0、8.4、18.2、
          干燥根和银杏科植物银杏 Ginkgo biloba L. 的干燥叶经                  210.0、13.6、21.0、18.5 µg/mL 的混合对照品溶液 1；取银
          加工制成的提取物。15批银丹活血通瘀颗粒（批号分别                           杏内酯C、银杏内酯A、银杏内酯B、三七皂苷R1、人参皂
          为 20240722、20240729、20240805、20240812、20240819、     苷Re、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、黄芪甲苷、人参皂苷
          20240826、20240902、20240909、20240918、20240923、       Rd对照品适量，精密称定，加甲醇制成上述各成分质量
          20240930、20241009、20241014、20241021、20241028，编      浓度分别为 161.5、153.8、196.1、369.2、82.0、68.4、94.2、
          号S1～S15）均由漯河市中心医院制剂室自制。                             138.4、140.0 µg/mL的混合对照品溶液2。


          · 1744 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 14                            中国药房  2025年第36卷第14期
   57   58   59   60   61   62   63   64   65   66   67