Page 59 - 《中国药房》2025年13期

blood and spleen， and the protein and mRNA expression levels of LCK， Fyn， ZAP70， CD45， and RORγt in ankle joint synovium
were all significantly increased/elevated （P＜0.05）. The level of Treg cells in the spleen， as well as the protein and mRNA
expression levels of Foxp3 in the ankle joint synovium were significantly decreased （P＜0.05）. Compared with model group， most
of the above-mentioned indicators were significantly reversed in the positive control group and all dose groups of HSH （P＜0.05）.
The degree of pathological changes in ankle joint tissues was markedly improved， and inflammation was alleviated.
CONCLUSIONS HSH can regulate the cascade reactions in the CD4/LCK/ZAP70/IL-17 pathway within the T-cell receptor
signaling pathway， thereby modulating the Th17/Treg balance. This leads to the suppression of inflammatory responses and the
alleviation of synovial tissue damage in rats with RA.
KEYWORDS Artemisia ordosica； effective substance groups； rheumatoid arthritis； CD4/LCK/ZAP70/IL-17 signaling pathway；
Th17/Treg balance； inflammatory responses

类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以 1.2 主要药品与试剂
滑膜炎为病理基础的炎症性和自身免疫性疾病。我国 完全弗氏佐剂和鼠源IL-17A、叉头框蛋白3（forkhead
关节炎患者有1亿以上，且人数在不断增加，尤其是在内 box protein 3，Foxp3）抗体（批号分别为 1003234204、
蒙古严寒地区 [1―2] 。RA归属于蒙医“协日乌素”病，据蒙 2422187、2565424）购自美国 Thermo Fisher Scientific 公
医燥“协日乌素”功效理论，药物治疗RA时，辨证选择具 司；固定/破膜试剂盒和鼠源γ-干扰素（interferon-γ，IFN-

有燥“协日乌素”功效的蒙药，以调三根、扶胃火，促进精 γ）、CD25、CD3 抗体（批号分别为 00833356、70411023、
[3]
华与糟粕的分解 。 A30651、AF13982）均购自美国 BD 公司；流式细胞微球
黑沙蒿是具有燥“协日乌素”功效的蒙药材之一，对 阵列法灵活检测试剂组包括 IFN-γ、IL-2、IL-1β、IL-6、
关节肿胀和疼痛有明显的干预效果，尤其对“协日乌素” IL-17A、IL-21 单 因 子 微 球 检 测 组 件（货 号 分 别 为
[4]
病的有效率可达到90%以上 。本课题组前期对黑沙蒿 558342、558346、560232、560231、560282、564343）均购
活性成分进行分析后发现，黑沙蒿有效物质群（简称 自美国 BD 公司；鼠源 CD4、CD8a 抗体（批号分别为
HSH）主要含有苯丙素类、黄酮类及酚酸类化合物 [5―6] ， 2386305、AF14045）均购自武汉伊莱瑞特生物科技股份
可明显改善RA大鼠的一般情况，减轻关节肿胀程度，但 有限公司；兔源 LCK、原癌基因酪氨酸蛋白激酶 Fyn
具体作用机制尚不明确。本课题组前期采用网络药理 （proto-oncogene tyrosine-protein kinase Fyn，简 写 为
学的方法预测了HSH改善RA的作用机制，结果发现其 Fyn）、ZAP70、CD45、视黄酸受体相关孤儿受体 γt 亚型
可能通过调节 T 细胞受体信号通路中分化簇 4（cluster （RAR-related orphan receptor γt，RORγt）单克隆抗体以

of differentiation 4，CD4）/淋巴细胞特异性酪氨酸激酶 及山羊抗兔免疫球蛋白 G（immunoglobulin G，IgG）、辣
（lymphocyte cell-specific protein-tyrosine kinase，LCK）/ 根 过 氧 化 物 酶 标 记 的 山 羊 抗 鼠 IgG（货 号 分 别 为
70 kDa链相关蛋白激酶（zeta-chain-associated protein ki‐ ab227975、ab184276、ab32410、ab317446、ab207082、
nase of 70 kDa，ZAP70）/白细胞介素 17（interleukin-17， 111035003、115035003）均购于美国 Jackson 公司；鼠源
[7]
IL-17）信号通路发挥作用 。基于此，本研究拟基于上 GAPDH单克隆抗体（货号REK0005）购于天津锐尔康生
述信号通路探究HSH改善RA的作用机制，以期为HSH 物科技有限公司；雷公藤多苷片（批号 Z42021212，规格
治疗RA提供实验依据。 10 mg）购于远大医药黄石飞云制药有限公司；所有基因
1 材料 的引物由深圳华大基因科技有限公司合成。
1.1 主要仪器 1.3 动物
DNM-9602型酶标分析仪购自北京普朗新技术有限 本研究所用动物为 SPF 级雄性 SD 大鼠，体重为

公司，CaliburⅡ型流式细胞仪购自碧迪医疗器械（上海） 180～220 g，购自辽宁长生生物技术股份有限公司，动物
有限公司，NANODROP 2000型分光光度计、ABI7500型 生产许可证号为 SCXK（辽）2020-0001。大鼠饲养在内
荧光定量聚合酶链式反应（PCR）仪均购自美国 Thermo 蒙古民族大学蒙医药学院动物实验中心，自由进食进
Fisher Scientific公司，SQS-120P型数字扫描成像系统购 水；环境温度为 24～26 ℃，湿度为（55±5）%，光照和黑
自深圳生强生物科技有限公司，YLS-7C 型足趾容积测 暗 12 h 交替。本实验经内蒙古民族大学附属医院医学
量仪购自北京智鼠多宝生物科技有限责任公司。 伦理委员会批准，批件号为NM-LL-2024-03-12-08。

中国药房 2025年第36卷第13期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 13 · 1605 ·