Page 55 - 《中国药房》2025年13期

2.4 色谱与质谱条件 表1 待测成分和内标的MRM离子对及主要质谱参数
2.4.1 色谱条件 分析物/内标 母离子m/z 子离子m/z 去簇电压/V 碰撞电压/V 出口电压/V
CLP 322.1 211.9 61 61 16
本 研 究 所 用 色 谱 柱 为 Shisedo CAPCELL ADME
CLP-C 308.1 197.9 61 61 14
（2.1 mm×100 mm，5 μm）；流动相 A 相为水（含 0.1% 甲 CAMD 504.1 154.9 96 96 12
酸），B 相为乙腈（含 0.1% 甲酸），采用梯度洗脱（0～0.5 CLP-G 322.1 154.8 65 65 11
LTD 383.1 336.9 106 106 10
min，40%B→75%B；0.5～2.0 min，75%B；2.0～2.1 min，
2.5 方法学考察
75%B→40%B；2.1～5.5 min，40%B）；流速为0.4 mL/min；
2.5.1 专属性考察
柱温为20 ℃；进样器温度为4 ℃；进样量为2 μL。
按“2.3”项下方法分别处理大鼠空白血浆、空白血
2.4.2 质谱条件
浆+定量下限工作溶液（CLP、CLP-C、CAMD 质量浓度
采用电喷雾离子源，在正离子模式下进行多反应监
分别为 0.08、205.00、0.04 ng/mL）、大鼠给药后（给药后
测（multiple reaction monitoring，MRM）；气帘气体压力
40 min）血浆样品，其中在处理空白血浆时不加内标溶
为 20 psi；源内温度为 550 ℃，源内气体 GS1 压力为 液。取上述各样品，按“2.4”项下色谱与质谱条件进样分
40 psi，源内气体 GS2 压力为 40 psi；离子喷射电压为 析，记录MRM图。结果显示，各待测成分的峰形和分离
5 000 V；碰撞气为 Medium。用于定量分析的离子对 效果均较好，空白血浆的内源性物质不干扰 CLP、CLP-
（由于 CLP-G 没有市售对照品，故笔者根据文献报道 [5] C、CLP-G 和 CAMD 的测定，表明该分析方法专属性良
设定了 CLP-G 的离子对信息）和相应质谱参数如表 1 好。结果见图1（由于CLP-G无市售对照品，因此图1中
所示。 缺少CLP-G的相关图谱；内标图谱略）。
CLP CLP
70
2 000 700
60
600
50 1 500 500
强度/cps 40 强度/cps 1 000 强度/cps 400
30
300
20 200
500
10 100
0 0 0
1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
t/min t/min t/min
CLP-C CLP-C
200 2.5×10 6 2.0×10 4
2.0×10 6
150 1.5×10 4
强度/cps 100 强度/cps 1.5×10 6 6 强度/cps 1.0×10 4
1.0×10
50 5.0×10 3
5.0×10 5
0 0 0
1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
t/min t/min t/min
CLP-G
100
8 000
80
6 000
强度/cps 60 强度/cps 4 000
40
2 000
20
0 0
1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
t/min t/min
CAMD 600
120
2.5×10 4
100 500 CAMD
2.0×10 4
80 400
强度/cps 60 强度/cps 1.5×10 4 强度/cps 300
40 1.0×10 4 200
20 5.0×10 3 100
0 0 0
1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0 1.0 2.0 3.0 4.0 5.0
t/min t/min t/min
A.空白血浆 B.大鼠给药后血浆样品 C.空白血浆+定量下限工作溶液
图1 CLP及其代谢物和内标的LC-MS/MS图谱

中国药房 2025年第36卷第13期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 13 · 1601 ·