Page 21 - 《中国药房》2025年12期
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临床表现,并频繁住院 。尽管目前我国HF的治疗取得 光定量聚合酶链式反应(PCR)仪(西安天隆科技有限公
了诸多进展,但其患病率仍呈持续升高的趋势,该病已 司)等。
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成为影响我国城乡居民健康的重要因素之一 。研究指 1.2 主要药品和试剂
出,病理性心脏肥大是导致 HF、心功能障碍、猝死的关 TSG原料药(批号20190401,纯度≥64%)由上海辉
键危险因素,而改善病理性心脏肥大可能是减缓 HF 发 昱生物医药科技有限公司提供;AngⅡ(纯度≥98%)、Ⅱ
展的有效途径 。当病理性心脏肥大发生时,心肌细胞 型胶原酶(批号分别为 A9290、C8150)均购自北京索莱
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的能量代谢明显改变,糖酵解活动异常增强,参与糖酵 宝科技有限公司;PFK-015对照品(纯度≥99%)、CCK-8
解途径的缺氧诱导因子 1α(hypoxia-inducible factor 1α, 试剂(批号分别为 GC16993、GK10001)均购自美国 Glp‐
HIF-1α)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、6-磷 Bio公司;胎牛血清(批号FSP500)购自苏州依科赛生物
酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2- 科技股份有限公司;DMEM 培养基(批号 C11995500-
kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)等蛋白/酶 BT)购自美国 Gibco 公司;游离脂肪酸(free fatty acid,
的表达明显上调,而抑制糖酵解可有效缓解心肌细胞的 FFA)比色法测试盒(批号E-BC-K792-M)购自武汉伊莱
肥大性改变 [4―5] 。 瑞特生物股份有限公司;0.1%Triton X-100 免疫染色通
人参是我国传统的补气要药,具有大补元气、补脾 透液(批号 BL934A)购自北京兰杰柯科技有限公司;兔
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益肺等功效,在 HF 治疗领域具有重要作用 。研究发 抗心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)多克隆抗体
现,人参皂苷 Rg3可抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ, 和藻红蛋白标记的山羊抗兔、驴抗鼠免疫球蛋白G二抗
AngⅡ)诱导的小鼠病理性心脏肥大,减小左心室质量, (批号分别为 15513-1-AP、SA00008-2、SA00008-9)均购
提高左室射血分数和缩短分数,且上述作用可能是通过 自武汉三鹰生物技术有限公司;鼠抗 α-肌动蛋白(α-ac‐
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调节能量代谢而实现的 ;人参皂苷Rh2可通过抑制糖酵 tin)单克隆抗体、兔抗 HIF-1α 多克隆抗体、兔抗葡萄糖
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解途径来促进肿瘤细胞的凋亡 。上述研究表明,人参 转运蛋白 4(glucose transporter protein 4,GLUT-4)多克
改善心脏肥大、调节细胞糖酵解的作用与其主要活性成 隆抗体、兔抗 LDHA 多克隆抗体、鼠抗丙酮酸脱氢酶激
分人参皂苷关系密切。人参总次苷(total secondary 酶 1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)单克隆抗
ginsenosides,TSG)是借助相关专利技术将人参皂苷水 体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔、山羊抗鼠免疫球
解而得到的总皂苷,包括具有重要药效作用的人参皂 蛋白 G 二抗(批号分别为 YM3612、YT2133、YT5523、
苷、稀有人参皂苷等成分,其中人参皂苷(含稀有人参皂 YN3033、YM0513、RS0001、RS0002)均购自美国Immuno-
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苷)的含量不低于64% 。本课题组前期研究结果显示, Way 公司;辅酶 A(coenzyme A,CoA)检测试剂盒(批号
TSG可提高缺氧条件下人H9c2细胞中三磷酸腺苷(ade- MAK034)购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司;
nosine triphosphate,ATP)的含量,改善其能量代谢,抑制 乙酰辅酶A(acetyl coenzyme A,acetyl-CoA)含量测定试
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其凋亡 。结合上述文献和前期研究,本课题组推测 剂盒(批号 ACA-2B-Y)购自苏州科铭生物技术有限公
TSG 可能与心肌细胞的肥大性改变和能量代谢密切相 司 ;鼠 抗 α - 微 管 蛋 白(α -tubulin)单 克 隆 抗 体(批 号
关。基于此,本研究以新生 SD 大鼠原代心肌细胞为对 GTX628802)购自美国GeneTex 公司;兔抗 PFKFB3 单克
象,使用 AngⅡ诱导构建肥大性改变心肌细胞模型,以 隆抗体(批号 ab181861)购自艾博抗(上海)贸易有限公
糖酵解调节因子 PFKFB3 的抑制剂 PFK-015 为参照,初 司 ;TRIzol 试 剂(批 号 15596026)购 自 美 国 Thermo
步探讨TSG对心肌细胞肥大性改变的影响及潜在机制, Fisher Scientific公司;反转录试剂盒、实时荧光定量PCR
以期为TSG用于临床治疗HF提供实验依据。 检测试剂盒(批号分别为 FSQ-101、QPK-201)均购自东
1 材料 洋纺(上海)生物科技有限公司;PURO-Flour蛋白合成分
1.1 主要仪器 析试剂盒(批号 601100)购自美国 Cayman Chemical 公
TM
本研究所用主要仪器包括HBS-1096A型酶标仪(南 司;所用 PCR 引物由本课题组利用 PrimerDesigner 工
京德铁生物科技有限公司),CIB-191TX型CO2细胞培养 具设计,由苏州金唯智生物科技有限公司合成。
箱(苏州捷美电子有限公司),FACSCelesta 型流式细胞 1.3 实验动物
仪[碧迪医疗器械(上海)有限公司],ECLIPSE C1型正置 本研究涉及的实验动物为 SPF 级新生 SD 大鼠(出
荧光显微镜(日本Nikon公司),164-5050型电泳仪电源、 生1~3 d),雌雄不限,体重5~6 g,购自北京维通利华实
Mini-PROTEAN 型垂直电泳槽、Mini Trans-Blot 型电泳 验动物技术有限公司,动物生产许可证号为SCXK(京)
转印仪(美国Bio-Rad公司),QuickChemi 5200型化学发 2021-0011。本研究方案经河南中医药大学实验动物伦
光成像系统(武汉莫纳生物科技有限公司),TL-988型荧 理委员会审查批准(批准编号DWLL202203023)。
中国药房 2025年第36卷第12期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 12 · 1431 ·

