Page 21 - 《中国药房》2025年12期
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          临床表现,并频繁住院 。尽管目前我国HF的治疗取得                          光定量聚合酶链式反应(PCR)仪(西安天隆科技有限公
          了诸多进展,但其患病率仍呈持续升高的趋势,该病已                           司)等。
                                                [2]
          成为影响我国城乡居民健康的重要因素之一 。研究指                           1.2 主要药品和试剂
          出,病理性心脏肥大是导致 HF、心功能障碍、猝死的关                             TSG原料药(批号20190401,纯度≥64%)由上海辉
          键危险因素,而改善病理性心脏肥大可能是减缓 HF 发                         昱生物医药科技有限公司提供;AngⅡ(纯度≥98%)、Ⅱ
          展的有效途径 。当病理性心脏肥大发生时,心肌细胞                           型胶原酶(批号分别为 A9290、C8150)均购自北京索莱
                      [3]
          的能量代谢明显改变,糖酵解活动异常增强,参与糖酵                           宝科技有限公司;PFK-015对照品(纯度≥99%)、CCK-8
          解途径的缺氧诱导因子 1α(hypoxia-inducible factor 1α,         试剂(批号分别为 GC16993、GK10001)均购自美国 Glp‐
          HIF-1α)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、6-磷       Bio公司;胎牛血清(批号FSP500)购自苏州依科赛生物
          酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶3(6-phosphofructo-2-           科技股份有限公司;DMEM 培养基(批号 C11995500-
          kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFB3)等蛋白/酶   BT)购自美国 Gibco 公司;游离脂肪酸(free fatty acid,
          的表达明显上调,而抑制糖酵解可有效缓解心肌细胞的                           FFA)比色法测试盒(批号E-BC-K792-M)购自武汉伊莱
          肥大性改变     [4―5] 。                                  瑞特生物股份有限公司;0.1%Triton X-100 免疫染色通
              人参是我国传统的补气要药,具有大补元气、补脾                         透液(批号 BL934A)购自北京兰杰柯科技有限公司;兔
                                                [6]
          益肺等功效,在 HF 治疗领域具有重要作用 。研究发                         抗心肌肌钙蛋白T(cardiac troponin T,cTnT)多克隆抗体
          现,人参皂苷 Rg3可抑制血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ,                 和藻红蛋白标记的山羊抗兔、驴抗鼠免疫球蛋白G二抗
          AngⅡ)诱导的小鼠病理性心脏肥大,减小左心室质量,                        (批号分别为 15513-1-AP、SA00008-2、SA00008-9)均购
          提高左室射血分数和缩短分数,且上述作用可能是通过                           自武汉三鹰生物技术有限公司;鼠抗 α-肌动蛋白(α-ac‐
                              [7]
          调节能量代谢而实现的 ;人参皂苷Rh2可通过抑制糖酵                         tin)单克隆抗体、兔抗 HIF-1α 多克隆抗体、兔抗葡萄糖
                                    [8]
          解途径来促进肿瘤细胞的凋亡 。上述研究表明,人参                           转运蛋白 4(glucose transporter protein 4,GLUT-4)多克
          改善心脏肥大、调节细胞糖酵解的作用与其主要活性成                           隆抗体、兔抗 LDHA 多克隆抗体、鼠抗丙酮酸脱氢酶激
          分人参皂苷关系密切。人参总次苷(total secondary                    酶 1(pyruvate dehydrogenase kinase 1,PDK1)单克隆抗
          ginsenosides,TSG)是借助相关专利技术将人参皂苷水                   体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔、山羊抗鼠免疫球
          解而得到的总皂苷,包括具有重要药效作用的人参皂                            蛋白 G 二抗(批号分别为 YM3612、YT2133、YT5523、
          苷、稀有人参皂苷等成分,其中人参皂苷(含稀有人参皂                          YN3033、YM0513、RS0001、RS0002)均购自美国Immuno-
                             [9]
          苷)的含量不低于64% 。本课题组前期研究结果显示,                         Way 公司;辅酶 A(coenzyme A,CoA)检测试剂盒(批号
          TSG可提高缺氧条件下人H9c2细胞中三磷酸腺苷(ade-                      MAK034)购自西格玛奥德里奇(上海)贸易有限公司;
          nosine triphosphate,ATP)的含量,改善其能量代谢,抑制             乙酰辅酶A(acetyl coenzyme A,acetyl-CoA)含量测定试
                [10]
          其凋亡 。结合上述文献和前期研究,本课题组推测                            剂盒(批号 ACA-2B-Y)购自苏州科铭生物技术有限公
          TSG 可能与心肌细胞的肥大性改变和能量代谢密切相                          司 ;鼠 抗 α - 微 管 蛋 白(α -tubulin)单 克 隆 抗 体(批 号
          关。基于此,本研究以新生 SD 大鼠原代心肌细胞为对                         GTX628802)购自美国GeneTex 公司;兔抗 PFKFB3 单克
          象,使用 AngⅡ诱导构建肥大性改变心肌细胞模型,以                         隆抗体(批号 ab181861)购自艾博抗(上海)贸易有限公
          糖酵解调节因子 PFKFB3 的抑制剂 PFK-015 为参照,初                  司 ;TRIzol 试 剂(批 号 15596026)购 自 美 国 Thermo
          步探讨TSG对心肌细胞肥大性改变的影响及潜在机制,                          Fisher Scientific公司;反转录试剂盒、实时荧光定量PCR
          以期为TSG用于临床治疗HF提供实验依据。                              检测试剂盒(批号分别为 FSQ-101、QPK-201)均购自东
          1 材料                                               洋纺(上海)生物科技有限公司;PURO-Flour蛋白合成分
          1.1 主要仪器                                           析试剂盒(批号 601100)购自美国 Cayman Chemical 公
                                                                                                         TM
              本研究所用主要仪器包括HBS-1096A型酶标仪(南                     司;所用 PCR 引物由本课题组利用 PrimerDesigner 工
          京德铁生物科技有限公司),CIB-191TX型CO2细胞培养                     具设计,由苏州金唯智生物科技有限公司合成。
          箱(苏州捷美电子有限公司),FACSCelesta 型流式细胞                    1.3 实验动物
          仪[碧迪医疗器械(上海)有限公司],ECLIPSE C1型正置                        本研究涉及的实验动物为 SPF 级新生 SD 大鼠(出
          荧光显微镜(日本Nikon公司),164-5050型电泳仪电源、                   生1~3 d),雌雄不限,体重5~6 g,购自北京维通利华实
          Mini-PROTEAN 型垂直电泳槽、Mini Trans-Blot 型电泳            验动物技术有限公司,动物生产许可证号为SCXK(京)
          转印仪(美国Bio-Rad公司),QuickChemi 5200型化学发               2021-0011。本研究方案经河南中医药大学实验动物伦
          光成像系统(武汉莫纳生物科技有限公司),TL-988型荧                       理委员会审查批准(批准编号DWLL202203023)。


          中国药房  2025年第36卷第12期                                              China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 12    · 1431 ·
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