Page 49 - 《中国药房》2025年9期
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32%A→62%A；50～58 min，62%A→95%A；58～60 min，           干，残渣加甲醇溶解并转移至2 mL容量瓶中，加甲醇至
          95%A）；柱温为 25 ℃；流速为 1 mL/min；进样量为 10                刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

          µL；采用蒸发光散射检测器进行检测，漂移管温度为                           2.3.2 黄芪甲苷含量测定用供试品溶液的制备
          110 ℃，气体流速为2.6 L/min。                                  取样品粉末（过四号筛）1 g，精密称定，置具塞锥形
          2.1.2 黄芪甲苷含量测定的色谱条件                                瓶中，精密加入80%甲醇（含4%浓氨试液，下同）50 mL，
              采用Kromasil C18 （4.6 mm×250 mm，5 µm）色谱柱，        密塞，称定质量；加热回流 1 h，放冷，再次称定质量，用
          以32%乙腈溶液为流动相进行等度洗脱；柱温为30 ℃；                        80%甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过；精密量取续滤液

          流速为 1 mL/min；进样量为 20 µL；采用蒸发光散射检                   25 mL，40 ℃水浴蒸干，残渣用 80% 甲醇溶解并转移至
          测器进行检测，漂移管温度为 105 ℃，气体流速为 2.7                      5 mL容量瓶中，加80%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤
          L/min。                                             液，即得。
          2.1.3 毛蕊异黄酮苷与黄芪皂苷Ⅰ含量测定的色谱                          2.3.3 毛蕊异黄酮苷与黄芪皂苷Ⅰ含量测定用供试品
          条件                                                 溶液的制备
              采 用 Agela  Venusil  XBP  C18 （4.6  mm×250  mm，5    取样品粉末（过四号筛）1 g，精密称定，置圆底烧瓶
          µm）色谱柱，以乙腈（A）-0.2% 甲酸溶液（B）为流动相进                    中，精密加入甲醇50 mL，称定质量；加热回流4 h，放冷，

          行 梯 度 洗 脱（0～10  min，20%A→30%A；10～20  min，          再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过；精
          30%A→70%A；20～25  min，70%A→85%A）；柱 温 为              密量取续滤液25 mL，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并
          30 ℃；流速为1 mL/min；采用蒸发光散射检测器进行检                     转移至5 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续
          测，漂移管温度为110 ℃，气体流速为2.6 L/min。                      滤液，即得。
          2.2 对照品溶液的制备                                       2.4 指纹图谱方法学考察

              精密称取毛蕊异黄酮苷对照品适量，加甲醇制成每                         2.4.1 精密度试验
          1 mL含622.0 μg毛蕊异黄酮苷的对照品母液，再用甲醇                         取黄芪粉末（样品编号2401），按照“2.3.1”项下方法
          将母液逐级稀释成质量浓度分别为 311.0、155.5、77.8、                  制备供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件连续进样6次。
          38.9、19.4 μg/mL 的系列毛蕊异黄酮苷对照品溶液。另                   以黄芪皂苷Ⅰ的色谱峰为参照峰，计算各共有峰的相对
          取上述对照品母液用甲醇稀释成质量浓度为103.7 μg/mL                     保留时间和相对峰面积的RSD均小于1.92%（n＝6），表
          的毛蕊异黄酮苷单一对照品溶液。                                    明仪器的精密度良好。
              精密称取黄芪皂苷Ⅰ对照品适量，加甲醇制成每 1                        2.4.2 稳定性试验

          mL 含 616.0 μg 黄芪皂苷Ⅰ的对照品母液，再用甲醇将                        取黄芪粉末（样品编号2401），按照“2.3.1”项下方法
          母液逐级稀释成质量浓度分别为 492.8、369.6、246.4、                  制备供试品溶液，分别于室温下放置 0、2、4、8、12、24 h
          123.2、30.8 μg/mL的系列黄芪皂苷Ⅰ对照品溶液。另取                   时按“2.1.1”项下色谱条件进样分析。以黄芪皂苷Ⅰ的
          上述对照品母液用甲醇稀释成质量浓度为184.8 μg/mL                      色谱峰为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对
          的黄芪皂苷Ⅰ单一对照品溶液。                                     峰面积的RSD均小于2.37%（n＝6），表明供试品溶液在

              精密称取黄芪甲苷对照品适量，加80%甲醇制成每                        室温下放置24 h内稳定性良好。
          1 mL含600.0 μg黄芪甲苷的对照品母液，再用80%甲醇                    2.4.3 重复性试验
          将母液逐级稀释成质量浓度分别为 400.0、300.0、150.0、                     取黄芪粉末6份（样品编号2401），按照“2.3.1”项下
          60.0、30.0 μg/mL的系列黄芪甲苷对照品溶液。                       方法制备供试品溶液，按“2.1.1”项下色谱条件进样分
          2.3 供试品溶液的制备                                       析。以黄芪皂苷Ⅰ的色谱峰为参照峰，计算各共有峰的
          2.3.1 指纹图谱用供试品溶液的制备                                相对保留时间和相对峰面积的 RSD 均小于 2.93%（n＝
              称取样品粉末（过四号筛）2 g，置具塞锥形瓶中，加                      6），表明该方法的重复性良好。

          甲醇 20 mL，密塞，称定质量，超声（功率 250 W，频率 40                 2.5 3种成分含量测定的方法学考察
          kHz）处理30 min；放冷，再次称定质量，用甲醇补足减失                         参照 2020 年版《中国药典》（四部）“9101 分析方法
                                                                                         [12]
          的质量，摇匀，滤过；精密量取滤液 10 mL，40 ℃水浴蒸                     验证指导原则”进行方法学考察 。结果显示，各待测

          中国药房  2025年第36卷第9期                                                China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 9    · 1067 ·
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