Page 39 - 《中国药房》2025年9期

表3 钩苞大丁草药材样品中11种成分的含量测定结果（mg/g，n＝2）
3-羟基-4-甲氧基- 木犀草素-7-O- 芹菜素-7-O-β-
编号 新绿原酸 绿原酸 隐绿原酸 3，8-Dhmcc 咖啡酸 异绿原酸A 异绿原酸C 花椒毒素
5-羧基-香豆精 β-D-葡萄糖苷 D-葡萄糖苷
S1 0.171 0.852 0.175 0.358 0.052 0.380 1.086 0.793 0.174 0.487 1.378
S2 0.172 1.053 0.180 0.102 0.040 0.136 0.662 1.153 0.125 0.689 1.783
S3 0.214 1.668 0.220 0.385 0.056 0.374 0.704 1.460 0.114 0.664 1.242
S4 0.159 0.924 0.154 0.212 0.035 0.229 0.490 1.119 0.083 0.585 2.147
S5 0.260 1.667 0.205 0.537 0.044 0.491 0.573 1.849 0.105 0.675 2.126
S6 0.491 4.915 0.436 0.343 0.057 0.696 0.737 3.834 0.129 1.557 3.485
S7 0.419 3.279 0.393 0.500 0.077 0.620 1.440 2.785 0.160 1.102 1.489
S8 0.405 1.913 0.432 0.401 0.063 0.473 0.855 2.697 0.170 1.666 4.897
S9 1.121 6.363 0.844 0.330 0.057 0.536 0.916 3.637 0.218 1.612 3.492
S10 1.460 9.471 1.213 0.691 0.062 0.902 1.143 4.061 0.205 1.881 3.539
S11 0.807 4.157 0.698 0.571 0.092 0.620 0.932 3.228 0.170 1.691 5.383
S12 2.109 15.910 1.738 0.446 0.132 0.810 1.611 4.918 0.247 2.170 3.304
S13 1.886 13.010 1.715 0.731 0.128 1.297 1.579 4.272 0.142 1.916 3.997
均值 0.744 5.014 0.646 0.431 0.069 0.582 0.979 2.754 0.157 1.284 2.943
3 讨论 可能是钩苞大丁草在体内发挥作用的药效物质，故本研
3.1 色谱条件的优化及供试品溶液制备方法的选择 究选择这些成分作为含量测定的指标。由OPLS-DA结
本研究通过对供试品溶液进行全波长扫描，选择了 果还可知，异绿原酸B也可能是导致13批钩苞大丁草药
330 nm作为最佳检测波长。此外，本研究对不同流动相 材之间质量差异的主要标志物，但本课题组在前期研究
（甲醇-水、乙腈-0.1%磷酸溶液、乙腈-0.2%磷酸溶液、甲 中尝试过多种方法，都无法使异绿原酸B达到含量测定
醇-0.1%磷酸溶液）进行了考察，发现在含量测定过程中 的分离度和回收率要求，所以在本研究中没有选择异绿
以乙腈-0.1% 磷酸溶液为流动相时，各色谱峰的峰形较 原酸B作为含量检测指标。
为尖锐、对称，杂质干扰较少，且出峰时间稳定；在指纹 3.3 指纹图谱和化学模式识别结果分析
图谱分析过程中以乙腈-0.2% 磷酸溶液为流动相时，各 本研究通过 HPLC 法建立了 13 批钩苞大丁草药材
色谱峰的分离度均较好。 的指纹图谱，共确定了38个共有峰，指认了其中13个共
本研究以色谱峰数量、峰形、分离度及杂质多少为 有峰；相似度评价结果显示，13 批样品与对照指纹图谱
指标，分别对样品的不同提取方式、提取溶剂、提取时间 R 的相似度为 0.801～0.994，其中部分批次样品的相似
进行了考察，最终确定以 70% 甲醇超声提取 60 min 和 度低于 0.900，这可能是因为 13 批钩苞大丁草药材产地
50% 乙醇加热回流提取 30 min 分别作为建立指纹图谱 不同，受气候、地理位置及采收时间等自然因素及人为
和测定含量用供试品溶液的处理方法。 因素的共同影响，导致不同批次药材之间存在一定的质
3.2 含量测定指标成分的确定 量差异。通过 HCA、PCA 结果可知，S1～S5、S7 聚为一
本研究前期通过查阅文献发现，花椒毒素是一种呋 类，S6 聚为一类，S8 聚为一类，S9、S11 聚为一类，S10、
喃香豆素类天然产物，具有抗菌、抗肿瘤和抗炎作用 。 S12～S13 聚为一类。该结果提示：2021 年采收于不同
[14]
酚酸类化合物如绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸和咖啡酸 产地的药材质量差异较小，除 S6 以外的药材样品相似
等，均具有抗氧化、抗病毒和抗菌等药理活性 [15―17] 。黄 性较高；2023 年采收于不同产地的药材质量不完全一
酮类化合物芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷具有抗菌和抗炎 致，这可能是因为产地的气候（降雨量和光照等）不同所
的作用；而木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷除了对心肌细胞 导致的，例如样品S8的产地云南省永仁县，与其他产地
[23]
具有保护作用以外，还具有抗氧化损伤的能力，其可经 相比，其日照时间较长，年均日照时间居云南省第一 。
β-葡萄糖苷酶水解成木犀草素，从而抑制环氧合酶 2 蛋 经OPLS-DA可知，峰7（绿原酸）、峰21（异绿原酸A）、峰
白在小鼠单核巨噬细胞白血病细胞中的表达 [18―21] 。异 26（花椒毒素）、峰19（异绿原酸B）、峰33、峰13、峰23（异
绿原酸 A 和异绿原酸 C 可通过清除自由基的方式起到 绿原酸C）、峰2（新绿原酸）、峰17（木犀草素-7-O-β-D-葡
[22]
抗氧化的作用 。上述成分的药理活性与钩苞大丁草 萄糖苷）9个共有峰所代表的化学成分可能是导致13批
的药效作用相关。此外，由 OPLS-DA 结果可知，绿原 不同产地和不同年份钩苞大丁草药材之间质量差异的
酸、异绿原酸A、花椒毒素、异绿原酸C、新绿原酸和木犀 主要标志物，并且其中花椒毒素、绿原酸、异绿原酸 A、
草素-7-O-β-D-葡萄糖苷可能是导致13批钩苞大丁草之 木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸 C、新绿原酸的
间存在质量差异的主要标志物，再结合本课题组前期研 含量较高。因此，可考虑将这6个含量较高且有较好药
究结果——3，8-Dhmcc、3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精 理活性的成分作为钩苞大丁草药材的质量标志物。

中国药房 2025年第36卷第9期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 9 · 1057 ·