Page 38 - 《中国药房》2025年9期

60 0.12%（n＝6），表明该方法精密度良好。
50
8
40 2.3.7 重复性试验
2 7
30
mAU 20 10 11 取钩苞大丁草药材粉末（S1）1 g，共 6 份，分别按
1 9
10 3 4 5 6 “2.3.3”项下方法制备供试品溶液A、B，按“2.3.1”项下色
0
－10 谱条件进样测定，记录峰面积，按外标法计算样品含量。
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64
t/min 结果显示，新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3，8-Dhmcc、咖
A.供试品溶液A
啡酸、3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精、木犀草素-7-O-
60
50
8 β-D-葡萄糖苷、异绿原酸A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、
40
2 7
30
mAU 20 10 11 异绿原酸C、花椒毒素11个成分平均含量的RSD分别为
1
10 3 4 5 6 9 1.17%、1.47%、1.00%、1.58%、1.12%、1.57%、1.83%、
0
－10 1.35%、1.39%、1.23%、1.45%（n＝6），表明该方法重复性
0 4 8 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 56 60 64
t/min 良好。
B.混合对照品溶液
2.3.8 稳定性试验
1：新绿原酸；2：绿原酸；3：隐绿原酸；4：3，8-Dhmcc；5：咖啡酸；6：
取钩苞大丁草药材粉末（S1）1 g，按“2.3.3”项下方
3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精；7：木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷；8：异
绿原酸A；9：芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷；10：异绿原酸C；11：花椒毒素。 法制备供试品溶液 A、B，分别于室温下放置 0、2、4、8、
图6 钩苞大丁草药材含量测定专属性考察的HPLC图 12、24 h 时按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面
2.3.5 线性关系考察 积。结果显示，新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3，8-
分别取“2.3.2”项下混合对照品溶液 2.0、1.2、0.6、 Dhmcc、咖啡酸、3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精、木犀
草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸 A、芹菜素-7-O-β-D-
0.4、0.2、0.1 mL 至 2 mL 容量瓶中，加 50% 乙醇定容，制
成系列混合对照品溶液。取上述系列混合对照品溶液 葡萄糖苷、异绿原酸 C、花椒毒素 11 个成分峰面积的
RSD分别为0.38%、0.33%、0.33%、0.47%、1.96%、1.97%、
各适量，按“2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积。
0.48%、0.29%、0.39%、0.20%、0.34%（n＝6），表明上述供
以各成分的质量浓度为横坐标（X）、峰面积为纵坐标（Y）
试品溶液A、B在室温下放置24 h内稳定性良好。
进行线性回归，结果见表2。由表2可知，11个成分在各
2.3.9 加样回收率试验
自进样质量浓度范围内的线性关系均良好（r 均大于
取已知含量的钩苞大丁草药材粉末（S1）0.5 g，精密
0.999）。
称定，共 6 份，分别置于 50 mL 具塞锥形瓶中，分别加入
表2 钩苞大丁草中11个成分的线性关系考察结果
新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、3，8-Dhmcc、咖啡酸、3-羟
成分 回归方程 r 线性范围/（μg/mL）
新绿原酸 Y＝0.267 3X+0.016 2 0.999 9 1.72～34.37 基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖
绿原酸 Y＝0.263 2X+0.050 1 0.999 9 8.64～172.77 苷、异绿原酸A、异绿原酸C、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、
隐绿原酸 Y＝0.205 9X+0.021 7 0.999 9 1.63～32.65 花椒毒素对照品0.085、0.439、0.085、0.188、0.028、0.176、
3，8-Dhmcc Y＝0.095 5X－0.010 1 0.999 9 3.86～77.20
咖啡酸 Y＝0.439 0X－0.001 9 0.999 9 0.53～10.56 0.551、0.410、0.090、0.236、0.700 mg，按“2.3.3”项下方法
3-羟基-4-甲氧基-5-羧基-香豆精 Y＝0.148 8X－0.081 0 0.999 9 3.90～78.10 制备供试品溶液A、B，分别按“2.3.1”项下色谱条件进样
木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Y＝0.246 5X+0.084 2 0.999 9 10.52～210.36 测定，记录峰面积，采用外标法计算样品含量并计算加
异绿原酸A Y＝0.438 5X+0.172 6 0.999 9 8.21～164.17
芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷 Y＝0.311 3X+0.015 6 0.999 9 1.67～33.35 样回收率。结果显示，上述11个成分的平均加样回收率
异绿原酸C Y＝0.404 5X+0.062 3 0.999 9 4.61～92.26 分 别 为 98.66%、100.78%、101.41%、97.96%、96.65%、
花椒毒素 Y＝0.109 8X+0.069 5 0.999 9 14.51～290.18
95.56%、92.54%、100.90%、105.55%、96.06%、100.97%，
2.3.6 精密度试验 RSD分别为0.89%、0.83%、1.93%、1.23%、1.73%、1.68%、
取钩苞大丁草药材粉末（S1）1 g，按“2.3.3”项下方 1.01%、1.10%、0.97%、1.63%、0.90%（n＝6），表明该方法
法制备供试品溶液A、B，分别按“2.3.1”项下色谱条件重 准确度良好。
复进样测定6次，记录峰面积。结果显示，新绿原酸、绿 2.3.10 样品含量测定
原酸、隐绿原酸、3，8-Dhmcc、咖啡酸、3-羟基-4-甲氧 取13批钩苞大丁草药材粉末各1 g，精密称定，分别
基-5-羧基-香豆精、木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原 按“2.3.3”项下方法制备供试品溶液 A、B，再分别按
酸 A、芹菜素-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸 C、花椒毒素 “2.3.1”项下色谱条件进样测定，记录峰面积，采用外标
11 个成分峰面积的 RSD 分别为 0.19%、0.07%、0.21%、 法计算样品中各成分含量。各样品平行测定2次，取平
0.17%、0.19%、0.39%、0.24%、0.05%、1.47%、0.33%、 均值。结果见表3。

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