Page 31 - 《中国药房》2025年9期
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2.9 小鼠海马组织中ZBP1 mRNA水平检测                           未发现细胞凋亡及坏死情况，无炎症细胞浸润。与 NC
              采用实时荧光定量 PCR 法检测。取各组小鼠冻存                       组比较，MOD组小鼠海马组织损伤较严重，CA1区锥体

          的海马组织适量，提取组织中总 mRNA，分析纯度与浓                         排列紊乱、染色不均；锥体细胞较少，大量神经元固缩、
          度后，将总 RNA 逆转录合成 cDNA 并进行 PCR 扩增。                   深染（黄色箭头所指），甚至凋亡、消失。与 MOD 组比
          PCR 反 应 体 系 包 括 ：cDNA 模 板 1  μL，SYBR  Green        较，WPTL-L组小鼠海马组织损伤有所减轻，CA1区锥体
                                                             细胞排列相对整齐，部分神经元固缩、深染；WPTL-H组
          Master Mix 5 μL，正、反向引物各0.4 μL，加无核酸酶水
                                                             和 DH 组小鼠海马组织损伤明显减轻，CA1 区锥体细胞
          至 20 μL。PCR 扩增条件如下：95 ℃预变性 30 s；95 ℃
                                                             排列整齐，仅少量神经元固缩、深染。结果见图1。
          变 性 10  s，60  ℃ 退 火/延 伸 30  s，共 40 个 循 环 。 以
          GAPDH 为内参，采用 2      －ΔΔCt 法计算 ZBP1 mRNA 的相对
          表达水平，结果以 NC 组为参照进行归一化处理。PCR
          引物序列及产物大小见表1。
                   表1 PCR引物序列及产物大小

          基因名称                              序列（5′→3′）  产物大小/bp
          GAPDH         正向：GGTTGTCTCCTGCGACTTCA    183
                        反向：TGGTCCAGGGTTTCTTACTCC                      A. NC组                  B. MOD组
          ZBP1          正向：AAGAGTCCCCTGCGATTATTTG  102
                        反向：TCTGGATGGCGTTTGAATTGG

          2.10 统计学方法
              采用SPSS 25.0软件对数据进行统计分析。符合正
          态分布的计量资料以x±s表示，多组间比较采用单因素
          方差分析，方差齐时组间两两比较采用LSD-t检验，方差

          不齐时组间两两比较采用Games-Howell检验；不符合正                             C. WPTL-L组              D. WPTL-H组
          态分布的计量资料以 M（P25，P75 ）表示，组间比较采用
          Kruskal-Wallis秩和检验。检验水准α＝0.05。
          3 结果
          3.1 小鼠学习及空间记忆能力考察结果
              与 NC 组比较，MOD 组小鼠第 3～5 天的逃避潜伏

          期均显著延长（P＜0.05），穿越平台次数显著减少（P＜                                            E. DH组
          0.05）；与 MOD 组比较，各药物组小鼠第 3～5 天的逃避                          图1 各组小鼠海马组织HE染色显微图
          潜伏期均显著缩短（P＜0.05），穿越平台次数均显著增                        3.3 小鼠血清中TNF-α、IL-4水平测定结果
          加（P＜0.05）。结果见表2。                                       与NC组比较，MOD组小鼠血清中TNF-α水平显著

         表2 各组小鼠逃避潜伏期及穿越平台次数比较（n＝                            升高（P＜0.05），IL-4水平显著降低（P＜0.05）。与MOD
               10）                                           组比较，各药物组小鼠血清中 TNF-α 水平均显著降低
                            逃避潜伏期（x±s）/s          穿越平台次数    （P＜0.05），IL-4 水 平 均 显 著 升 高（P＜0.05）。 结 果
          组别
                  第1天   第2天    第3天    第4天    第5天  [M（P 25，P 75）]/次  见表3。
          NC组   57.33±1.28  48.86±3.09  33.56±2.63  21.36±2.84  16.86±1.30  5（6，6）
          MOD组  58.30±2.21  53.03±4.64  52.63±2.28 a  49.03±2.05 a  47.26±1.19 a  1（1，2） a  表3 各组小鼠血清中TNF-α、IL-4水平比较（x±s，n＝
          WPTL-L组 58.56±2.06  53.73±2.31  42.93±1.76 b  36.93±1.51 b  34.93±1.95 b  2（3，3） b  10，pg/mL）
          WPTL-H组 56.56±2.17  53.10±1.66  39.70±2.09 b  30.30±1.00 b  26.66±1.02 b  4（4，4） b
          DH组   58.33±1.10  52.90±3.25  37.83±2.05 b  26.96±1.59 b  23.66±1.70 b  4（5，5） b  组别  TNF-α  IL-4
                                                              NC组                 32.16±0.71      61.92±1.35
             a：与NC组比较，P＜0.05；b：与MOD组比较，P＜0.05。
                                                              MOD组                69.09±0.87 a    36.53±1.99 a
          3.2 小鼠海马组织病理形态学观察结果                                 WPTL-L组             58.91±0.82 b    45.40±0.65 b
                                                              WPTL-H组             46.64±1.17 b    54.83±0.76 b
              NC组小鼠海马组织结构正常，CA1区锥体细胞（蓝                        DH组                 46.98±1.28 b    56.49±0.95 b
          色箭头所指）排列整齐，胞核饱满，核仁清晰，染色均匀；                            a：与NC组比较，P＜0.05；b：与MOD组比较，P＜0.05。


          中国药房  2025年第36卷第9期                                                China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 9    · 1049 ·
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