Page 29 - 《中国药房》2025年9期

hippocampal tissues. RESULTS Compared with normal control group， the escape latency of mice in model group was prolonged
significantly on day 3 to 5 （P＜0.05）， the times of crossing platform reduced significantly （P＜0.05）， and obvious pathological
changes were observed in the hippocampal tissue. The level of TNF- α， the expressions of APP， p-Tau and ZBP1， the
phosphorylation levels of RIPK1， RIPK3 and MLKL， the fluorescence intensity of p-RIPK3 as well as the mRNA expression of
ZBP1 were significantly increased （P＜0.05）， while the serum level of IL-4 was decreased significantly （P＜0.05）. Compared with
model group， above indexes were reversed significantly in administration groups （P＜0.05）， and pathological damage of
hippocampal tissue was alleviated. CONCLUSIONS WPTL can inhibit the ZBP1/MLKL signaling pathway， reduce neuronal
necroptosis in AD mice， and inhibit inflammatory responses， thereby improving learning and spatial memory abilities in AD mice.
KEYWORDS Wenpi tongluo kaiqiao formula； Alzheimer’s disease； ZBP1/MLKL signaling pathway； necroptosis

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是一种与 1 材料
衰老密切相关的神经退行性疾病，主要表现为进行性的 1.1 主要仪器

学习记忆能力减退和认知功能退化，是目前最常见的痴 本研究所用的主要仪器有：XR-XM101型 Morris 水
[1]
呆类型，占所有痴呆类型的60%～80% 。AD的发病机 迷宫（上海欣软信息科技有限公司），CFX96型实时荧光
制复杂，主要病理特征包括由淀粉样前体蛋白（amyloid 定量 PCR 仪（美国 Bio-Rad 公司），BX43 型光学显微镜、
UC90型成像系统（日本Olympus公司），DYY-4C型电泳
precursor protein，APP）代谢异常引发的 β-淀粉样蛋白
仪及凝胶成像系统（北京六一仪器厂）等。
（amyloid β-protein，Aβ）斑块沉积、Tau 蛋白过度磷酸化
1.2 主要药品与试剂
[2]
形成的神经纤维缠结、神经元丢失及神经炎症反应等 。
温脾通络开窍方由黄芪 30 g、益智仁 10 g、三七 10
当前，AD 的西医治疗主要以多奈哌齐等乙酰胆碱
g、石菖蒲 10 g、何首乌 10 g、绞股蓝 10 g 组成，上述饮片
酯酶抑制剂和美金刚等N-甲基-D-天冬氨酸受体拮抗剂
均购自广西中医药大学第一附属医院门诊中药房（批号
为主，这些药物可在一定程度上缓解AD症状，但无法阻
分 别 为 240501、240507、230801、240301、240903、
止或逆转疾病的进展，并且还可能引起不良反应 。中
[3]
240802）；盐酸多奈哌齐片（批号211035，规格5 mg）购自
药具有多靶点、多途径的作用特点，能够综合调节机体 卫材（中国）药业有限公司；苏木精、伊红染液均购自珠
的生理功能，减少不良反应的发生，逐渐成为AD新型治 海贝索生物技术有限公司；肿瘤坏死因子 α（tumor ne‐
疗药物的研发热点。 crosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素 4（interleukin-4，IL-

温脾通络开窍方为全国老中医药专家学术继承指 4）酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒（批号分别为MM-
导老师、广西名老中医吴子辉教授治疗痴呆的经验方。 0132M1、MM-0165M1）均购自江苏酶免实业有限公司；
本课题组前期研究已证实，该方可通过抑制神经炎症、 磷酸化 Tau（ser396）[p-Tau（ser396）]、ZBP1、RIPK1、磷酸
[4]
保护神经元发挥对AD的保护作用 。然而，其具体作用 化 RIPK1（ser166）[p-RIPK1（ser166）]、RIPK3 抗体（批号
机制尚不完全清楚。坏死性凋亡是由受体相互作用蛋 分别为 RM4630、BD-PN2476、BD-PN1850、BD-PP1467、
BD-PP1882）均购自苏州博奥龙科技有限公司；磷酸化
白激酶 1（receptor-interacting protein kinase 1，RIPK1）/
RIPK3（ser277）[p-RIPK3（ser277）]、磷 酸 化 MLKL
RIPK3/混合谱系激酶结构域样蛋白（mixed lineage kinase
（ser345）[p-MLKL（ser345）] 抗 体（ 货 号 分 别 为
domain-like protein，MLKL）信号通路介导的细胞程序性
HA721428、ET1705-51）均购自杭州华安生物技术有限
[5]
死亡形式，已被证明与AD的发生发展密切相关 。有研
公司；MLKL 抗体、羊抗兔 IgG（H+L）红色荧光二抗（批
究表明，Z-DNA 结合蛋白 1（Z-DNA binding protein 1，
号分别为21894、AS039）均购自武汉爱博泰克生物科技
ZBP1）可通过激活 RIPK1/RIPK3 信号通路，诱导 MLKL
有限公司；APP抗体、甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）抗
[6]
介导的坏死性凋亡 ；且有研究表明，ZBP1在AD大鼠海
体、辣根过氧化物酶（HRP）标记的山羊抗兔 IgG 二抗、
[7]
马神经元的氧化应激和炎症进程中发挥了重要作用 。 HRP标记的山羊抗鼠IgG二抗（批号分别为25524-1-ap、
鉴于此，本研究拟探讨温脾通络开窍方是否可通过抑制 60004-1-Ig、SA00001-2、SA00001-1）均购自武汉三鹰生
ZBP1/MLKL 信号通路来抑制 AD 小鼠神经元坏死性凋 物技术有限公司；实时荧光定量PCR试剂盒、RNA提取
亡，以期为该方治疗AD提供更充实的理论基础。 试剂、逆转录试剂盒（批号分别为 Q712、R701-01、R123-

中国药房 2025年第36卷第9期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 9 · 1047 ·