Page 47 - 《中国药房》2025年5期
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prostaglandin B2 and 20-hydroxy-leukotriene B4, and then ruducing metabolic pathways such as arachidonic acid metabolism, 5-
hydroxytryptamine synapse, and primary bile acid biosynthesis.
KEYWORDS saikosaponin C; acute liver injury; metabolomics; differential metabolite; arachidonic acid metabolism; 5-hydroxy-
tryptamine synapse; primary bile acid biosynthesis
肝脏作为人体最大的解毒器官,其健康与否与机体 6)、IL-1β 酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(杭州联科
健康密切相关。数据统计发现,中国各类肝脏疾病患者 生 物 科 技 有 限 公 司 ,批 号 分 别 为 EK282、EK206、
达4亿多人,该类疾病已经成为危及人们健康最普遍的 EK201B),丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天
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疾病之一 。化学毒物、病毒、细菌、乙醇、自身免疫病等 冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)、乳酸脱氢
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因素均可诱发肝脏疾病 。临床上,常采用化学药治疗 酶(lactate dehydrogenase,LDH)检测试剂盒(南京建成
肝脏疾病,但其具有副作用大、易产生耐药性等缺点。 生物工程研究所有限公司,批号分别为C009-2-1、C010-
而中药因具有高效、安全等优点,近年来在抗急性肝损 2-1、A020-2-2),苏木精-伊红(HE)染液(武汉塞维尔生
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伤(acute liver injury,ALI)方面颇受关注 。 物科技有限公司,批号 G1101);甲醇、乙腈、异丙醇、甲
柴胡为伞形科植物柴胡 Bupleurum chinense DC. 或 酸均为色谱纯,水为超纯水。
狭叶柴胡 Bupleurum scorzonerifolium Willd. 的干燥根, 1.3 动物
是一种常用的传统中药,具有疏散退热、疏肝解郁、升举 本研究所用动物为SPF级雄性C57BL/6小鼠,共40
阳气的功效。现代研究发现,柴胡主要含有皂苷、挥发 只,6周龄,体重18⁓20 g,购于河南斯克贝斯生物科技股
油、黄酮和多糖等成分,其中柴胡皂苷具有显著的抗炎、 份有限公司,动物生产许可证号为 SCXK(豫)2020-
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抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、保肝等作用 。有研究报道,柴 0005。所有小鼠均饲养于温度 25 °C、昼 12 h/夜 12 h 交
胡皂苷C(saikosaponin C,SSC)具有显著的抗炎作用,同 替、相对湿度 50%~60% 的 SPF 级环境中,适应性饲养
时也可靶向作用于肝细胞核因子 1α(hepatocyte nuclear 7 d后进行后续实验,饲养期间自由饮水、进食。本动物
factor 1α,HNF1α)和 HNF4α,抑制病毒前基因组 RNA 实验符合《实验动物护理和使用指南》中相关要求,在郑
合成,发挥抗乙型肝炎病毒的作用 [5―6] 。然而,SSC 是否 州大学实验动物中心完成,且经该单位动物福利伦理委
具有抗 ALI 的作用及可能机制尚不清楚。代谢组学是 员会审查批准(批准号:ZZU-LAC20240906〔12〕)。
一种对内源性小分子代谢物(相对分子质量小于1 000) 2 方法
进行系统分析的方法,已广泛应用于疾病的发病机制和 2.1 动物分组、给药及造模
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中药对疾病的干预作用及可能机制的研究中 。鉴于 将 40 只小鼠按照随机数字表法分为空白组、模型
此,本研究基于代谢组学探讨了SSC抗ALI的作用及其 组、阳性对照药组(联苯双酯滴丸,150 mg/kg,成人临床
机制,旨在为其进一步的开发与应用奠定实验基础。 等效剂量)和 SSC 低、高剂量组(分别简写为 SSC-L、
1 材料 SSC-H 组,给药剂量分别为 2.5、10 mg/kg,结合文献[8]
1.1 主要仪器 与预实验结果确定),每组8只。空白组、模型组小鼠每
本研究所用的主要仪器有:Eclipse Ci-L型正置白光 天灌胃等体积水,各给药组小鼠每天灌胃相应药物,灌
拍照显微镜(日本Nikon公司),SpectraMax i3x型多功能 胃体积均为0.01 mL,每天给药1次,连续7 d。末次给药
酶 标 仪 [ 美 谷 分 子 仪 器(上 海)有 限 公 司],UHPLC- 1 h后,空白组小鼠腹腔注射橄榄油,余下各组小鼠腹腔
Exploris480型液质联用(LS-MS)系统、micro21R型高速 注射 0.2% 四氯化碳(CCl4 )橄榄油(10 mL/kg)以建立
低温离心机(美国 Thermo Fisher Scientific 公司),SCI- ALI模型 。
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VS型涡旋混匀器(美国Scilogex公司)等。 2.2 样本取材及处理
1.2 主要药品与试剂 CCl4造模 17 h 后,称定小鼠体重,腹腔注射戊巴比
本研究所用的主要药品与试剂有:SSC 对照品(上 妥钠(45 mg/kg)麻醉小鼠,眼球取血,将全血在4 ℃下以
海源叶生物科技有限公司,批号 B20149,纯度≥98%), 4 000 r/min 离心 15 min,收集上层血清。取血完成后解
联苯双酯滴丸(广州白云山星群药业股份有限公司,批 剖小鼠,取全部肝组织,称质量。将部分肝组织用4%多
号RF40009,规格1.5 mg/粒),肿瘤坏死因子α(tumor ne‐ 聚甲醛固定,用于组织病理学观察;余下肝组织及血清
crosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素 6(interleukin 6,IL- 均保存于-80 ℃冰箱中,用于后续实验。
中国药房 2025年第36卷第5期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 5 · 553 ·