Page 38 - 《中国药房》2025年4期
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行 梯 度 洗 脱（0～10 min，15%A→20%A；10～18 min， 分析，记录色谱图。以16号峰为参照，得各共有峰相对
20%A→35%A；18～24 min，35%A→40%A；24～35 峰面积的RSD均不高于2.03%（n＝6），相对保留时间的
min，40%A→60%A；35～39 min，60%A→65%A；39～43 RSD 均不高于 0.31%（n＝6），表明供试品溶液在室温下
min，65%A→82%A；43～50 min，82%A→95%A；50～60 放置24 h内稳定性良好。
min，95%A→15%A；60～75 min，15%A）；流 速 为 1.0 2.1.8 指纹图谱的生成及共有峰指认
mL/min；柱温为35 ℃；检测波长为254 nm；进样量为10 按“2.1.3”项下方法制备 15 批三子散样品的供试品
μL。 溶液（编号S1～S15），按“2.1.1”项下色谱条件进样分析，
2.1.2 对照品贮备液的制备
记录色谱图。将所得色谱图转换为“CDF”格式并导入
精密称取对照品没食子酸 5.26 mg、西红花苷Ⅰ
《中药色谱指纹图谱相似度评价系统（2012版）》，采用中
4.67 mg、诃子酸4.78 mg、柯里拉京3.13 mg、栀子苷5.14
位数法，以S1样品为参照图谱进行指纹图谱分析（设置
mg、鞣花酸 9.66 mg，分别置于 10 mL 容量瓶中，加甲醇
时间窗为 0.1 min），经多点校正和 Marker 峰匹配后，生
适量，超声（功率200 W，频率70 kHz）溶解，定容，混匀，
成 15 批三子散样品的对照指纹图谱（R）和叠加指纹图
得上述成分质量浓度分别为 526.00、467.00、478.00、
谱（图1）。最终确定共有峰21个，经与各单一对照品贮
313.00、514.00、966.00 μg/mL 的单一对照品贮备液，于
备液图谱（各单一对照品贮备液按“2.1.1”项下色谱条件
4 ℃下保存，备用。
进样所得，图 2）比对，共指认了 6 个，分别为没食子酸
2.1.3 供试品溶液的制备
（峰 3）、栀子苷（峰 10）、柯里拉京（峰 11）、诃子酸（峰
取三子散样品（编号S1）各饮片，粉碎，过四号筛，按
16）、鞣花酸（峰18）、西红花苷Ⅰ（峰19）。
处方比例称取各饮片粉末，充分混匀后精密称取 2.0 g，
18
置于 50 mL 锥形瓶中，加 5 mL 甲醇，称重；超声（功率 12 500 16
12
200 W，频率 70 kHz）提取 40 min，冷却至室温；再次称 10 20
10 000 3 4 7 11 13 15 17 19 21
重，以甲醇补足失重，摇匀，经0.22 μm滤膜滤过，即得指 1 2 5 6 8 9 14 R
S15
纹图谱分析用供试品溶液。 7 500 S14
S13
S12
2.1.4 饮片及阴性对照溶液的制备 U/mV 5 000 S11
S10
S9
S8
取三子散样品（编号S1）各饮片，粉碎，过四号筛，按 S7
S6
2 500 S5
处方比例称取各饮片粉末，按“2.1.3”项下方法分别制备 S4
S3
S2
栀子饮片、诃子饮片、川楝子饮片的对照溶液及缺栀子、 0 S1
0 10 20 30 40 50
缺诃子、缺川楝子的阴性对照溶液。 t/min
2.1.5 精密度考察 图1 15批三子散样品的对照指纹图谱和叠加指纹图谱
取“2.1.3”项下供试品溶液（编号S1），按“2.1.1”项下 鞣花酸
5 000
色谱条件连续进样6次，记录色谱图。以16号峰为参照 诃子酸
4 000
（峰面积较大，保留时间适中且较为稳定），得各共有峰
3 000 柯里拉京
相对峰面积的RSD均不高于1.89%（n＝6），相对保留时 没食子酸 栀子苷
间的 RSD 均不高于 0.28%（n＝6），表明方法的精密度 U/mV 2 000 西红花苷Ⅰ
良好。 1 000 Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
Ⅳ
2.1.6 重复性考察 Ⅴ
0 Ⅵ
Ⅶ
取三子散样品（编号 S1）各饮片，共 6 份，按“2.1.3” 0 10 20 30 40 50
t/min
项下方法制备供试品溶液，再按“2.1.1”项下色谱条件进 Ⅰ：S1；Ⅱ：栀子苷对照品贮备液；Ⅲ：西红花苷Ⅰ对照品贮备液；
样分析，记录色谱图。以16号峰为参照，得各共有峰相 Ⅳ：鞣花酸对照品贮备液；Ⅴ：没食子酸对照品贮备液；Ⅵ：柯里拉京对
对峰面积的RSD均不高于2.11%（n＝6），相对保留时间 照品贮备液；Ⅶ：诃子酸对照品贮备液。
的 RSD 均 不 高 于 0.29%（n＝6），表 明 方 法 的 重 复 性 图2 单一对照品贮备液和三子散样品供试品溶液（S1）
的色谱图
良好。
2.1.7 稳定性考察 2.1.9 共有峰归属
取“2.1.3”项下供试品溶液（编号S1），分别于室温下 取“2.1.4”项下各饮片对照溶液及阴性对照溶液，按
放置 0、3、6、12、18、24 h 时按“2.1.1”项下色谱条件进样 “2.1.1”项下色谱条件进样分析，记录色谱图（图3），并对
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