Page 32 - 《中国药房》2025年4期
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2.9 大鼠肝组织中 α-SMA 及 TNF-α/NF-κB 信号通路                 表2 各组大鼠血清中炎症因子指标水平比较(x±s,
          相关蛋白表达测定                                                 n=6,ng/L)
              采用Western blot法测定。取“2.2”项下冻存的大鼠                 组别          TNF-α      IL-17     IL-1β    IL-6
                                                              对照组        106.17±16.18  11.08±1.18  23.90±2.12  76.55±8.08
          肝组织(每组选3只大鼠的肝组织),提取组织中总蛋白,                          模型组        428.67±32.81 a  31.24±1.96 a  79.56±4.52 a  159.09±10.98 a
          采用 BCA 法测定总蛋白浓度。将蛋白变性后,取蛋白                          水飞蓟宾组      261.98±21.89 b  19.46±1.50 b  47.84±3.73 b  115.27±7.43 b
                                                              地锦草低剂量组    349.65±19.27 b  25.55±1.53 b  60.73±4.88 b  129.38±8.15 b
          40 μg 上样进行电泳(恒压 180 V,电泳时间 40 min),转                地锦草中剂量组    246.70±24.51 b  20.91±1.50 b  46.35±3.17 b  117.17±9.22 b
          膜 13 min 至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上。电转移后,用                     地锦草高剂量组    169.44±16.32 b  14.97±1.37 b  34.04±3.84 b  92.49±9.62 b
          含 5% 脱脂奶粉的 TBST(磷酸化蛋白用 1%BSA)浸泡                        a:与对照组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01。
                                                              表3 各组大鼠血清中肝功能指标及 HYP 水平比较
          PVDF 膜,室温摇床封闭 2 h;加入 α-SMA、TNF-α、NF-
                                                                  (x±s,n=6)
          κB p65、p-NF-κB p65、IκBα、GAPDH 一抗(稀释比例分
                                                              组别            ALT/(U/L)    AST/(U/L)   HYP/(μg/mL)
          别 为 1∶30 000、1∶1 000、1∶ 5 000、1∶1 000、1∶10 000、           对照组     33.25±4.10   84.73±7.04  11.89±2.11
          1∶10 000),于 4 ℃孵育过夜;洗膜后,加入相应二抗(稀                    模型组          144.08±17.04 a  257.89±17.38 a  40.66±3.62 a
                                                              水飞蓟宾组         84.42±9.27 b  165.40±13.76 b  21.41±2.49 b
          释比例为 1∶10 000),室温孵育 2 h。洗膜后进行曝光显                    地锦草低剂量组      121.37±11.72 c  210.20±15.01 b  27.11±2.77 b
          色,利用Image Pro Plus 6.0软件分析条带灰度值。以目                  地锦草中剂量组       86.78±7.52 b  156.66±12.80 b  19.40±1.90 b
                                                              地锦草高剂量组       55.08±8.85 b  127.32±13.22 b  14.72±1.72 b
          标蛋白与内参蛋白(GAPDH)条带灰度值的比值表示目
                                                                 a:与对照组比较,P<0.01;b:与模型组比较,P<0.01;c:与模型组
          标蛋白的表达水平,以 p-NF-κB p65 与 NF-κB p65 灰度               比较,P<0.05。
          值比值表示NF-κB p65蛋白的磷酸化水平。                             3.4 地锦草对HF大鼠肝组织病理的影响
          2.10 统计学方法                                          3.4.1 HE染色情况
              使用SPSS 29.0软件对数据进行统计分析。符合正                          对照组大鼠肝组织结构完整,肝细胞排列不规则,

          态分布的定量资料以x±s表示,多组间比较采用单因素                           未见明显结缔组织增生,间质内可见零散炎症细胞浸
          方差分析,方差齐性时组间两两比较采用LSD-t检验,方                         润。与对照组比较,模型组大鼠肝细胞排列更不规则,
          差不齐性时组间两两比较采用Tamhane’s T2检验;不符                      肝细胞水肿伴明显胞浆疏松化,肝细胞实质内有少量空
          合正态分布的定量资料以 M(P25,P75 )表示,组间比较采                     泡样变性,汇管区可见大量结缔组织增生,间质内可见
          用Kruskal-Wallis H检验。检验水准α=0.05。                     少量炎症细胞浸润。与模型组比较,各给药组大鼠肝组
          3 结果                                                织在炎症细胞浸润、肝细胞水肿等方面均有不同程度改
          3.1 地锦草对HF大鼠肝指数的影响                                  善。结果见图1。
              对照组、模型组、水飞蓟宾组和地锦草低、中、高剂
          量 组 大 鼠 的 肝 指 数 分 别 为(3.18±0.20)% 、(4.07±
          0.17)%、(3.47±0.14)%、(3.59±0.21)%、(3.36±0.06)%、
         (3.30±0.14)%。与对照组比较,模型组大鼠的肝指数
                                                                   A.对照组           B.模型组         C.水飞蓟宾组
          显著升高(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠的肝
          指数均显著降低(P<0.01)。
          3.2 地锦草对HF大鼠血清中炎症因子水平的影响
              与对照组比较,模型组大鼠血清中 TNF-α、IL-17、
                                                                D.地锦草低剂量组       E.地锦草中剂量组       F.地锦草高剂量组
          IL-1β、IL-6水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,
                                                                 蓝色箭头:结缔组织增生;黑色箭头:肝细胞水肿;绿色箭头:肝细
          各给药组大鼠血清中上述指标水平均显著降低(P<                             胞空泡样变性;黄色箭头:炎症细胞浸润。
          0.01)。结果见表2。                                               图1 各组大鼠肝组织HE染色显微图
          3.3 地锦草对 HF 大鼠血清中肝功能指标及 HYP 水平                      3.4.2 Masson染色情况
          的影响                                                     对照组大鼠肝组织未见结缔组织增生,可见少量蓝
              与对照组比较,模型组大鼠血清中 ALT、AST、HYP                     色胶原纤维。模型组大鼠肝组织蓝色胶原纤维明显增
          水平均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,各给药组                         多,纤维间隔变粗。与模型组比较,各给药组大鼠肝组
          大鼠血清中上述指标水平均显著降低(P<0.05 或 P<                        织蓝色胶原纤维明显变细,纤维间隔变窄。与对照组
          0.01)。结果见表3。                                        [ (0.06±0.01)%]比较,模型组大鼠阳性染色百分比


          · 410 ·    China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 4                               中国药房  2025年第36卷第4期
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