Page 30 - 《中国药房》2025年4期

phosphorylated NF-κB p65 in liver tissues of rats from administration groups， the expressions of α-SMA and TGF-β1 in liver tissue
of rats from E. humifusa medium-dose and high-dose groups， as well as positive staining percentage and mRNA expression of TNF-
α in liver tissue of rats from E. humifusa high-dose group were all decreased significantly （P＜0.05 or P＜0.01）； IκBα protein
expression from administration groups was significantly increased （P＜0.05 or P＜0.01）. Pathological changes and the degree of HF
in the liver tissues of rats from administration groups were ameliorated to various extents. CONCLUSIONS E. humifusa may
alleviate HF in rats by inhibiting the activation of the TNF-α/NF-κB signaling pathway.
KEYWORDS Euphorbia humifusa； hepatic fibrosis； TNF-α/NF-κB signaling pathway； Miao medicine

肝纤维化（hepatic fibrosis，HF）是指在各种致病因 100型超微量紫外-可见光分光光度计（杭州米欧仪器有
素的作用下使肝脏受到损伤，从而激活静止状态的肝星 限公司）、Chemray240型全自动生化分析仪（深圳雷杜生
状细胞（hepatic stellate cell，HSC），使 HSC 大量增殖、转 命科学股份有限公司）、QuantStudio 6 型实时荧光定量-
化以及细胞外基质（extracellular matrix，ECM）过度沉积 聚合酶链式反应（PCR）仪（美国 ABI 公司）、Fi3 型生物
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和异常分布，最后形成纤维瘢痕的一种病理过程 。HF 显微镜（尼康株式会社）。
是众多慢性重症肝病的共同病理基础，如果不加以防治 1.2 主要药品与试剂
会进一步发展为肝硬化，甚至肝癌 [2―3] 。研究指出，虽然 本研究所用主要药品与试剂包括地锦草（地锦）配
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HF是可逆的，但目前没有批准的可用于抗HF的药物 ； 方颗粒（神威药业集团有限公司，批号230325Q，规格为
另有研究指出，肝脏疾病相关的死亡率会随着 HF 的加 1 g 配方颗粒相当于中药饮片 3.5 g），水飞蓟宾胶囊
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剧而呈指数增长 。因此，对HF进行有效干预显得尤为 （天津天士力圣特制药有限公司，批号35070805，规格35
重要。 mg），小鼠源甘油醛-3-磷酸脱氢酶（GAPDH）单抗、兔源
地 锦 草 为 大 戟 科 植 物 地 锦 Euphorbia humifusa NF-κB p65 多抗、兔源核因子 κB 抑制蛋白 α（inhibitor-κ
Willd. 或斑地锦 Euphorbia maculata L. 的干燥全草，归 binding protein α，IκBα）多抗、兔源转化生长因子 β1
肝、胃、大肠经，具有清热解毒、凉血止血、活血化瘀、利 （transforming growth factor-β1，TGF-β1 ）多抗（武汉三鹰
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湿退黄的功效 。地锦草始载于《嘉裕本草》，为我国贵 生物技术有限公司，批号分别为 10028230、00162675、
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州苗族常用药 ，又被称为“地瓣草”（兴义）、“斑鸠窝” 10268-1-AP、21898-1-AP），α - 兔 源 平 滑 肌 肌 动 蛋 白
（贵阳）”、“倒欠草”（铜仁）。在国医大师周仲瑛的用药 （α-smooth muscle actin，α-SMA）单抗（英国 Abcam 公
案例中，地锦草常被用于治疗HF和肝硬化 。地锦草的 司，批号 1000229-37），兔源 TNF-α 多抗（上海碧云天生
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主要有效成分包括黄酮类、萜类、香豆素类等，具有抗肿 物技术股份有限公司，批号 AF8208），兔源磷酸化 NF-
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瘤、降血脂、抗氧化、护肝等多种药理作用 。有研究发 κB p65（p-NF-κB p65）多抗（江苏亲科生物研究中心有
现，地锦草及其提取物可明显改善肝损伤小鼠的肝功 限公司，批号 4c61978），反转录试剂盒、总 RNA 提取试
能，初步证实了其对小鼠急性肝损伤的保护作用 ，但其 剂、高灵敏性染料法定量 PCR 检测试剂盒（南京诺唯赞
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是否可以缓解HF尚不明确。肿瘤坏死因子α（tumor ne‐ 生 物 科 技 股 份 有 限 公 司 ，批 号 分 别 为 7E731J3、
crosis factor-α，TNF-α）/核因子 κB（nuclear factor-κB， 7E1141H4、7E0962H4），丙氨酸转氨酶（alanine transami‐
NF-κB）信号通路的激活能诱导多种促炎介质的转录， nase，ALT）、天 冬 氨 酸 转 氨 酶（aspartate transaminase，
刺激HSC转化与ECM的过度沉积，从而促进HF的发生 AST）测定试剂盒（深圳雷杜生命科学股份有限公司，批
发展 。本研究拟从 TNF-α/NF-κB 信号通路出发，初步 号分别为 20221130、20221103），羟脯氨酸（hydroxypro‐
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探讨地锦草对 HF 大鼠的改善作用及机制，旨在为挖掘 line，HYP）测定试剂盒（南京建成生物工程研究所有限
HF的潜在治疗药物奠定基础。 公司，批号 20230218），TNF-α、白细胞介素 17（interleu‐
1 材料 kin-17，IL-17）、IL-1β、IL-6 酶联免疫吸附测定（ELISA）
1.1 主要仪器 试剂盒（江苏酶免实业有限公司，批号均为 202407），兔
本研究所用主要仪器包括DYCZ-24DN型垂直电泳 源 α-SMA 多抗（武汉塞维尔生物科技有限公司，批号
槽（北京六一仪器厂）、SH-523 型化学发光成像系统（杭 AC240103198），Poly-HRP 标记的羊抗鼠/兔二抗（厦门
州申花科技有限公司）、L00686C eBlot™ L1 型快速湿转 通灵生物医药科技股份有限公司，批号20709024D）。
仪（金斯瑞生物科技股份有限公司）、H1-16KR型台式高 1.3 实验动物
速冷冻离心机（湖南可成仪器设备有限公司）、Multiskan 本研究所用动物为SPF级健康SD大鼠，共38只，雄
FC 型酶标仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司）、ND- 性，6～8 周龄，体重（200±20） g，由贵州中医药大学动

· 408 · China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 4 中国药房 2025年第36卷第4期