Page 51 - 《中国药房》2025年2期
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inflammation，  reduction  of  collagen  production，  inhibition  of  PDGF  protein  expression，  and  regulation  of  TGF- β1  signaling
          pathway.
          KEYWORDS    Prunus mume； hepatic fibrosis； transforming growth factor-β1； platelet-derived growth factor



              肝纤维化（hepatic fibrosis，HF）是在各种原因致肝              设备有限公司）、Epoch 型酶标检测仪（美国 BioTek 公
          细胞受损时，细胞外基质（extracellular matrix，ECM）发             司）、PBC22A Plus 型全自动生化分析仪（深圳市活水床
          生的病理变化。HF是慢性肝病发展到肝硬化的必经阶                           旁诊断仪器有限公司）、5430R型离心机（德国Eppendorf
          段，若未得到有效治疗，可显著增加肝衰竭和肝细胞癌                           公司）。
          的发生率。研究指出，早期干预 HF 的发生发展或促使                         1.2 主要药品与试剂
          其逆转，是预防肝硬化及其他恶性肝病发生的重要措                                乌梅饮片（批号 20240101）购自江西齐仁堂中药饮
            [1]
          施 。然而，目前西医治疗 HF 的手段较为单一，主要为                        片有限公司，由江西齐仁堂中药饮片有限公司质检合格
                                        [2]
          抗病毒、保肝及对症治疗，疗效欠佳 。因此，探索新的                          并 鉴 定 为 蔷 薇 科 植 物 梅 Prunus  mume（Sieb.）Sieb. et
          HF防治药物具有重要意义。                                      Zucc.的干燥近成熟果实。
              中医学尚无“肝纤维化”的病名记载，但根据其临床                            秋水仙碱片（批号20221006，规格0.5 mg）购自云南
          特征，HF 当归于“积聚”“癥瘕”“臌胀”“死肌”等范畴。                      植物药业有限公司；肝功能酶及肝代谢物测定试剂盒
          研究表明，中药在防治 HF 方面疗效明确，且具有多成                        （批号分别为20220901、20220901）均购自深圳市活水床
          分、多靶点、多角度及长期服用副作用较小的优势 。乌                          旁诊断仪器有限公司；Ⅲ型前胶原蛋白（procollagen
                                                    [3]
          梅为临床常用药，《神农本草经》言其具有治疗“死肌”之
                                                             type Ⅲ protein，PCⅢ）、Ⅳ型前胶原酶（Ⅳ-type pre colla‐
          功效，《本草纲目》认为其可治“恶肉”，且有研究证实重                         genase，Ⅳ-C）、层粘连蛋白（laminin，LN）、透明质酸
          用乌梅的乌梅丸对息肉、瘢痕等有很好的疗效                    [4—5] 。此
                                                            （hyaluronic acid，HA）酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂
          外，乌梅中含多种黄酮类化合物，而黄酮类化合物具有                           盒（批号均为 2023-06）均购自江苏酶免实业有限公司；
          较低的毒性和广泛的药理活性，已有研究证实其具有抗                           IL-6、TNF-α 定量检测试剂盒（批号分别为RX302856R、
                [6]
          HF作用 。由此可见，乌梅具有一定的抗HF潜力。
                                                             RX302058R）均购自泉州市睿信生物科技有限公司；丙
              HF 的发生发展是一个复杂的病理过程，其中肝星                        二醛（malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（super‐
          状细胞（hepatic stellate cells，HSC）的激活是 HF 发生的
                                                             oxide dismutase，SOD）、谷胱甘肽过氧化酶（glutathione
          关键环节，而HSC的激活与促炎或促纤维化因子密切相
                                                             peroxidase，GSH-Px）检测试剂盒（批号分别为20221020、
          关 。研究指出，肝细胞可直接激活HSC，释放转化生长                         20230520、20230224）均购自南京建成生物工程研究所有
            [7]
          因子 β1 （transforming growth factor-β1，TGF-β1 ）、血小板
                                                             限公司；BCA蛋白定量试剂盒（批号20220820）购自北京
          源性生长因子（platelet-derived growth factor，PDGF）等
                                                             兰杰柯科技有限公司；兔源 TGF-β1、PDGF、β-肌动蛋白
          促 纤 维 化 因 子 以 及 肿 瘤 坏 死 因 子 α（tumor  necrosis
                                                            （β-actin）抗体和辣根过氧化物酶标记的羊抗兔IgG二抗
          factor-α，TNF-α）、白细胞介素（interleukin，IL）等炎症因
                                                            （批 号 分 别 为 21898-1-AP、14075-1-AP、66009-1-Ig、
          子，促使HSC向肌成纤维细胞转化，增强HSC合成ECM
                                                             SA00001-2）均购自美国Proteintech公司。
          的能力并抑制ECM的分解，从而促进HF的发生发展 。
                                                       [8]
                                                             1.3 动物及饲料
          同时，有研究发现，氧化应激过程是包括HF在内的诸多
                                                                 本研究所用动物为雄性SPF级SD大鼠，共60只，体
          疾病发生的重要环节，细胞自由基产生与消除的失衡可
          使大量氧化自由基蓄积，导致肝损伤及炎症发生，继而                           重（180±20） g，6～8周龄，购自江西中医药大学动物实
                [9]
          诱发HF 。基于此，本研究拟通过动物实验评价乌梅抗                          验科技中心，动物使用许可证号为 SYXK（赣）2022-
          HF 的作用并观察其对促炎因子、促纤维化因子及氧化                          0002。购入后，所有大鼠均架笼饲养，实验室自然采光、
          应激指标的影响，初步探讨其抗HF的作用机制，以期为                          通风良好且温度和湿度适宜。实验饲料由江西中医药
          乌梅的临床应用及相关新药研发提供参考。                                大学动物实验科技中心提供，动物实验方案符合江西中
          1 材料                                               医 药 大 学 实 验 动 物 伦 理 委 员 会 条 例（伦 理 批 号 为
          1.1 主要仪器                                           20220301016）。
              本研究所用的主要仪器有 ME203E/02 型电子天平                    2 方法
          [梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司]、KZ-Ⅱ型高速组                       2.1 乌梅药液的制备
          织研磨仪（武汉赛维尔生物科技有限公司）、D3024R 型                           取乌梅饮片，以 10 倍量水浸泡 0.5 h，武火快速煮
          台式高速冷冻离心机和SCI-VS型涡旋混合器[大龙兴创                        沸，然后转文火煎煮 30 min，过滤，重复操作 1 次。将 2
          实验仪器（北京）股份公司]、G20 TWIN型透射电子显微                      次煎煮所得药液混合均匀后蒸发浓缩，得每 1 mL 含生
          镜（美国 FEI 公司）、FV3000 型共聚焦显微镜（日本                     药量 0.54 g 的药液，4 ℃下保存，临用时稀释至所需
          Olympus公司）、DK-8B型电热恒温水槽（上海精宏实验                     浓度。


          中国药房  2025年第36卷第2期                                                 China Pharmacy  2025 Vol. 36  No. 2    · 173 ·
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