Page 83 - 《中国药房》2025年1期

表2 15批平火茶标准汤剂信息 2.2.7 重复性试验
编号 菊花批次 栀子批次 白茅根批次 山楂批次 甘草批次 取平火茶标准汤剂冻干粉（S1），按“2.2.1”项下方法
S1 AHCZ-3 HNTH-1 HBXT-2 HBXL-2 NMGE-1 平行制备 6 份供试品溶液，分别按“2.2.4”项下色谱条件
S2 ZJTX-2 HNTH-3 FJSW-1 SXJX-1 XJAL-1 进样测定，记录峰面积。以栀子苷色谱峰为参照峰，计
S3 HNJZ-3 JXYC-2 AHBZ-3 SXJX-3 XJAL-2
S4 HNJZ-2 HBJL-1 FJSW-2 SDQZ-3 NMGE-2 算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，所得RSD均
S5 AHCZ-2 JXYC-2 AHBZ-3 HBXL-3 NMGE-3 小于4.67%，表明该方法重复性良好。
S6 ZJTX-2 HNTH-2 HBXT-3 SXJX-3 XJAL-2 2.2.8 指纹图谱的建立及相似度评价
S7 HNJZ-3 JXYC-1 FJSW-2 SXJX-3 GSLX-3
S8 AHCZ-2 JXYC-1 AHBZ-2 SDQZ-2 NMGE-2 按照“2.2.1”项下方法平行制备 15 批平火茶标准汤
S9 HNJZ-2 HNTH-1 AHBZ-3 SXJX-2 XJAL-2 剂的供试品溶液，分别按“2.2.4”项下色谱条件进样测
S10 ZJTX-1 JXYC-1 FJSW-1 HBXL-3 GSLX-2 定，记录色谱图。将15批平火茶标准汤剂的HPLC图导
S11 ZJTX-3 JXYC-2 FJSW-2 SDQZ-1 NMGE-2
S12 AHCZ-2 HBJL-2 HBXT-1 SXJX-1 GSLX-3 入 2012 版《中药色谱指纹图谱评价软件》，以 S1 的指纹
S13 HNJZ-2 HNTH-2 HBXT-2 HBXL-1 XJAL-3 图谱为参照图谱，设时间窗宽度为 0.1 min，采用中位数
S14 ZJTX-3 JXYC-3 AHBZ-1 HBXL-1 XJAL-1 法，经多点校正和 Mark 峰匹配生成 15 批平火茶标准汤
S15 AHCZ-1 HBJL-1 FJSW-2 HBXL-1 NMGE-2
剂的指纹图谱和对照指纹图谱 R（图 1），并标定出 24 个
处理（功率 300 W，频率 40 kHz）40 min，放冷，再称定质
共有峰；经与混合对照品的HPLC图（图2）比对，其中3、
量；用 70% 甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液
6、9、10、11、14、21、23、24 号峰对应成分分别为新绿原
过0.22 μm微孔滤膜，即得供试品溶液。
酸、绿原酸、栀子苷、甘草苷、木犀草苷、异绿原酸 A、木
2.2.2 混合对照品溶液的制备
犀草素、山柰酚、甘草酸。15 批平火茶标准汤剂（S1～
精密称取绿原酸、新绿原酸、异绿原酸 A、栀子苷、
S15）的相似度分别为 0.986、0.990、0.988、0.968、0.993、
木犀草素、甘草苷、甘草酸、木犀草苷、山柰酚对照品各 0.977、0.979、0.997、0.983、0.979、0.996、0.972、0.988、
适量，加70%甲醇制成质量浓度分别为0.445 3、0.529 2、
0.981、0.977，均不小于 0.968，表明不同批次平火茶标准
0.607 6、0.245 0、0.421 4、0.107 8、0.186 2、0.080 85、
0.347 6 mg/mL的混合对照品溶液。 汤剂所含化学成分的种类基本一致。
2.2.3 单味饮片及阴性样品溶液的制备 520
分别取栀子、菊花、白茅根、山楂和甘草饮片冻干粉 480
440
约 0.25 g，按照“2.2.1”项下方法制备各单味饮片供试品 400
溶液；同法制备各饮片的阴性样品溶液。 360
320
2.2.4 色谱条件 mAU 280
色谱柱为 Venusil C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）；流 240
200
动相为乙腈（A）-0.1% 磷酸溶液（B），梯度洗脱（0～16 160
120
min，5%A→9%A；16～32 min，9%A→18%A；32～63 80
min，18%A；63～68 min，18%A→28%A；68～84 min， 40
0
28%A→36%A；84～98 min，36%A→51%A；98～102 2 6 10 14 18 22 26 30 34 38 42 46 50 54 58 62 66 70 74 78 82 86 90 94
min，51%A→36%A）；柱温为 30 ℃；检测波长为 238 nm t/min
图1 15批平火茶标准汤剂的HPLC指纹图谱和对照指
（0～37 min、85～102 min）、330 nm（37～85 min）；流速
为1.0 mL/min；进样量为10 μL。 纹图谱R
2.2.5 精密度试验 70
取平火茶标准汤剂冻干粉（S1），按“2.2.1”项下方法 65
60
制备供试品溶液，按“2.2.4”项下色谱条件连续进样测定 55
50
6次，记录峰面积。以栀子苷色谱峰为参照峰，计算各共 45
40
有峰的相对保留时间和相对峰面积，所得 RSD 均小于 mAU 35
4.36%，表明该方法精密度良好。 30
25
2.2.6 稳定性试验 20
15
取平火茶标准汤剂冻干粉（S1），按“2.2.1”项下方法 10
5
制备供试品溶液，按“2.2.4”项下色谱条件分别在室温下 0
放置 0、2、4、6、8、12、24 h 时进样测定，记录峰面积。以 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95
t/min
栀子苷色谱峰为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间 3：新绿原酸；6：绿原酸；9：栀子苷；10：甘草苷；11：木犀草苷；14：
和相对峰面积，所得 RSD 均小于 4.47%，表明供试品溶 异绿原酸A；21：木犀草素；23：山柰酚；24：甘草酸。
液在室温下放置24 h内稳定性良好。 图2 混合对照品溶液的HPLC图

中国药房 2025年第36卷第1期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 1 · 73 ·