Page 78 - 《中国药房》2025年1期
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3.3 PL 提取物对 H2O2诱导的 IEC-6 细胞氧化应激的
影响
与 Control 组比较,H2O2组细胞上清液中 SOD 活性 A. Control组
显著降低,MDA含量、ROS水平均显著升高(P<0.05或
100 μm 100 μm 100 μm
P<0.01)。与H2O2组比较,H2O2+PL 50 μg/mL组细胞上
清液中 SOD 活性显著升高,ROS 水平显著降低(P<
0.05)。结果见表2、图3。
表2 PL 提取物对 IEC-6 细胞氧化应激的影响(x±s, B. H 2 O 2 组
n=6)
100 μm 100 μm 100 μm
组别 MDA含量/(nmol/10 000个细胞) SOD活性/(U/10 000个细胞) ROS水平/%
Control组 0.42±0.18 0.41±0.09 24.06±7.72
H 2O 2组 0.93±0.14 a 0.15±0.05 a 56.27±8.14 b
H 2O 2+PL 25 μg/mL组 0.70±0.08 0.22±0.52 44.97±7.48 C. H 2 O 2 +PL 25 μg/mL组
H 2O 2+PL 50 μg/mL组 0.64±0.13 0.38±0.04 c 33.44±10.36 c
a:与Control组比较,P<0.05;b:与Control组比较,P<0.01;c:与 100 μm 100 μm 100 μm
H 2O 2组比较,P<0.05。
300
200
150 D. H 2 O 2 +PL 50 μg/mL组
200
Count 100 Count 100 μm 100 μm 100 μm
100
50 红色荧光 绿色荧光 混合
图4 PL提取物对IEC-6细胞MMP影响的荧光显微图
0 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6
ROS FITC-A ROS FITC-A GPX4、FTH mRNA 及 GPX4、FTH 蛋白的表达均显著下
A. Control组 B. H 2 O 2 组
250 调(P<0.05 或 P<0.01);与 H2O2组比较,各药物组细胞
300
中 Nrf2、HO-1、NQO-1、xCT、GPX4、FTH mRNA 及蛋白
200
Count 150 200 的表达均有不同程度上调,部分指标组间比较差异有
100 Count 统 计 学 意 义(P<0.01 或 P<0.05)。 结 果 见 表 3、表
100 4、图5。
50
表3 PL 提取物对 H2O2诱导的 IEC-6 细胞中铁死亡相
0 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 5 10 6 关mRNA表达的影响(x±s,n=6)
ROS FITC-A ROS FITC-A
C. H 2 O 2 +PL 25 μg/mL组 D. H 2 O 2 +PL 50 μg/mL组 组别 Nrf2 mRNA HO-1 mRNA NQO-1 mRNA xCT mRNA GPX4 mRNA FTH mRNA
图3 PL 提取物对 IEC-6 细胞中 ROS 水平影响的流 Control组 1.00±0.15 1.03±0.27 1.00±0.14 1.01±0.16 1.00±0.05 1.00±0.10
式图 H 2O 2组 2.17±0.77 a 2.14±0.92 1.58±0.72 b 0.43±0.20 a 0.58±0.10 a 0.32±0.25 a
H 2O 2+PL 25 μg/mL组 2.49±0.51 c 2.21±0.60 1.94±0.82 0.53±0.21 0.72±0.08 d 0.42±0.21
3.4 PL提取物对H2O2诱导的IEC-6细胞MMP的影响 H 2O 2+PL 50 μg/mL组 3.08±0.60 d 2.85±0.45 c 2.02±0.79 0.71±0.17 c 0.94±0.19 d 0.47±0.23
与 Control 组(MMP 为 2.01±0.21)比较,H2O2 组细 a:与Control组比较,P<0.01;b:与Control组比较,P<0.05;c:与
H 2O 2组比较,P<0.05;d:与H 2O 2组比较,P<0.01。
胞的红色荧光明显减弱,绿色荧光明显增强,MMP
(0.63±0.15)显著降低(P<0.01);与H2O2组比较,H2O2+ 表4 PL 提取物对 H2O2诱导的 IEC-6 细胞中铁死亡相
PL 25、50 μg/mL组细胞的红色荧光有所增强,绿色荧光 关蛋白表达的影响(x±s,n=6)
Nrf2/ HO-1/ NQO-1/ xCT/ GPX4/ FTH/
有 所 减 弱 ,MMP[1.17±0.15、1.63±0.15] 均 显 著 升 高 组别
GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH GAPDH
(P<0.05或P<0.01)。结果见图4。 Control组 0.98±0.08 0.99±0.18 1.04±0.33 0.98±0.04 1.00±0.12 0.98±0.12
3.5 PL提取物对H2O2诱导的IEC-6细胞中铁死亡相关 H 2O 2组 1.63±0.19 a 2.28±0.19 a 1.28±0.08 0.49±0.25 0.57±0.14 b 0.66±0.12 b
H 2O 2+PL 25 μg/mL组 1.77±0.25 2.59±0.42 1.42±0.20 0.75±0.16 0.61±0.17 0.80±0.12
mRNA及蛋白表达的影响
H 2O 2+PL 50 μg/mL组 2.48±0.24 c 3.16±0.33 d 1.70±0.23 d 0.95±0.11 d 0.79±0.14 0.86±0.11
与 Control 组 比 较 ,H2O2 组 细 胞 中 Nrf2、NQO-1
a:与Control组比较,P<0.01;b:与Control组比较,P<0.05;c:与
mRNA 及 Nrf2、HO-1 蛋白的表达均显著上调,xCT、 H 2O 2组比较,P<0.01;d:与H 2O 2组比较,P<0.01。
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