Page 53 - 《中国药房》2025年1期

10 mL 容量瓶中，制成含芦荟大黄素 0.040 mg/mL、大 分别为98.01%、100.97%、97.16%、98.59%、97.38%（RSD
黄酸 0.084 mg/mL、大黄素 0.052 mg/mL、大黄酚 0.184 分别为 1.02%、3.32%、2.28%、0.65%、1.27%，n＝6）。以
mg/mL、大黄素甲醚0.044 mg/mL的混合对照品溶液。 上均符合指导原则相关要求。
2.4.2 供试品溶液制备 600 4

（1）游离蒽醌供试品溶液的制备：取生大黄（或煨大 mAU 400 1 2 3 5
200
0
黄）粉末约0.5 g（过四号筛），精密称定，置于具塞锥形瓶 0 3 6 9 12 15
t/min
中，精密加入甲醇25 mL，称定质量；加热回流1 h，放冷， A.混合对照品溶液
再次称定质量，用甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取 500 4
400
300
续滤液，过0.22 μm微孔滤膜，即得。（2）总蒽醌供试品溶 mAU 200 0 1 2 3 5
100
0 3 6 9 12 15
液的制备：取生大黄（或煨大黄）粉末约 0.15 g（过四号 t/min
筛），精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇 25 B.游离蒽醌供试品溶液（煨大黄）
160 4
mL，称定质量；加热回流1 h，放冷，再次称定质量，用甲 mAU 120 1 2 3
80
醇补足减失的质量，摇匀，滤过；精密量取续滤液5 mL， 40 0 5
0 3 6 9 12 15
置于烧瓶中，挥去溶剂，加 8% 盐酸溶液 10 mL，超声处 t/min
C.总蒽醌供试品溶液（煨大黄）
理2 min；再加三氯甲烷10 mL，加热回流1 h，放冷，置于
1：芦荟大黄素；2：大黄酸；3：大黄素；4：大黄酚；5：大黄素甲醚。
分液漏斗中，再用少量三氯甲烷洗涤容器，洗涤液并入 图3 游离蒽醌和总蒽醌的系统适用性试验HPLC图
分液漏斗中，取三氯甲烷层；再用三氯甲烷提取3次，每
2.5 外观性状评价标准
次10 mL，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至干；残渣加
笔者根据古籍中“大黄湿纸裹煨勿令焦”“大黄湿纸
甲醇使溶解，转移至10 mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇
包，煨令香熟”“湿纸裹煨至纸焦”等相关描述，并参考相
匀，滤过，取续滤液，过0.22 μm微孔滤膜，即得。
关文献的评分方法 [6，11] ，对煨大黄的纸张性状、饮片气
2.4.3 色谱条件、系统适用性试验与方法学考察
味、颜色以及质地进行评分，具体标准为：当饮片浓香、
本实验色谱条件参考文献[11]设置。以 Agilent
较硬、呈深棕黄色且纸焦时，记为 3 分；当饮片清香、较
Zorbax ODS C18 （250 mm×4.6 mm，5 μm）为色谱柱，以
软、呈黄褐色且纸干时，记为2分；当饮片焦香、轻脆、呈
甲醇-0.1% 磷酸溶液（V/V，85∶15）为流动相进行等度洗
焦褐色且纸湿时，记为1分。
脱，检测波长为 254 nm，流速为 1.0 mL/min，柱温为
2.6 AHP-熵权法计算煨大黄的综合评分
30 ℃，进样量为 10 μL，洗脱时间为 15 min。分别吸取
空白对照溶液（甲醇）和“2.4.1”“2.4.2”项下混合对照品 2.6.1 AHP确定权重rj
煨大黄作为古代应用普遍但现代已经失传的炮制
溶液、煨大黄游离蒽醌和总蒽醌供试品溶液适量进样测
品种，外观性状特征对其质量评价具有重要作用，因此
定，记录色谱图。结果显示，各成分分离度均大于 1.5，
在AHP中设置最高权重；游离蒽醌是2020年版《中国药
理论板数按大黄酸峰计均不低于 9 000，空白对照溶液
典》中大黄质量评价的重要指标，也是大黄发挥活血化
对测定无干扰，具体见图 3（空白对照溶液图略）。参考
[12]
2020 年版《中国药典》（三部）9101 分析方法验证指导原 瘀作用的主要药效成分 ；结合蒽醌和番泻苷类是大黄
[9]
则 进行方法学考察，结果显示，芦荟大黄素、大黄酸、大 及其炮制品发挥泻下作用的主要药效成分 [13―14] ；没食子
黄素、大黄酚和大黄素甲醚的回归方程分别为 Y＝ 酸是大黄发挥收敛止血、抗炎作用的主要药效成分，且
[15]
44.288X+4.203、Y＝28.356X+1.587、Y＝27.553X+1.356、 大黄煨制后该成分含量变化较大 ；5-HMF具有多种药
[16]
Y＝39.703X+20.806、Y＝32.660X+1.431（r≥0.999 9），线 理活性但有一定毒副作用 ，故在 AHP 中设置最低权
性范围分别为0.020～0.480、0.042～1.008、0.026～0.624、 重。最终确认各指标重要程度依次为外观形状评分＞
0.092～2.208、0.022～0.528 μg；精密度试验、游离蒽醌 游离蒽醌含量＝结合蒽醌含量＞番泻苷A+番泻苷B含
的重复性试验和稳定性试验（24 h）、总蒽醌的重复性 量＞没食子酸含量＞5-HMF含量，构建各指标的优先判
试验和稳定性试验（24 h）的 RSD 均小于 3.00%（n＝6）； 断矩阵，并根据方根法计算各指标的rj，具体见表1。进
游离蒽醌的平均加样回收率分别为 97.35%、101.94%、 一步对矩阵进行一致性检验发现，一致性参数 λmax＝
100.89%、98.40%、99.50%（RSD 分别为 0.69%、3.05%、 6.072，一致性指标＝0.014，一致性比率＝0.011＜0.1，表
1.85%、0.66%、0.87%，n＝6）；总蒽醌的平均加样回收率 明矩阵合理有效，权重系数可靠。

中国药房 2025年第36卷第1期 China Pharmacy 2025 Vol. 36 No. 1 · 47 ·