Page 55 - 《中国药房》2024年21期

全峰匹配，分别生成槐花、槐米生品及其不同炒制程度 液的进样量为横坐标（x）、以峰面积为纵坐标（y）绘制标
炭品的对照指纹图谱；利用 Origin 软件将上述对照指 准曲线，得到各成分的回归方程及线性范围，结果
纹图谱生成瀑布图（图 2）。结果显示，槐花和其不同炒 见表2。

制程度的炭品共有 9 个共有峰，随着炒制程度的加重， 表2 6种成分的线性关系考察结果
8 个色谱峰的峰面积先增加后降低，1 个色谱峰的峰面 成分 回归方程 R 2 线性范围/µg
芦丁 y＝39.337x+8.640 8 0.999 6 0.864～57.65
积无明显变化；相比槐花生品，槐花炒适中炭样品和炒 山柰酚-3-O-芸香糖苷 y＝36.230x+0.182 7 0.999 9 0.020～1.80
重炭样品均消失了 3 个色谱峰，新产生了 2 个色谱峰。 异鼠李素-3-O-芸香糖苷 y＝47.798x+0.840 9 1.000 0 0.069～6.90
槲皮素 y＝140.760x－20.472 0 0.999 2 0.556～5.56
槐米和其不同炒制程度炭品有 8 个共有峰，随着炒制
山柰酚 y＝116.300x－0.117 0 1.000 0 0.011～0.43
程度的加重，7 个色谱峰的峰面积先增加后降低，1 个 异鼠李素 y＝82.679x+0.629 4 0.999 6 0.030～0.60
色谱峰的峰面积逐渐降低；相比槐米生品，槐米炒炭后 2.5.2 重复性实验
消失了 2 个色谱峰，但均分别新产生了 1 个色谱峰。由 同“2.4.3”项下重复性试验方法操作，根据标准曲线
此可知，炒炭会使槐花、槐米的化学成分发生变化。将 计算得芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-芸香
各样品的对照指纹图谱进一步与混合对照品图谱比对 糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素的平均含量分别为
后，共指认出 6 种成分，分别为芦丁、山柰酚-3-O-芸香 2.53%、0.12%、0.28%、1.29%、0.07%、0.14%，RSD 均小于
糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠 1.50%（n＝6），表明该方法重复性良好。
李素。 2.5.3 加样回收率试验

取已知含量的槐米（编号M2）炒重炭样品粉末6份，
各0.25 g，精密称定，分别加入山柰酚-3-O-芸香糖苷、异
鼠李素-3-O-芸香糖苷、山柰酚、异鼠李素质量浓度分别
5 000 1 2 3 4 5 6
4 000 混合对照品 为 0.36、0.69、0.17、0.30 mg/mL 的对照品溶液各 1 mL，
槐花生品
mAU 3 000 槐花炒轻炭样品 2.30 mg/mL 的芦丁对照品溶液 3 mL，0.56 mg/mL 的槲
2 000
槐花炒适中炭样品
1 000
槐花炒重炭样品 皮素对照品溶液 6 mL，再以甲醇补足至 25 mL，按“2.2”
0
0 10 20 30 40 50
t/min 项下方法制备供试品溶液，再按“2.3”项下色谱条件进样
A.槐花各样品 测定，计算得芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-
O-芸香糖苷、槲皮素、山柰酚、异鼠李素的平均回收率分
别 为 102.82%、101.37%、102.55%、101.99%、100.87%、
5 000 1 4 5 6 99.55%，RSD 分 别 为 1.25%、1.37%、1.44%、0.67%、
2 3
4 000 混合对照品 2.28%、2.12%（n＝6），表明该方法准确度良好。
槐米生品
mAU 3 000 槐米炒轻炭样品
2 000
1 000 槐米炒适中炭样品 2.5.4 含量测定及差异分析
槐米炒重炭样品
0 取槐花、槐米生品及其不同炒制程度炭品粉末各 2
0 10 20 30 40 50
t/min 份，每份 0.5 g，精密称定，按“2.2”项下方法制备供试品
B.槐米各样品
1：芦丁；2：山柰酚-3-O-芸香糖苷；3：异鼠李素-3-O-芸香糖苷； 溶液，再按“2.3”项下色谱条件进样测定，然后根据标准
4：槲皮素；5：山柰酚；6：异鼠李素。 曲线计算各样品中6种成分的含量，结果见图3。
图2 槐花、槐米生品及其不同炒制程度炭品的 HPLC 由图 3 可知，芦丁、山柰酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李
共有模式指纹图谱
素-3-O-芸香糖苷在槐米炒轻炭样品中含量最高，槲皮
2.5 槐花、槐米生品及其不同炒制程度炭品的化学成分 素、异鼠李素在槐米炒适中炭样品中含量最高，山柰酚
含量比较 在槐米炒适中炭和炒重炭样品中含量较高。槐花生品

为进一步比较槐花、槐米生品及其不同炒制程度炭 中芦丁和山柰酚-3-O-芸香糖苷的含量与槐花炒轻炭样
品的化学成分差异，本研究拟对“2.4.4”项下指认的 6 种 品中的含量相近，且随着炒炭程度的加重，两者含量均
化学成分进行含量测定。 逐渐降低；异鼠李素-3-O-芸香糖苷在槐花生品及其炒轻
2.5.1 线性关系考察 炭、炒适中炭样品中的含量相近，在槐花炒重炭样品中
取“2.1”项下对照品储备液溶液制备系列浓度的对 的含量最低；槲皮素和异鼠李素的含量在槐花炒炭过程
照品溶液，按“2.3”项下色谱条件进样测定，以对照品溶 中变化不明显；山柰酚含量在炒炭过程中未见明显变化

中国药房 2024年第35卷第21期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 21 · 2625 ·