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小鼠卵巢组织中 HK、PK、LDH 活性均显著降低（P＜ 3.6 各组小鼠卵巢组织中凋亡和糖酵解相关基因表达
0.05）。结果见表4。 比较
表4 各组小鼠卵巢组织中 HK、PK、LDH 活性比较 与正常组比较，模型组小鼠卵巢组织中Bcl-2、HK2、
（x±s，n＝5，U/mg） PKM2、LDHA mRNA表达量均显著降低，Bax、caspase-3
组别 HK PK LDH mRNA 表达量及 Bax/Bcl-2 比值均显著升高（P＜0.05）；
正常组 220.24±73.35 288.38±26.52 3.64±0.34 与模型组比较，资癸益冲方组小鼠卵巢组织中 Bcl-2、
模型组 49.04±14.16 a 57.61±7.58 a 1.86±0.01 a HK2、PKM2、LDHA mRNA 表达量均显著升高，Bax、
资癸益冲方组 149.24±51.47 b 247.67±32.14 b 3.25±0.22 b caspase-3 mRNA 表达量及 Bax/Bcl-2 比值均显著降低
资癸益冲方+2-DG组 60.88±16.20 c 118.13±18.00 c 1.98±0.06 c
（P＜0.05）；与资癸益冲方组比较，资癸益冲方+2-DG 组
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与资癸益
小鼠卵巢组织中 Bcl-2、HK2、PKM2、LDHA mRNA 表达
冲方组比较，P＜0.05。
量均显著降低，Bax、caspase-3 mRNA表达量及Bax/Bcl-2
3.5 各组小鼠卵巢组织中凋亡和糖酵解相关蛋白表达
比值均显著升高（P＜0.05）。结果见表6。
比较
表6 各组小鼠卵巢组织中凋亡和糖酵解相关基因表达
与正常组比较，模型组小鼠卵巢组织中Bcl-2、HK2、
量比较（x±s，n＝5）
PKM2、LDHA蛋白表达量均显著降低，Bax、caspase-3蛋
组别 Bcl-2 Bax caspase-3 Bax/Bcl-2 HK2 PKM2 LDHA
白表达量及 Bax/Bcl-2 比值均显著升高（P＜0.05）；与模
正常组 1 1 1 1 1 1 1
型组比较，资癸益冲方组小鼠卵巢组织中 Bcl-2、HK2、 模型组 0.63±0.11 1.95±0.15 3.52±0.52 3.12±0.32 0.29±0.13 0.46±0.07 0.41±0.08 a
a
a
a
a
a
a
b
b
b
b
b
b
PKM2、LDHA蛋白表达量均显著升高，Bax、caspase-3蛋 资癸益冲方组 0.85±0.10 1.22±0.13 1.94±0.59 1.44±0.01 0.81±0.17 0.79±0.04 0.80±0.09 b
c
c
c
c
c
资癸益冲方+2-DG组 0.55±0.13 1.57±0.16 3.08±0.37 2.92±0.39 0.55±0.14 0.61±0.07 0.53±0.04 c
c
白表达量及 Bax/Bcl-2 比值均显著降低（P＜0.05）；与资
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与资癸益
癸益冲方组比较，资癸益冲方+2-DG组小鼠卵巢组织中
冲方组比较，P＜0.05。
Bcl-2、HK2、PKM2、LDHA 蛋白表达量均显著降低， 4 讨论
Bax、caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值均显著升高
POI 病因复杂，已知的发病因素包括遗传、医源性、
（P＜0.05）。结果见图3、表5。 [1]
免疫、代谢、环境等，确切的发病机制仍不明确 。目前，
临床针对POI尚无有效的治疗方法，尽管激素替代疗法
Bcl-2 26 kDa
可有效缓解 POI 患者低雌激素症状，但 POI 患者的卵巢
Bax 21 kDa
储备功能与自然受孕率仍然很低，且长期使用激素可能
caspase-3 32 kDa 引发不良反应，患者停药后病情易反复。因此，寻找有
效治疗POI的方法，恢复患者卵巢储备功能和生育能力
β-actin 42 kDa
是国内外研究的热点。
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
A.凋亡相关蛋白 卵巢颗粒细胞作为卵泡的重要组成部分，通过与卵
HK2 102 kDa 母细胞的紧密接触和缝隙连接为卵母细胞的发育和成
[10]
熟提供营养成分和交换信息 。卵巢颗粒细胞异常凋
PKM2 58 kDa
亡会加速卵泡闭锁，降低卵巢储备功能，从而诱导 POI
[2]
LDHA 37 kDa 的发生发展 。本研究结果显示，与正常组比较，模型组
小鼠卵巢组织中原始卵泡、生长卵泡和窦卵泡数量和卵
β-actin 42 kDa
巢颗粒细胞层数均显著减少，闭锁卵泡数量和卵巢颗粒
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
B.糖酵解相关蛋白 细胞凋亡数量均显著增多，血清中E2、AMH水平和卵巢
Ⅰ：正常组；Ⅱ：模型组；Ⅲ：资癸益冲方组；Ⅳ：资癸益冲方+2-DG 组织中 Bcl-2 蛋白及 mRNA 表达量均显著降低，血清中
组。 FSH 水平与卵巢组织中 Bax、caspase-3 蛋白及 mRNA 表
图3 各组小鼠卵巢组织中凋亡和糖酵解相关蛋白表达
达量及 Bax/Bcl-2 比值均显著升高。以上结果表明，环
的电泳图
磷酰胺可导致小鼠激素水平紊乱、卵巢颗粒细胞凋亡数
表5 各组小鼠卵巢组织中凋亡和糖酵解相关蛋白表达 量和闭锁卵泡数量增多，卵巢储备功能下降。
量比较（x±s，n＝5） 充足的能量供应在维持细胞功能与抵抗细胞异常
组别 Bcl-2 Bax caspase-3 Bax/Bcl-2 HK2 PKM2 LDHA 凋亡中具有十分重要的作用，卵巢颗粒细胞合成和分泌
正常组 1.32±0.17 0.74±0.07 0.48±0.11 0.49±0.09 1.13±0.12 1.56±0.38 0.87±0.07 雌激素等过程需要消耗大量能量 ，因此，维持高效的
[11]
a
a
模型组 0.63±0.10 0.98±0.06 0.93±0.19 2.10±0.38 0.72±0.10 0.38±0.15 0.66±0.07 a 能量代谢对维持卵巢颗粒细胞的正常功能尤为重要。
a
a
a
a
b
b
b
资癸益冲方组 0.89±0.07 0.79±0.09 0.56±0.15 0.84±0.08 0.97±0.08 1.03±0.08 0.81±0.04 b
b
b
b
c
资癸益冲方+2-DG组 0.67±0.08 0.95±0.05 0.91±0.12 1.37±0.24 0.76±0.06 0.58±0.14 0.69±0.04 c 在卵泡发育过程中，卵巢颗粒细胞由于血管供应少而处
c
c
c
c
c
a：与正常组比较，P＜0.05；b：与模型组比较，P＜0.05；c：与资癸益 于相对低氧的状态，这使得卵巢颗粒细胞更倾向于通过
[12]
冲方组比较，P＜0.05。 糖酵解来产生能量 。HK2、PKM2、LDHA是糖酵解过程
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