Page 55 - 《中国药房》2024年17期

术后肠麻痹（postoperative ileus，POI）是外科手术后 tor 4，TLR4）兔抗、核因子κB p65（nuclear factor κB p65，
胃肠道运动功能受到暂时性抑制的临床现象，其特征为 NF- κB p65）鼠 抗 、p38 丝 裂 原 活 化 蛋 白 激 酶（p38
胃肠蠕动功能受损，患者可表现为术后恶心、呕吐、腹痛 mitogen-activated protein kinase，p38 MAPK）兔抗、苏木
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及停止排气、排便等症状 。从病理生理学角度可以将 精染色液、DAB 显色试剂盒、HRP-Polymer 兔 IHC 试剂
POI 分为早期的神经源性阶段和后期的炎症阶段，神经 盒（ 批 号 分 别 为 AF11010、AF10761、AF300598、
源性阶段持续时间短，无明显症状；而炎症阶段持续时 AFIHC005、AFIHC004、AFIHC001）均购自湖南艾方生
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间长，使患者无法及时排气 。相关研究发现，POI后肠 物科技有限公司；4%多聚甲醛（批号BL539A）购自北京
道炎症反应还会引发肠道菌群失衡现象，进而影响生物 兰杰柯科技有限公司；其余试剂为实验室常用规格，水
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体胃肠道的消化、吸收和免疫功能 。因此，减轻炎症反 为超纯水。
应，对改善POI具有重要意义。 1.3 实验动物与饲料
术后通气方为南京中医药大学附属医院临床与药 本研究所用动物为 SPF 级雄性 C57BL/6 小鼠，8 周
学专家共同研制的特色方剂，由炒莱菔子、炒黄芥子、炒 龄，体重 20～23 g，购自河南斯克贝斯生物科技股份有
紫苏子、蒲公英、炒鸡内金、焦山楂、陈皮、甘草8味中药 限公司，动物生产许可证号为SCXK（豫）2020-0005。所
配伍而成，该方在补充肠内营养的同时，还能发挥降气 有动物均饲养于 12 h 光照/黑暗循环、相对湿度（55±
化痰、消导助运、促进术后胃肠功能恢复的作用。本课 5）%、温度（24±2） ℃的温控室内，自由进食饮水，适应
题组前期临床研究发现，该方对 POI 患者改善效果良 性喂养7 d后进行相关实验。所有动物实验均经南京中
好，但是其具体作用机制尚不明确。基于此，本研究从 医 药 大 学 附 属 医 院 伦 理 委 员 会 批 准（伦 理 批 号 为
炎症反应和肠道菌群角度出发，全面研究该方对POI小 2021DW-13-01），并按照相关动物实验规程进行操作。
鼠肠道损伤的改善作用及机制，以期为该方治疗POI提 2 方法
供实验依据。 2.1 分组、造模与给药
1 材料 将小鼠随机分为 4 组，即假手术组、模型组、阳性对
1.1 主要仪器 照组（枸橼酸莫沙必利片，1.95 mg/kg，剂量根据临床等
本研究所用主要仪器包括 JJ-12J 型脱水机、JB-P5 效剂量换算，临用时以水溶解）、术后通气方组（1.88
型包埋机（武汉俊杰电子有限公司），RM2016 型病理切 g/kg，剂量根据临床等效剂量换算，临用时以水溶解），每
片机（上海徕卡仪器有限公司），Pannoramic MIDI 型病 组6只。实验前12 h禁食、不禁水，手术前4 h禁水。采
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理扫描仪（匈牙利 3DHISTECH 公司），5804 R 型多功能 用经典小肠干扰术制备小鼠POI模型 ：首先，小鼠腹腔
冷冻离心机（德国 Eppendorf 公司），MK3 型全自动酶标 注射 1% 戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉后，以仰卧位固定
仪（美国 Thermo Fisher Scientific 公司），AE41 型光学显 于手术台上，腹部常规脱毛、消毒，铺上无菌纱布洞巾，
微镜[麦克奥迪（厦门）医疗诊断系统有限公司]等。 在腹部正中线作一长约2 cm的切口；使用已消毒的眼科
1.2 主要药品与试剂 镊取出小肠，将沾满生理盐水的湿棉签反复擦拭小肠 4
枸橼酸莫沙必利片（阳性对照，批号 220214，规格 5 min×3 次，直至小肠充血水肿，缓慢回纳小肠；采用 5-0
mg）购自福建海西新药创制股份有限公司；术后通气方 号可吸收缝合线缝合腹部肌层和皮层，再次消毒清洁腹
购自南京中医药大学附属医院，含炒莱菔子颗粒（批号 部伤口预防感染。假手术组小鼠开腹后不进行小肠干
20080401）、炒紫苏子颗粒（批号20050341）、炒黄芥子颗 扰，其余操作同上。将小鼠置于暖光下复苏并观察小鼠
粒（批号 20050381）、蒲公英颗粒（批号 20071131）、炒鸡 状态，当小鼠恢复活力且正常行走时，说明造模成功。
内 金 颗 粒（批 号 20101251）、焦 山 楂 颗 粒（批 号 假手术组与模型组小鼠灌胃纯净水，其余各组灌胃相应
19120211）、陈皮颗粒（批号 20021821）、甘草颗粒（批号 药液，每天1次，连续2 d。
19102131），临用时将各单味药颗粒混合，以热水溶解 2.2 样品收集和小肠炭末推进率检测
备用。 末次给药后24 h，用炭末复合物（含10%阿拉伯胶+
小鼠白细胞介素 6（interleukin-6，IL-6）、IL-10、肿瘤 10% 食用型活性炭末，10 mL/kg）灌胃，25 min 后各组小
坏死因子 α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、胃动素 鼠腹腔注射 1% 戊巴比妥钠（50 mg/kg）麻醉，于小鼠眼
（motilin，MTL）、生长抑素（somatostatin，SS）酶联免疫吸 球后静脉丛取血，常温下静置30 min后，于4 °C下以5 000
附测定（ELISA）试剂盒（批号分别为MM-0163M1、MM- r/min离心15 min，取上层血清，置于－80 °C保存。取血
0176M1、MM0132M1、MM-0492M1、MM-0493M1）均购 完成后，颈椎脱臼处死小鼠，取出全段小肠，测量小肠全
自江苏酶免实业有限公司；Toll样受体4（Toll-like recep‐ 长，同时测量幽门到炭末前沿的炭末推进长度，并计算

中国药房 2024年第35卷第17期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 17 · 2109 ·