Page 39 - 《中国药房》2024年17期
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lum)、拟杆菌属(Bacteroides)、颤螺菌属(Oscillospira)、
NLRP3 110 kDa
Turicibacter、阿克曼氏菌属(Akkermansia)丰度呈增加趋
p-NF-κB p65 65 kDa 势,乳酸杆菌属(Lactobacillus)丰度呈降低趋势;与模型
组比较,KSCF组小鼠肠道阿克曼氏菌属、乳酸杆菌属丰
NF-κB p65 65 kDa 度呈增加趋势,拟杆菌属、颤螺菌属丰度呈降低趋势。
4 讨论
β-actin 42 kDa
UC是一种以结肠持续性和弥漫性炎症为特征的疾
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
Ⅰ:正常组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:KSCF组。 病,其临床表现包括大便出血、腹泻及体重减轻 [9,14] 。本
图4 各组小鼠结肠组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65及 研究结果发现 KSCF 干预后可显著降低 UC 小鼠模型
NLRP3蛋白表达的电泳图 DAI 评分,增加结肠长度和杯状细胞数量,并改善隐窝
表3 各组小鼠结肠组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65及 结构,表明 KSCF 能有效缓解 UC 小鼠症状并抑制炎症
NLRP3蛋白表达水平检测结果(x±s,n=3) 细胞浸润。
组别 NF-κB p65/β-actin p-NF-κB p65/β-actin NLRP3/β-actin 通过网络药理学预测,KSCF 可能通过靶向作用于
正常组 0.69±0.06 0.61±0.01 0.72±0.07 PI3K/Akt和NF-κB p65信号通路发挥UC治疗作用。分
模型组 0.66±0.04 1.37±0.10 a 1.16±0.08 a
阳性对照组 0.67±0.05 0.89±0.02 b 0.61±0.08 b 子对接结果显示,KSCF与NF-κB p65蛋白结合能最低,
KSCF组 0.67±0.04 0.72±0.03 b 0.67±0.15 b 表明其可能通过直接抑制 NF-κB p65 磷酸化发挥抗炎
a:与正常组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 效果。本研究结果表明,KSCF可显著降低UC小鼠结肠
表4 各组小鼠脾脏中 T 淋巴细胞亚群比例检测结果 组织中NF-κB p65磷酸化水平和NLRP3蛋白表达水平,
(x±s,n=3) 进一步证实了其是通过抑制 NF-κB p65 信号通路来减
+
组别 CD3 T淋巴细胞比例/% CD4 T淋巴细胞比例/% CD8 T淋巴细胞比例/% CD4 /CD8 值 轻结肠炎症的。
+
+
+
+
正常组 71.63±0.06 78.13±0.21 6.64±0.53 11.81±0.95 已有研究发现,在结肠炎小鼠结肠黏膜中,NF-κB
模型组 43.97±0.91 a 68.03±2.33 a 9.58±0.79 a 7.13±0.58 a [15]
阳性对照组 58.13±0.49 b 75.47±2.54 b 8.88±0.45 8.51±0.29 b p65/NLRP3 信号通路被激活 ,进而促进中性粒细胞和
KSCF组 58.57±0.55 b 76.77±2.52 b 7.49±0.69 b 10.31±1.21 b 巨噬细胞释放炎症细胞因子 。肠道中激活的炎症细
[16]
a:与正常组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。 [9,14,17]
胞会产生活性氧,导致组织损伤和氧化应激 ,进一
杆菌门(Bacteroidetes)丰度呈降低趋势,变形菌门(Pro‐ 步导致肠道上皮细胞屏障通透性增加,促进LPS吸收入
[18]
teobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)丰度呈增加趋势; 血,引发炎症反应 。本研究结果显示,KSCF 可降低
与模型组比较,KSCF组小鼠肠道拟杆菌门、变形菌门丰 UC小鼠结肠组织中NO、MPO水平并提升SOD活性,表
度呈降低趋势,厚壁菌门、放线菌门丰度呈增加趋势。 明其可能通过调节氧化应激反应来保护结肠免受损伤。
肠道菌群在属水平的结构组成分析结果(图 6D)显示, 此外,KSCF对UC小鼠肠屏障功能相关蛋白occludin和
与正常组比较,模型组小鼠肠道异杆菌属(Allobacu‐ ZO-1表达的正面调节作用,以及其降低UC小鼠血清中
1.0M 10 6 1.0M 10 6
800K 10 5 800K 10 5
SSC-H 600K CD8PE-H 10 4 3 SSC-H 600K CD8PE-H 10 4 3
10
400K
400K
10
200K 10 2 200K 10 2
0 10 1 0 10 1
3
2
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5
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1
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0
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0
1
10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 6
CD3APC-H CD4FITC-H CD3APC-H CD4FITC-H
A.正常组 B.模型组
1.0M 10 6 1.0M 10 6
800K 10 5 800K 10 5
SSC-H 600K CD8PE-H 10 4 3 SSC-H 600K CD8PE-H 10 4 3
10
400K
400K
10
200K 10 2 200K 10 2
0 10 1 0 10 1
3
10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 10 6 10 10 10 10 10 10 6
5
4
2
1
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3
1
1
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2
2
0
CD3APC-H CD4FITC-H CD3APC-H CD4FITC-H
C.阳性对照组 D. KSCF组
图5 各组小鼠脾脏T淋巴细胞亚群比例检测的流式细胞图
中国药房 2024年第35卷第17期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 17 · 2093 ·