Page 39 - 《中国药房》2024年17期
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lum)、拟杆菌属(Bacteroides)、颤螺菌属(Oscillospira)、
                NLRP3                             110 kDa
                                                             Turicibacter、阿克曼氏菌属(Akkermansia)丰度呈增加趋

             p-NF-κB p65                          65 kDa     势,乳酸杆菌属(Lactobacillus)丰度呈降低趋势;与模型
                                                             组比较,KSCF组小鼠肠道阿克曼氏菌属、乳酸杆菌属丰
              NF-κB p65                           65 kDa     度呈增加趋势,拟杆菌属、颤螺菌属丰度呈降低趋势。
                                                             4 讨论
                 β-actin                          42 kDa
                                                                 UC是一种以结肠持续性和弥漫性炎症为特征的疾
                       Ⅰ       Ⅱ      Ⅲ       Ⅳ
             Ⅰ:正常组;Ⅱ:模型组;Ⅲ:阳性对照组;Ⅳ:KSCF组。                    病,其临床表现包括大便出血、腹泻及体重减轻                    [9,14] 。本
         图4 各组小鼠结肠组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65及                  研究结果发现 KSCF 干预后可显著降低 UC 小鼠模型
               NLRP3蛋白表达的电泳图                                 DAI 评分,增加结肠长度和杯状细胞数量,并改善隐窝
         表3 各组小鼠结肠组织中NF-κB p65、p-NF-κB p65及                  结构,表明 KSCF 能有效缓解 UC 小鼠症状并抑制炎症
               NLRP3蛋白表达水平检测结果(x±s,n=3)                      细胞浸润。
          组别           NF-κB p65/β-actin  p-NF-κB p65/β-actin  NLRP3/β-actin  通过网络药理学预测,KSCF 可能通过靶向作用于
          正常组           0.69±0.06    0.61±0.01   0.72±0.07   PI3K/Akt和NF-κB p65信号通路发挥UC治疗作用。分
          模型组           0.66±0.04    1.37±0.10 a  1.16±0.08 a
          阳性对照组         0.67±0.05    0.89±0.02 b  0.61±0.08 b  子对接结果显示,KSCF与NF-κB p65蛋白结合能最低,
          KSCF组         0.67±0.04    0.72±0.03 b  0.67±0.15 b  表明其可能通过直接抑制 NF-κB p65 磷酸化发挥抗炎
             a:与正常组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。                效果。本研究结果表明,KSCF可显著降低UC小鼠结肠
         表4 各组小鼠脾脏中 T 淋巴细胞亚群比例检测结果                           组织中NF-κB p65磷酸化水平和NLRP3蛋白表达水平,
              (x±s,n=3)                                      进一步证实了其是通过抑制 NF-κB p65 信号通路来减
                   +
          组别     CD3 T淋巴细胞比例/% CD4 T淋巴细胞比例/% CD8 T淋巴细胞比例/% CD4 /CD8 值  轻结肠炎症的。
                                                       +
                                         +
                                                     +
                              +
          正常组      71.63±0.06  78.13±0.21  6.64±0.53  11.81±0.95  已有研究发现,在结肠炎小鼠结肠黏膜中,NF-κB
          模型组      43.97±0.91 a  68.03±2.33 a  9.58±0.79 a  7.13±0.58 a              [15]
          阳性对照组    58.13±0.49 b  75.47±2.54 b  8.88±0.45  8.51±0.29 b  p65/NLRP3 信号通路被激活 ,进而促进中性粒细胞和
          KSCF组    58.57±0.55 b  76.77±2.52 b  7.49±0.69 b  10.31±1.21 b  巨噬细胞释放炎症细胞因子 。肠道中激活的炎症细
                                                                                      [16]
             a:与正常组比较,P<0.05;b:与模型组比较,P<0.05。                                                      [9,14,17]
                                                             胞会产生活性氧,导致组织损伤和氧化应激                        ,进一
          杆菌门(Bacteroidetes)丰度呈降低趋势,变形菌门(Pro‐                步导致肠道上皮细胞屏障通透性增加,促进LPS吸收入
                                                                             [18]
          teobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)丰度呈增加趋势;          血,引发炎症反应 。本研究结果显示,KSCF 可降低
          与模型组比较,KSCF组小鼠肠道拟杆菌门、变形菌门丰                         UC小鼠结肠组织中NO、MPO水平并提升SOD活性,表
          度呈降低趋势,厚壁菌门、放线菌门丰度呈增加趋势。                           明其可能通过调节氧化应激反应来保护结肠免受损伤。
          肠道菌群在属水平的结构组成分析结果(图 6D)显示,                         此外,KSCF对UC小鼠肠屏障功能相关蛋白occludin和
          与正常组比较,模型组小鼠肠道异杆菌属(Allobacu‐                       ZO-1表达的正面调节作用,以及其降低UC小鼠血清中

             1.0M                      10 6                    1.0M                      10 6
             800K                      10 5                    800K                      10 5
            SSC-H  600K               CD8PE-H  10 4 3         SSC-H  600K               CD8PE-H  10 4 3
                                       10
                                                               400K
             400K
                                                                                         10
             200K                      10 2                    200K                      10 2
               0                       10 1                      0                       10 1
                                                3
                                             2
                                                   4
                                                      5
                                                                                                    4
                                                                                                  3
                                                                           4
                                                                             5
                                                                                            1
                                                                                               2
                                                                   0
                                                                                                       5
                                                                     1
                                                                         3
                                                                       2
                                          1
                        3
                          4
                            5
                     2
                 0
                   1
                10   10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10 6
                    CD3APC-H                  CD4FITC-H               CD3APC-H                 CD4FITC-H
                                 A.正常组                                             B.模型组
             1.0M                      10 6                    1.0M                      10 6
             800K                      10 5                    800K                      10 5
            SSC-H  600K               CD8PE-H  10 4 3         SSC-H  600K               CD8PE-H  10 4 3
                                       10
                                                               400K
             400K
                                                                                         10
             200K                      10 2                    200K                      10 2
               0                       10 1                      0                       10 1
                                                                                                  3
                10   10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10   10 6  10   10   10   10   10   10 6
                                                                                                       5
                                                                           4
                                                                                               2
                                                                                            1
                                                                                                    4
                                                                             5
                                                                         3
                            5
                                                      5
                          4
                                                   4
                                          1
                                             2
                                                3
                        3
                                                                     1
                   1
                 0
                                                                       2
                     2
                                                                   0
                    CD3APC-H                  CD4FITC-H               CD3APC-H                 CD4FITC-H
                                C.阳性对照组                                           D. KSCF组
                                  图5 各组小鼠脾脏T淋巴细胞亚群比例检测的流式细胞图
          中国药房  2024年第35卷第17期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 17    · 2093 ·
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