Page 43 - 《中国药房》2024年17期
P. 43

with  CRS  group，  the  above  indexes  of  rats  were  reversed  significantly  in  CTS-L  group  and  CTS-H  group （P＜0.05）；  heart  and
          kidney  function  had  been  restored，  and  pathological  damage  and  fibrosis  had  been  reduced.  PI3K  activator  740Y-P  weakened  the
          protective effect of CTS on cardiac and renal function in CRS rats. CONCLUSIONS CTS can protect heart and kidney function in
          CRS rats， the mechanism of which may be associated with inhibiting the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway.
          KEYWORDS    cryptotanshinone； PI3K/Akt/mTOR signaling pathway； cardiorenal syndrome； heart and kidney function



              心肾综合征（cardiorenal syndrome，CRS）是由于心            BLL100639E、BLL101057E、BLL100620E）购自上海佰
          脏或肾脏任一脏器出现急性或慢性功能障碍而导致另                            利莱生物科技有限公司；24 h 尿蛋白测定试剂盒、苏木
          一脏器病情加重，二者关系密切且形成恶性循环，共同                           精-伊红（HE）染色试剂盒、Masson 染色试剂盒（批号分
          影响正常体液平衡，从而形成的一种综合征，以难以纠                           别为 BC5655、G1120、G1340）购自北京索莱宝科技有限
          正的心力衰竭或肾衰竭为主要症状               [1―2] 。研究发现，CRS      公司；兔源 PI3K、Akt、mTOR、磷酸化 PI3K（p-PI3K）、磷
          患者的血流动力学紊乱、尿毒症毒素累积会诱发心肾纤                           酸化 Akt（p-Akt）、磷酸化 mTOR（p-mTOR）、GAPDH 抗
          维化甚至心肾衰竭的发生，严重威胁患者的生命健康 。                          体和辣根过氧化物酶标记的山羊抗兔IgG二抗（批号分
                                                       [3]
          然而，目前临床尚无治疗 CRS 的特效药物或手段，患者                        别 为 ab180967、ab8805、ab32028、ab138364、ab38449、
          的发病率和病死率正逐年上升 。因此，改善 CRS 患者                        ab109268、ab9485、ab6721）购自艾博抗（上海）贸易有限
                                    [4]
          的心肾功能、抑制心肾纤维化是治疗CRS的重要策略。                          公司。
              隐丹参酮（cryptotanshinone，CTS）是源自中药丹参              1.3 实验动物
          根茎中的一种二萜醌类活性单体，具有抗炎、抗癌、抗氧                              本研究所用动物为 SPF 级健康成年 SD 雄性大鼠，
          化、抗菌、抗肥胖等多种药理作用             [5―6] 。研究发现，CTS具       共60只，6～8周龄，体重200～250 g，购自郑州大学实验
          有抗心脏、肾脏纤维化的作用，对一系列脏器损伤具有                           动物中心，动物生产许可证号为 SCXK（豫）2022-0001。
          修复作用 。丹参酮ⅡA与 CTS 活性相似，研究发现，丹                       本研究已获得本院医学伦理委员会批准（伦理批准号为
                  [7]
          参酮ⅡA对 CRS 的疗效显著，且能降低 CRS 患者血浆中                     2023〔091〕）。将大鼠适应性饲养 7 d，饲养环境为室温
                      [8]
          炎症因子水平 。故笔者推测CTS可能对CRS也具有改                         20～23 ℃、相对湿度50%～60%、人工循环照明12 h。
          善作用。磷脂酰肌醇 3 激酶（phosphoinositide 3-kinase，          2 方法
          PI3K）/蛋白激酶B（protein kinase B，Akt）/哺乳动物雷帕           2.1 CRS模型的建立
          霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）信             将60只大鼠使用戊巴比妥钠麻醉，气管插管并连接
          号通路与细胞生长、增殖、凋亡、周期分布等过程密切相                          小动物呼吸机和心电图仪；然后参考文献[11]方法沿胸
          关，其异常激活可影响心血管疾病的发生发展以及肾脏                           骨左沿行开胸手术，并沿第3、4肋间纵向切开，在左冠状
              [9]
          损伤 。研究发现，抑制 PI3K/Akt 信号通路可改善 CRS                   动脉前降支的起始部位，用6-0针线进行缝扎，当观察到
                                                 [10]
          模型动物的心肾纤维化情况，增强心肾功能 。基于                            结扎血管下左心室壁颜色变白且心电图显示ST段抬高
          此，本研究通过建立 CRS 模型大鼠，以 PI3K/Akt/mTOR                 超过0.1 mV时，进行下一步肾急性缺血再灌注损伤模型
          信号通路为切入点，研究CTS对模型大鼠心肾功能的保                          的构建；剖腹并暴露肾蒂，结扎一侧的肾血管，30 min后
          护作用及机制，以期为CRS的临床治疗提供参考。                            恢复，至此完成CRS模型的建立。当观察到肾脏在结扎
          1 材料                                               肾血管后变成暗红色，而恢复血流时变为红色时，表明
                                                                         [12]
          1.1 主要仪器                                           模型建立成功 。随机选取 12 只大鼠只进行麻醉和开
              本研究所用主要仪器包括 V-1000 型小动物呼吸机                     关胸、腹操作，不进行任何结扎处理，并设为正常对照组
         （上海玉研科学仪器有限公司），LB943 型酶标仪（北京                       （Normal 组）。所有大鼠术后使用青霉素进行抗感染
          联立信生物技术有限公司），CX41-32RFL型光学显微镜                      治疗。
         （日本 Olympus 公司），HistoCore 型组织切片机、Histo‐             2.2 分组与给药
          Core Arcadia型组织包埋机（德国Leica公司）等。                        本研究成功造模 48 只 CRS 大鼠，将其随机分为
          1.2 主要药品与试剂                                        CRS 模型组（CRS 组）、低剂量 CTS 干预组（CTS-L 组）、
              CTS 对照品（纯度≥98%，批号 2203045）购自南京                 高剂量 CTS 干预组（CTS-H 组）和高剂量 CTS+PI3K 激
          道斯夫生物科技公司；PI3K 激活剂 740Y-P 对照品（纯                    活剂 740Y-P 组（CTS-H+740Y-P 组），每组 12 只。CTS-L
          度≥99%，批号HY-P0175）购自美国MedChemExpress公               组、CTS-H组大鼠分别灌胃30、60 mg/kg CTS（以生理盐
          司；血尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、血肌酐（serum          水为溶剂，剂量参考文献[13]确定），并腹腔注射等体积
          creatinine，Scr）、脑钠肽（brain natriuretic peptide，BNP）  生理盐水，每天1次，连续14 d；CTS-H+740Y-P组除灌胃
          酶 联 免 疫 吸 附 测 定（ELISA）试 剂 盒（批 号 分 别 为              60 mg/kg CTS 外，还需腹腔注射 10 mg/kg 740Y-P（以生


          中国药房  2024年第35卷第17期                                              China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 17    · 2097 ·
   38   39   40   41   42   43   44   45   46   47   48