Page 40 - 《中国药房》2024年14期

4 讨论
NASH 的发病机制复杂，涉及多种途径驱动的炎
症、肝细胞损伤和纤维化等生物学过程，其病理表现包
括肝细胞脂肪变性、肝细胞气球样变、炎症和纤维化、肝
[1]
硬化 。据统计，NASH的患病率不断升高，且约20%的
[15]
NASH 患者将发展为肝硬化，严重影响其生活质量 。
A. 对照组 B. OA组 然而，目前尚无治疗 NASH 的特效药物获批上市，现有
药物的疗效欠佳且副作用较多 [3，15] ，故迫切需要寻找新
的有效、安全的治疗药物。
Sin作为我国传统中药的活性成分，具有抗肿瘤、抗
氧化、抗炎、抗菌等多种药理活性 ，临床应用前景广
[16]
阔。本研究结果显示，经 Sin 干预后，NASH 小鼠体内
TG、TC、AST、ALT的释放均受到明显抑制，且肝脏指数
C. Sin 50 μmol/L组 D. OA+Sin 50 μmol/L组 明显改善；进一步的 HE、Masson 和油红 O 染色结果显
示，Sin能减轻NASH小鼠肝组织的脂肪变性、纤维化和
脂滴蓄积；细胞水平的油红O染色结果也显示，Sin可抑
制OA诱导的HepG2细胞的脂滴蓄积，提示Sin对NASH
具有一定的改善作用，具有潜在的开发价值。
炎症反应是 NASH 发生发展过程中的重要环节。
促炎细胞因子能够激活肝星状细胞，进而促进胶原蛋白
[17]
沉积，最终促使纤维形成 。肝纤维化是 NASH 患者的
E. Sin 100 μmol/L组 F. OA+Sin 100 μmol/L组
橙色箭头：脂滴。 主要组织病理学特征之一，代表NASH患者存在严重的
图6 各组细胞中脂滴蓄积的显微图（油红O染色） 进行性肝损伤 。本研究结果表明，Sin 可降低 HFD 诱
[18]
导的 NASH 小鼠体内炎症因子 IL-18、IL-1β 的含量，减
（P＞0.05），而 OA 组细胞中 AMPK、YAP 蛋白的磷酸化
少炎症蛋白cleaved-IL-1β蛋白的表达，并减少肝组织中
水平均显著降低（P＜0.01）。与 OA 组比较，OA+Sin 50
纤维化相关蛋白（Col-Ⅰ、α-SMA、CTGF）的表达。上述
μmol/L 组和 OA+Sin 100 μmol/L 组细胞中 AMPK、YAP
结果提示，Sin可能通过抑制炎症反应、减少肝脏纤维化
蛋白的磷酸化水平均显著升高（P＜0.05）。结果见表
来改善NASH。
7、图7。
文献报道，Sin 可激活 AMPK 信号通路以缓解炎症
表7 各组细胞中 AMPK/YAP 信号通路相关蛋白表达 反应 。AMPK 在调节真核生物的细胞能量平衡中发
[11]
情况的检测结果（x±s，n＝3） [5]
挥着至关重要的作用 。激活AMPK信号通路能有效减
组别 p-AMPK/AMPK p-YAP/YAP 少脂质沉积和促炎细胞因子的产生，最终抑制脂肪肝的
对照组 1.00±0.04 1.00±0.04 [6]
OA组 0.12±0.03 a 0.51±0.17 a 发展 。此外，在肝脏中特异性敲除 AMPK 编码基因可
[19]
Sin 50 μmol/L组 1.03±0.04 1.03±0.03 加重 HFD 诱导的 NASH 小鼠的肝脏病变 。这些研究
OA+Sin 50 μmol/L组 0.31±0.04 b 0.78±0.03 b 证据充分表明，AMPK信号通路的激活可能是NASH的
Sin 100 μmol/L组 1.01±0.06 1.02±0.05 潜在治疗靶点。为了深入研究Sin是否通过激活AMPK
OA+Sin 100 μmol/L组 0.79±0.05 b 0.91±0.05 b
信号通路抑制炎症反应以改善NASH，本研究利用Wes-
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与OA组比较，P＜0.05。
tern blot技术进行检测，结果显示，与SCD组小鼠和对照
p-YAP 75 kDa
组HepG2细胞比较，HFD组小鼠肝组织和OA组HepG2
YAP 72 kDa 细胞中AMPK蛋白的磷酸化水平均显著降低，而不同剂
量/浓度的 Sin 可不同程度地升高小鼠肝组织和 HepG2
p-AMPK 62 kDa
细胞中AMPK蛋白的磷酸化水平，进而激活AMPK信号
AMPK 62 kDa 通路。YAP 蛋白是 Hippo 通路的效应因子，可参与调节
[20]
器官大小和组织稳态等 。正常情况下，YAP蛋白被隔
β-actin 43 kDa
离在细胞质中，无法转入细胞核内；一旦Hippo途径受到
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ
Ⅰ：对照组；Ⅱ：OA组；Ⅲ：Sin 50 μmol/L组；Ⅳ：OA+Sin 50 μmol/L 抑制，YAP 蛋白就会移位至细胞核中，促进一系列生化
[21]
组；Ⅴ：Sin 100 μmol/L组；Ⅵ：OA+Sin 100 μmol/L组。 反应的发生 。研究指出，YAP 蛋白发生磷酸化后，其
图7 各组细胞中 AMPK/YAP 信号通路相关蛋白表达 可滞留于细胞质内，从而该蛋白的生物学功能将受到抑
[8]
的电泳图 制 ；此外，YAP 蛋白的磷酸化还可有助于缓解炎症反

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