Page 39 - 《中国药房》2024年14期

表5 各组小鼠肝组织中纤维化及 AMPK/YAP 信号通
路相关蛋白表达的检测结果（x±s，n＝6）
组别 Col-Ⅰ/GAPDH α-SMA/GAPDH CTGF/GAPDH p-AMPK/AMPK p-YAP/YAP
SCD组 1.00±0.09 1.00±0.21 1.00±0.15 1.00±0.07 1.00±0.06
HFD组 3.50±0.38 a 2.86±0.24 a 5.86±0.33 a 0.30±0.07 a 0.25±0.09 a
Sin-L组 3.07±0.14 b 2.21±0.36 b 3.12±0.21 b 0.58±0.11 b 0.61±0.14 b
Sin-H组 2.27±0.19 b 1.11±0.23 b 1.80±0.13 b 0.82±0.12 b 0.81±0.04 b
A. SCD组 B. HFD组
a：与SCD组比较，P＜0.01；b：与HFD组比较，P＜0.01。
Col-Ⅰ 140 kDa
42 kDa
α-SMA 40 kDa
CTGF 38 kDa
GAPDH 36 kDa

C. Sin-L组 D. Sin-H组 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ Ⅷ
黑色箭头：脂滴。 A.纤维化相关蛋白
图3 各组小鼠肝脏脂滴定位的显微图（油红O染色） p-YAP 77 kDa
75 kDa
3.1.4 Sin对NASH小鼠肝组织中炎症相关因子mRNA YAP 74 kDa
72 kDa
及蛋白表达的影响
p-AMPK 62 kDa
61 kDa
与SCD组比较，HFD组小鼠肝组织中IL-1β蛋白的
表达水平显著降低，cleaved-IL-1β蛋白的表达水平显著 AMPK 62 kDa
升高（P＜0.01）；与 HFD 组比较，Sin 各剂量组小鼠肝组 GAPDH 36 kDa
织中IL-1β、IL-18 mRNA和cleaved-IL-1β蛋白的表达水 Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ Ⅷ
平均显著降低，IL-1β 蛋白的表达水平均显著升高（P＜ B. AMPK/YAP信号通路相关蛋白
Ⅰ、Ⅱ：SCD组；Ⅲ、Ⅳ：HFD组；Ⅴ、Ⅵ：Sin-L组；Ⅶ、Ⅷ：Sin-H组。
0.01）。结果见表4、图4。
图5 各组小鼠肝组织中纤维化和 AMPK/YAP 信号通
表4 各组小鼠肝组织中炎症相关因子 mRNA 及蛋白 路相关蛋白表达的电泳图
表达的检测结果（x±s，n＝6）
3.2 细胞实验结果
qPCR实验 Western blot实验
组别
IL-1β IL-18 IL-1β/GAPDH cleaved-IL-1β/GAPDH 3.2.1 Sin干预浓度筛选结果
SCD组 1.00±0.08 1.00±0.07 与 Sin 0 μmol/L 组比较，Sin 50、100 μmol/L 组细胞
HFD组 1.02±0.05 0.99±0.09 0.62±0.09 a 2.56±0.29 a 的存活率差异均无统计学意义（P＞0.05），而 Sin 150、
Sin-L组 0.67±0.04 b 0.64±0.05 b 0.71±0.05 b 2.07±0.21 b
Sin-H组 0.50±0.02 b 0.44±0.05 b 0.87±0.07 b 1.23±0.08 b 200 μmol/L 组细胞的存活率均显著降低（P＜0.05）。结
[14]
a：与SCD组比较，P＜0.01；b：与HFD组比较，P＜0.01。 果见表 6。结合该结果和既往研究结果 ，本研究选择
50、100 μmol/L作为后续细胞实验Sin的干预浓度。
IL-1β 31 kDa
表6 不同浓度Sin对HepG2细胞存活率的影响（x±s，
cleaved-IL-1β 17 kDa
n＝3）
GAPDH 36 kDa 组别 细胞存活率/% 组别 细胞存活率/%
Sin 0 μmol/L组 100.00±3.66 Sin 150 μmol/L组 85.51±4.15 a
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ Ⅵ Ⅶ Ⅷ
Sin 50 μmol/L组 100.31±2.91 Sin 200 μmol/L组 78.74±2.68 a
Ⅰ、Ⅱ：SCD组；Ⅲ、Ⅳ：HFD组；Ⅴ、Ⅵ：Sin-L组；Ⅶ、Ⅷ：Sin-H组。
Sin 100 μmol/L组 100.87±5.29
图4 各组小鼠肝组织中炎症相关蛋白表达的电泳图
a：与Sin 0 μmol/L组比较，P＜0.05。
3.1.5 Sin对NASH小鼠肝组织中纤维化及AMPK/YAP 3.2.2 Sin对OA诱导的HepG2细胞中脂滴蓄积的影响
信号通路相关蛋白表达的影响 与对照组比较，Sin 50、100 μmol/L组细胞未见明显
与 SCD 组 比 较 ，HFD 组 小 鼠 肝 组 织 中 Col- Ⅰ 、 异常，而 OA 组细胞中脂滴蓄积明显；与 OA 组比较，
α-SMA、CTGF 蛋白的表达水平均显著升高，而 AMPK、 OA+Sin 50 μmol/L组和OA+Sin 100 μmol/L组细胞中脂
YAP 蛋白的磷酸化水平均显著降低（P＜0.01）；与 HFD 滴蓄积均有所减少。结果见图6。
组比较，Sin 各剂量组小鼠肝组织中 Col-Ⅰ、α-SMA、 3.2.3 Sin对OA诱导的HepG2细胞中AMPK/YAP信号
CTGF蛋白的表达水平均显著降低，而AMPK、YAP蛋白 通路相关蛋白表达的影响
的磷酸化水平均显著升高（P＜0.01）。结果见表 5、 与 对 照 组 比 较 ，Sin 50、100 μmol/L 组 细 胞 中
图5。 AMPK、YAP 蛋白的磷酸化水平差异均无统计学意义

中国药房 2024年第35卷第14期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 14 · 1705 ·