Page 38 - 《中国药房》2024年14期
P. 38

2.2.3 细胞脂滴蓄积情况观察                                    表3 各组小鼠TG、TC、肝功能指标和炎症因子的检测
              将细胞分为对照组、OA 组、Sin 50 μmol/L 组、Sin                    结果（x±s，n＝6）
          100  μmol/L 组 、OA+Sin  50  μmol/L 组 和 OA+Sin  100   组别   TG/（mmol/L） TC/（mmol/L）  AST/（U/L）  ALT/（U/L） IL-1β/（pg/mL） IL-18/（pg/mL）
          μmol/L 组（Sin 浓度参考“2.2.2”项下结果设置），每组设                 SCD组  27.59±2.49  3.26±0.64  67.45±4.96  34.26±2.14  73.89±2.54  41.20±1.17
                                                              HFD组  99.39±3.06 a  19.50±3.54 a  188.23±3.75 a  116.35±7.03 a  97.35±2.94 a  89.43±2.89 a
          置 3 个复孔。OA 组细胞以 0.5 mmol/L 的 OA 诱导 12 h             Sin-L组 70.08±4.01 b  9.65±0.98 b  140.92±6.01 b  95.82±5.76 b  89.57±1.38 b  73.24±2.07 b
          以模拟肝脂质沉积；Sin 50、100 μmol/L 组细胞分别用                   Sin-H组 52.95±2.70 b  7.90±0.91 b  101.55±4.16 b  68.13±7.63 b  78.24±1.79 b  58.12±2.24 b
          50、100 μmol/L 的 Sin 干预 24 h；OA+Sin 50、100 μmol/L       a：与SCD组比较，P＜0.01；b：与HFD组比较，P＜0.01。
          组细胞先以 0.5 mmol/L 的 OA 诱导 12 h，再分别用 50、
          100 μmol/L 的 Sin 干预 24 h。随后，按相应试剂盒说明
          书进行油红O染色，并置于显微镜下观察各组细胞内的
          脂滴蓄积情况。
          2.2.4 细胞中通路相关蛋白表达检测
              将细胞按“2.2.3”项下方法分组、处理后，以 β-actin
          为内参，按“2.1.7”项下方法检测并计算细胞中 AMPK、                              A. SCD组                  B. HFD组
          YAP蛋白的磷酸化水平，结果以对照组为参照进行归一
          化处理。
          2.3 统计学方法
              采用 GraphPad Prism 7.01 软件对数据进行统计分
          析。计量资料数据以x±s表示，多组间比较采用单因素
          方差分析，进一步两两比较采用 LSD-t 检验。检验水准                                C. Sin-L组               D. Sin-H组
          α＝0.05。                                                黑色箭头：脂肪变性。
          3 结果                                                 图1 各组小鼠肝细胞脂肪变性的显微图（HE染色）
          3.1 动物实验结果
                                                                  Masson染色结果显示，与SCD组比较，HFD组小鼠
          3.1.1 Sin 对 NASH 小鼠体重、肝脏质量、肝脏指数的
                                                              肝脏的胶原纤维明显增多；与HFD组比较，Sin各剂量组
          影响
                                                              小鼠肝脏的胶原纤维均有不同程度减少，且 Sin-H 组减
              与 SCD 组比较，HFD 组小鼠的体重、肝脏质量和肝
                                                              少更明显。结果见图2。
          脏指数均显著升高（P＜0.01）；与 HFD 组比较，Sin 各剂
          量组小鼠的体重、肝脏质量和肝脏指数（Sin-L 组除外）
          均显著降低（P＜0.01）。结果见表2。
          表2 各组小鼠体重、肝脏质量和肝脏指数的检测结果
               （x±s，n＝6）
           组别         体重/g          肝脏质量/g       肝脏指数/%
           SCD组      32.16±1.73     1.19±0.06    3.71±0.14
           HFD组      50.98±2.76 a   2.53±0.09 a  4.97±0.28 a          A. SCD组                  B. HFD组
           Sin-L组    40.33±2.51 b   2.06±0.15 b  4.80±0.27
           Sin-H组    38.25±1.12 b   1.85±0.09 b  4.27±0.26 b
             a：与SCD组比较，P＜0.01；b：与HFD组比较，P＜0.01。
          3.1.2 Sin 对 NASH 小鼠 TG、TC、肝功能指标和炎症因
          子的影响
              与 SCD 组比较，HFD 组小鼠肝组织中 TG、TC 含量
          和血清中 AST、ALT、IL-1β、IL-18 含量均显著升高（P＜                         C. Sin-L组               D. Sin-H组
                                                                 黑色箭头：胶原纤维。
          0.01）；与 HFD 组比较，Sin 各剂量组小鼠上述指标含量
                                                                图2 各组小鼠肝纤维化的显微图（Masson染色）
          均显著降低（P＜0.01）。结果见表3。
          3.1.3 Sin对NASH小鼠肝组织病理特征的影响                              油红 O 染色结果显示，与 SCD 组比较，HFD 组小鼠
              HE染色结果显示，与SCD组比较，HFD组小鼠肝细                       的脂滴沿肝窦周围弥漫散开，并呈明显的颗粒状；与
          胞出现了明显的脂肪变性，可见明显的脂肪空泡，整体                            HFD 组比较，Sin 各剂量组小鼠肝窦周围的脂滴聚集均
          病变较为严重；与HFD组比较，Sin各剂量组小鼠肝细胞                         不同程度被抑制，脂滴均不同程度缩小，其中Sin-H组抑
          脂肪变性得到明显改善。结果见图1。                                   制效果更明显。结果见图3。


          · 1704 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 14                            中国药房  2024年第35卷第14期
   33   34   35   36   37   38   39   40   41   42   43