Page 32 - 《中国药房》2024年11期
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鉴于此，本研究对桑黄蜜炙工艺进行优化。桑黄中的有                            品适量，置于 50 mL 容量瓶内，加无水乙醇定容，摇匀，
          效成分麦角甾醇、原儿茶醛、原儿茶酸均具有一定程度                            即得质量浓度为 24.0 μg/mL 的麦角甾醇对照品溶液。
          的抗肿瘤作用       [7―8] ，与桑黄本身的药理作用一致；此外，               （2）原儿茶醛、原儿茶酸对照品溶液：精密称取原儿茶
          外观性状是把控桑黄蜜炙品炮制火候的重要因素，对鉴                            醛、原儿茶酸对照品各适量，置于不同50 mL容量瓶内，
          别中药饮片的优劣起到一定的作用。基于此，本研究采                            加 50% 甲醇定容，摇匀，即得质量浓度分别为 24.9、25.0
          用高效液相色谱（HPLC）法测定桑黄中麦角甾醇、原儿                          μg/mL的原儿茶醛、原儿茶酸单一对照品溶液。
          茶醛、原儿茶酸的含量，同时以上述3个指标成分的含量                           2.2.2 供试品溶液的制备
          及外观性状评分为评价指标，采用正交实验设计结合层                               （1）供试品溶液①（用于桑黄蜜炙品中麦角甾醇含
          次分析法对桑黄蜜炙工艺进行优化，为后期桑黄蜜炙品                            量测定）：精密称取桑黄蜜炙品粉末（过三号筛，下同）
          的规范化生产提供科学依据。                                       0.5 g，加入甲醇25 mL，称定质量，加热回流提取30 min，
          1 材料                                                取出，放冷，用甲醇补足损失的质量，摇匀，滤过，取续滤
          1.1 主要仪器                                            液，经 0.22 μm 微孔滤膜滤过，即得。（2）供试品溶液②
              本研究所用的主要仪器有：e2695型HPLC仪（美国                     （用于桑黄蜜炙品中原儿茶醛、原儿茶酸含量测定）：精
          Waters公司）、CR8型便携式色差仪（深圳市三恩时科技                       密称取桑黄蜜炙品粉末 1.0 g，加入 60% 乙醇 25 mL，称
          有限公司）、HZ-A6002 型电子天平（瑞安市金讯贸易有                       定质量，于50 ℃下超声30 min，取出，放冷，用60%乙醇
          限公司）、FA1004B型电子天平（上海精密科学仪器有限                        补足损失的质量，以 4 000 r/min 离心 5 min，取上清液，
                                                                                        [9]
          公司）、KQ-250E型医用超声波清洗器（江苏昆山市超声                        经0.22 μm微孔滤膜滤过，即得 。
          仪器有限公司）、XMTD-8222 型电热恒温鼓风干燥箱                        2.2.3 阴性对照溶液的制备
         （上海精宏实验设备有限公司）、DFT-200 型高速万能粉                            分别以甲醇、60%乙醇作为阴性对照溶液。
          碎机（温岭市林大机械有限公司）等。                                   2.2.4 色谱条件与系统适用性试验
          1.2 主要药品与试剂                                            （1）麦角甾醇检测的色谱条件：色谱柱为 Diamonsil
              桑黄药材（批号 20230601）购自云南省西双版纳傣                     Plus C18-A 柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；流动相为甲醇-
          族自治州，经辽宁中医药大学药学院张慧教授鉴定为多                            水（100∶0，V/V），等度洗脱；流速为 1.0 mL/min；柱温为
          孔菌科植物针层孔菌 P.igniarius（L.ex Fr.）Quel. 的子实            30 ℃；检测波长为 281 nm；进样量为 10 μL。（2）原儿茶
          体。麦角甾醇、原儿茶醛、原儿茶酸对照品（批号分别为                           醛、原儿茶酸检测的色谱条件：色谱柱为 Diamonsil Plus
          S0920CS、J1025AS、J1001AS，纯度均大于 98％）均购自               C18-A 柱（250  mm×4.6  mm，5  μm）；流 动 相 为 乙 腈
          大连美仑生物技术有限公司；蜂蜜（批号20230511）购自                      （A）-0.3% 乙酸溶液（B），梯度洗脱（0～5 min，2.5%A→
          北京百花蜂业科技发展有限公司；甲醇、乙腈、乙酸为色                           10%A；5～9  min，10%A→15%A；9～10  min，15%A→
          谱纯，其余试剂均为分析纯，水为超纯水。                                 16%A；10～12 min，16%A→18%A；12～17 min，18%A→
          2 方法与结果                                             19%A；17～20 min，19%A→100%A）；流速为0.8 mL/min；
          2.1 样品制备                                            柱温为 30 ℃；检测波长分别为 280 nm（原儿茶醛）、256
          2.1.1 桑黄生品                                          nm（原儿茶酸）；进样量为20 μL。
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              将桑黄药材除去杂质，加水润软，切制成1 cm 方块                           取“2.2.1”“2.2.2”“2.2.3”项下各溶液，按此色谱条件
          状，置于50 ℃烘箱内烘干，备用。                                   进样测定，色谱图见图1。结果显示，各供试品溶液在对
          2.1.2 炼蜜                                            照品溶液相应保留时间处有对应色谱峰出现，各成分色
              取蜂蜜适量，用电磁炉在功率 1 000 W 下炼制 10                    谱峰与相邻色谱峰间的分离度均大于 1.5，理论板数均
          min 至沸腾，随后下调功率至 500 W 继续炼制 5 min，可                  大于5 000，且阴性对照对测定无干扰。
          见其色泽较黄、手捻有黏性、两指间无白丝，然后停止加                           2.2.5 线性关系考察
          热，除去杂质，即得炼蜜。                                            将“2.2.1”项下各对照品溶液，按照逐级稀释的方法
          2.1.3 桑黄蜜炙品                                         稀释成不同质量浓度的对照品线性溶液，按“2.2.4”项下
              取炼蜜适量，按照不同蜜水比稀释。取桑黄生品                           色谱条件进样测定。以进样量为横坐标（X）、峰面积为
          20 g，加入一定量稀释好的炼蜜，拌匀，闷润至透心，置于                        纵坐标（Y）绘制标准曲线，得到麦角甾醇、原儿茶醛、原
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          炒制容器内于一定温度下翻炒一定时间，取出，置于                             儿茶酸的标准曲线方程分别为Y＝2×10 X－676.07（r＝
          50 ℃烘箱内烘干2 h，取出，晾凉，即得桑黄蜜炙品。                         0.999  8）、Y＝7×10 X+3  418.9（r＝0.999  8）、Y＝2×
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          2.2 指标成分含量测定方法的建立                                   10 X－4 378（r＝0.999 7），线性范围分别为 0.24～2.40、
          2.2.1 对照品溶液的制备                                      0.49～4.90、0.50～5.00 μg。结果表明，麦角甾醇、原儿
             （1）麦角甾醇对照品溶液：精密称取麦角甾醇对照                          茶醛、原儿茶酸在上述进样量范围内线性关系良好。


          · 1310 ·    China Pharmacy  2024 Vol. 35  No. 11                            中国药房  2024年第35卷第11期
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