Page 60 - 《中国药房》2024年10期

significantly （P＜0.05）. OA of high concentration could inhibit NF-κB p65 protein nuclear translocation and promote Nrf2 protein
nuclear translocation. CONCLUSIONS OA can suppress LPS-induced inflammation in RAW264.7 macrophages. The underlying
molecular mechanism likely entails the inhibition of the NF-κB signaling pathway， the activation of the Nrf2 signaling pathway and
the reduction of ROS and inflammatory factor release.
KEYWORDS oblongifolins A； inflammation； NF-κB signaling pathway； Nrf2 signaling pathway

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炎症是机体对损伤刺激的防御反应 。脂多糖 对照药，批号 2209205，规格 1 mL∶5 mg）购自国药集团
（lipopolysaccharide，LPS）是革兰氏阴性菌细胞壁外壁的 容生制药有限公司；LPS（批号L2880）购自美国Sigma公
主要成分，可刺激巨噬细胞引发炎症反应，导致许多促 司；TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-4、IL-10 酶联免疫吸附试验
炎因子，如一氧化氮（nitric oxide，NO）、肿瘤坏死因子 α （ELISA）试剂盒（批号分别为 G202412M、G203049M、
（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素6（interleu‐ G203063M、G203051M、G203075M）均购自泉州市睿信
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kin-6，IL-6）、IL-1β大量产生 。促炎因子过度和持续地 生物科技有限公司；NO 试剂盒（批号 20220628）购自南
释放可导致严重的组织损伤和病理变化，致使炎症出现 京建成生物工程研究所；活性氧（reactive oxygen spe‐
进展和恶化。因此，靶向失调的炎症过程和调节炎症因 cies，ROS）试剂盒（批号 S0033）购自上海碧云天生物技
子成为了控制炎症性疾病的有效治疗手段。目前，非甾 术股份有限公司；山羊抗兔 IgG（H+L）荧光二抗（批号
体类抗炎药在炎症性疾病的治疗中应用最广泛，但长期 WA320972）购自美国Thermo Fisher Scientific公司；兔源
大量使用此类药物会对胃肠道、肝脏、神经系统、心血管 β-肌动蛋白（β-actin）、核因子 κB p65（nuclear factor κB
系统等造成损害 [3―4] 。因此，从天然药物中寻找安全有 p65，NF-κB p65）、核因子κB抑制蛋白α（inhibitor of NF-
效的抗炎药物具有重要意义。 κBα，IκBα）、Kelch 样环氧氯丙烷相关蛋白 1（Kelch-like
岭南山竹子 Garcinia oblongifolia Champ. ex Benth. ECH-associated protein 1，Keap1）、醌 NADH 脱 氢 酶 1
为藤黄科藤黄属植物，主要分布在广东、广西、海南等 [NAD（P）H quinone oxidoreductase 1，NQO1]、血红素加
地，其果实、树皮、树叶均可作为药材，具有消炎止痛、收 氧酶 1（heme oxygenase-1，HO-1）、核转录因子红系 2 相
敛生肌的作用，常外用于治疗烧烫伤、下肢溃烂、湿疹 关因子2（nuclear factor-erythroid 2-related factor 2，Nrf2）
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等 。已有研究表明，岭南山竹子中可分离出多种化合 抗体和 CoraLite 594 山羊抗兔二抗（批号分别为 20536-
物，包括苯甲酮类、呫吨酮类、甾体类及萜类等 。苯甲 1-AP、10745-1-AP、10268-1-AP、10503-2-AP、11451-1-
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酮类化合物是岭南山竹子的主要成分，也是藤黄属植物 AP、10701-1-AP、16396-1-AP、SA00013-4）均购自武汉三
的特征性化合物，大多数该类化合物具有良好的抗炎活 鹰生物技术有限公司；兔源磷酸化 NF-κB p65（phos‐
性 。oblongifolins A（OA）是从岭南山竹子中提取分离 phorylated NF-κB p65，p-NF-κB p65）、p-IκBα抗体（批号
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得到的多异戊烯基取代的苯甲酮类化合物，本课题组前 分别为 TP56371、TP56280）均购自艾比玛特医药科技
®
期研究发现，OA 具有良好的抗炎活性。为进一步研究 （上海）有限公司；YF 488 山羊抗兔二抗（批号 Y6105L）
OA的抗炎作用机制，本研究拟利用LPS诱导RAW264.7 购自上海百赛生物技术股份有限公司；胎牛血清（批号
巨噬细胞构建体外炎症细胞模型，分别从基因水平、细 A11HOOK）购自美国 Gemini 公司；高糖 DMEM 培养基
胞因子水平和蛋白水平方面探讨OA的体外抗炎作用和 （批号 8122356）购自美国 Gibco 公司；MTT 试剂（批号
机制，旨在为OA治疗相关炎症性疾病提供参考。 M8180）购自北京索莱宝科技有限公司；总 RNA 提取试
1 材料 剂盒（批号 17921KD1）购自美国 Axygen 公司；Perfect
®
1.1 主要仪器 Real Time试剂盒、TB Green premix Ex Taq™ Ⅱ（批号分
本研究所用主要仪器包括XS205DU型电子分析天 别为 RR047A、RR420A）均购自宝生物工程（大连）有限
平（美国 Mettler Toledo 公司）、f5810R 型高速冷冻离心 公司。
机（美国Eppendorf公司）、3111型CO2恒温培养箱（美国 1.3 细胞株
Thermo Fisher Scientific公司）、Odyssey型双色红外激光 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7购自中国
成像仪（美国 LI-COR 公司）、CFX96 型实时荧光定量聚 科学院上海生科院细胞资源中心。
合酶链式反应（PCR）仪（美国 Bio-Rad 公司）、Syner‐ 2 方法
®
TM
gy H1 型全功能酶标仪（美国 Bio-Tek 公司）、Accuri 2.1 细胞培养
C6 Plus 型流式细胞分析仪（美国 BD 公司）、DMi8 型倒 将 RAW264.7 细胞接种于含有 10% 胎牛血清、青霉
置荧光显微镜（德国Leica公司）等。 素（100 U/mL）和链霉素（100 μg/mL）的 DMEM 培养基
1.2 主要药品与试剂 的培养瓶中，置于 37 ℃、5%CO2的恒温培养箱中培养，
OA（纯度＞98%）由本课题组从岭南山竹子果皮中 待细胞长至培养瓶底面70%～80%时进行传代，然后进
提取、分离并纯化；地塞米松（DEX）磷酸钠注射液（阳性 行后续实验。

· 1210 · China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 中国药房 2024年第35卷第10期