Page 62 - 《中国药房》2024年10期
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μmol/L OA 均对细胞存活率无显著影响(P>0.05);在
1 μg/mL LPS 刺激条件下,单用 LPS 和联用 7.5、15、30
μmol/L OA均对细胞存活率无显著影响(P>0.05),结果
见表 2。因此,本研究选用 7.5、15、30 μmol/L 分别作为
OA的低、中、高浓度进行后续实验。
200 μm 200 μm
表2 各组细胞存活率检测结果(x±s,n=3)
组别 细胞存活率/% 组别 细胞存活率/% A.对照组 B. LPS组
对照组 100 无LPS刺激的OA 80 μmol/L组 56.24±5.95 a
无LPS刺激的OA 7.5 μmol/L组 101.91±2.39 单用LPS刺激组 102.33±2.97
无LPS刺激的OA 15 μmol/L组 100.82±3.88 有LPS刺激的OA 7.5 μmol/L组 101.36±7.21
无LPS刺激的OA 30 μmol/L组 102.84±6.60 有LPS刺激的OA 15 μmol/L组 98.81±1.39
无LPS刺激的OA 60 μmol/L组 72.36±1.36 a 有LPS刺激的OA 30 μmol/L组 101.84±7.11
a:与对照组比较,P<0.05。
200 μm 200 μm
3.2 OA 对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞中 NO 和 ROS 的
影响 C. DEX组 D. OA低浓度组
与对照组比较,LPS 组细胞中 NO 和 ROS 含量均显
著升高(P<0.05);与 LPS 组比较,DEX 组和 OA 各浓度
组细胞中NO和ROS(OA低浓度组除外)含量均显著降
低(P<0.05)。结果见表3。
表 3 各组细胞中 NO 和 ROS 含量检测结果(x±s, 200 μm 200 μm
n=3) E. OA中浓度组 F. OA高浓度组
组别 NO/(μmol/L) ROS/% 组别 NO/(μmol/L) ROS/% 箭头:纺锤形和不规则细胞。
对照组 4.54±0.19 0.33±0.04 OA低浓度组 22.12±1.25 b 48.20±2.55 图1 OA对LPS诱导RAW264.7细胞形态的影响
LPS组 26.15±0.55 a 59.90±3.53 a OA中浓度组 16.92±0.58 b 41.00±0.59 b
DEX组 17.12±0.38 b 40.20±1.65 b OA高浓度组 9.97±0.44 b 31.50±4.90 b 表4 各组细胞中 TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-4 和 IL-10 含
a:与对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05。 量检测结果(x±s,n=3)
3.3 OA对LPS诱导RAW264.7细胞形态的影响 组别 TNF-α/(ng/mL) IL-6/(pg/mL) IL-1β/(pg/mL) IL-4/(pg/mL) IL-10/(pg/mL)
对照组 8.39±0.57 2.52±0.10 25.59±11.28 9.45±0.38 5.34±1.32
对照组细胞呈圆形,形态较均一。LPS组出现大量
LPS组 240.61±3.98 a 75.37±3.62 a 4 493.70±145.04 a 25.98±1.19 a 32.34±1.33 a
伪足变的纺锤形和不规则细胞。与LPS组比较,DEX组 DEX组 116.27±2.57 b 31.06±0.76 b 1 485.38±45.89 b 44.35±1.10 b 68.89±1.65 b
和 OA 各浓度组的纺锤形和不规则细胞逐渐减少,圆形 OA低浓度组 144.42±4.97 b 52.35±2.36 b 2 016.04±42.03 b 40.91±2.48 b 59.76±1.23 b
细胞增多。结果见图1。 OA中浓度组 101.25±7.26 b 41.86±0.78 b 1 577.59±38.93 b 50.65±0.87 b 97.75±2.62 b
OA高浓度组 76.04±1.36 b 33.34±1.29 b 806.18±25.73 b 55.35±1.68 b 110.51±4.10 b
3.4 OA对LPS诱导RAW264.7细胞中炎症因子的影响
a:与对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05。
与对照组比较,LPS 组细胞中 TNF-α、IL-6、IL-1β、
IL-4和IL-10含量均显著升高(P<0.05);与LPS组比较, 表5 各组细胞中TNF-α、IL-6、IL-1β mRNA表达水平
DEX 组和 OA 各浓度组细胞中促炎因子 TNF-α、IL-6、 检测结果(x±s,n=3)
IL-1β含量均显著降低(P<0.05),抗炎因子IL-4和IL-10 组别 TNF-α mRNA IL-6 mRNA IL-1β mRNA
对照组 1.04±0.35 1.09±0.56 1.01±0.15
含量均显著升高(P<0.05)。结果见表4。
LPS组 15.88±1.75 a 1 412.27±126.68 a 2 909.47±242.93 a
3.5 OA 对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞中 TNF-α、IL-6、 DEX组 7.78±1.31 b 225.74±23.54 b 579.45±35.84 b
IL-1β mRNA表达的影响 OA低浓度组 11.69±1.96 b 1 185.65±223.25 1 839.08±448.66 b
OA中浓度组 10.38±1.08 b 782.34±156.41 b 1 710.47±314.78 b
与对照组比较,LPS 组细胞中 TNF-α、IL-6、IL-1β
OA高浓度组 5.49±1.14 b 627.29±105.19 b 988.20±128.80 b
mRNA 表达水平均显著升高(P<0.05);与 LPS 组比较,
a:与对照组比较,P<0.05;b:与LPS组比较,P<0.05。
DEX 组和 OA 各浓度组细胞中 TNF-α、IL-6(OA 低浓度
组除外)、IL-1β mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。 蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),IκBα 蛋白表达水
结果见表5。 平显著降低(P<0.05);与 LPS 组比较,DEX 组和 OA 各
3.6 OA 对 LPS 诱导 RAW264.7 细胞中 NF-κB 通路相 浓度组细胞中 p-NF-κB p65 和 p-IκBα 蛋白表达水平均
关蛋白表达的影响 显著降低(P<0.05),IκBα 蛋白表达水平均显著升高
与对照组比较,LPS组细胞中p-NF-κB p65和p-IκBα (P<0.05)。结果见表6、图2。
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