Page 57 - 《中国药房》2024年10期

较差异均无统计学意义（P＞0.05）。预处理 48 h 时，各 100 Cur对照品溶液组 140 Cur对照品溶液组 a a
Cur/mPEG-PBLA胶束组
药物组细胞的存活率相较于模型组亦有所升高，且Cur/ 80 Cur/mPEG-PBLA胶束组 120 a a
100
mPEG-PBLA胶束组细胞的存活率均显著高于同质量浓 60 80 a
度 Cur 对照品溶液组（P＜0.05）。针对 7702 细胞的实验 细胞存活率/% 40 细胞存活率/% 60
也得出了相似的结果（图5C、5D），即预处理48 h时，Cur/ 20 40
20
mPEG-PBLA胶束组细胞的存活率均显著高于同质量浓 0 0
对照 模型 1 2 4 8 10 对照 模型 1 2 4 8 10
度Cur对照品溶液组（P＜0.05）。 组 组 Cur质量浓度/（μg/mL） 组 组 Cur质量浓度/（μg/mL）
A. HepG-2细胞处理24 h B. HepG-2细胞处理48 h
120 a
Cur对照品溶液组 a a
Cur/mPEG-PBLA胶束组 140 Cur对照品溶液组 a Cur对照品溶液组 120 Cur对照品溶液组 a
100 Cur/mPEG-PBLA胶束组 100 Cur/mPEG-PBLA胶束组 Cur/mPEG-PBLA胶束组 a
120 a a 80 100 a a
细胞存活率/% 60 细胞存活率/% 80 细胞存活率/% 60 细胞存活率/% 80
80
100
60
60
40
20 40 40 40
20 20 20
0 0
对照 模型 1 2 4 8 10 对照 模型 1 2 4 8 10 0 0
组 组 Cur质量浓度/（μg/mL） 组 组 Cur质量浓度/（μg/mL） 对照 模型 1 2 4 8 10 对照 模型 1 2 4 8 10
组 组 Cur质量浓度/（μg/mL） 组 组 Cur质量浓度/（μg/mL）
A. HepG-2细胞预处理24 h B. HepG-2细胞预处理48 h
a C. 7702细胞处理24 h D. 7702细胞处理48 h
Cur对照品溶液组 140 Cur对照品溶液组 a
100 Cur/mPEG-PBLA胶束组 Cur/mPEG-PBLA胶束组 a a：与同质量浓度Cur对照品溶液组比较，P＜0.05。
120 a
80 100 a 图6 Cur 对照品溶液和 Cur/mPEG-PBLA 胶束对 2 种
细胞存活率/% 60 细胞存活率/% 80 细胞ALD的改善作用（x±s，n＝5）
60
40
20 40 3 讨论
20 本课题组前期分别采用超声法、溶剂挥发法、薄膜
0 0
对照 模型 1 2 4 8 10 对照 模型 1 2 4 8 10 分散法、透析法 4 种方法试制了 Cur/mPEG-PBLA 胶束，
组 组 Cur质量浓度/（μg/mL） 组 组 Cur质量浓度/（μg/mL）
C. 7702细胞预处理24 h D. 7702细胞预处理48 h 结果显示，以透析法所制胶束的平均粒径最小，且粒径
a：与同质量浓度Cur对照品溶液组比较，P＜0.05。 分布均匀，因此本研究选择透析法制备 Cur/mPEG-
图5 Cur 对照品溶液和 Cur/mPEG-PBLA 胶束对 2 种 PBLA胶束。此外，本课题组前期还对透析法中聚合物-
细胞ALD的预防作用（x±s，n＝5） 药物质量比、水化用水量、透析时间、换水次数、离心转
速及时间等参数进行了优化，最终确定了“2.1”项下最优
2.4.2 Cur/mPEG-PBLA对ALD的改善作用
制备方法。
将 HepG-2、7702 细胞分为对照组、模型组、不同质
量浓度 Cur 对照品溶液组、不同质量浓度 Cur/mPEG- 本研究结果显示，所制 Cur/mPEG-PBLA 胶束不仅
PBLA组，每组设置5个复孔。除对照组外，其余各组细 粒径较小、粒径分布均匀，而且 DLC、EE 较高，改善了
胞均加入终浓度为 400 mmol/L 的无水乙醇干预 12 h 以 Cur 水溶性差的问题，为 Cur 制剂的后续开发提供了有
构建ALD模型。随后，各药物组细胞加入相应药液（质 力的技术支撑。物理、化学稳定性实验结果表明，在不
量浓度分别为1、2、4、8、10 μg/mL，以Cur计），对照组和 同 pH 和高温环境下，Cur 对照品均极易降解，与已有文
[18]
模型组细胞加入等体积培养基，分别培养 24、48 h。收 献结果基本一致 ；而制成 Cur/mPEG-PBLA 胶束后，不
集各组细胞，以MTT法测定其存活率，实验重复3次。 管是在不同pH环境中，还是在高温环境下，其粒径均无
针对 HepG-2 细胞的实验结果（图 6A、6B）显示，处 明显变化，且具有良好的血浆稳定性，不会引发溶血反
理24 h时，对照组细胞的平均存活率为100.95%，模型组 应。体外释放实验结果显示，与 Cur 对照品相比，Cur/
细胞的平均存活率为 72.95%；与模型组比较，各药物组 mPEG-PBLA 胶束能有效控制药物的释放速度，有利于
细胞的存活率（1、2 μg/mL Cur/mPEG-PBLA 胶束组除 延长药物在体内的作用时间，以实现药物的长效作
外）均有所提高，并有一定的浓度依赖趋势，但相同质量 用 [19－20] 。由此可见，本研究所制 Cur/mPEG-PBLA 胶束
浓度的 Cur 对照品溶液组与 Cur/mPEG-PBLA 胶束组比 可在一定程度上解决Cur溶解性低、稳定性差、代谢快、
较差异均无统计学意义（P＞0.05）。处理 48 h 时，各药 半衰期较短等问题，可为 Cur 的制剂研发及临床应用提
物组细胞的存活率相较于模型组亦有所升高，且 Cur/ 供新的研究思路。
mPEG-PBLA胶束组细胞的存活率均显著高于同质量浓 本研究的体外药效学实验结果显示，Cur/mPEG-
度 Cur 对照品溶液组（P＜0.05）。针对 7702 细胞的实验 PBLA 胶束和 Cur 对照品溶液对 HepG-2、7702 细胞损伤
也得出了相似的结果（图 6C、6D），即处理 48 h 时，Cur/ 都有不同程度的体外预防和改善作用，且有一定的浓度
mPEG-PBLA胶束组细胞的存活率均显著高于同质量浓 依赖趋势；同时，随着干预时间的延长，Cur/mPEG-
度Cur对照品溶液组（P＜0.05）。 PBLA 胶束对 ALD 模型细胞的预防和改善效果均显著

中国药房 2024年第35卷第10期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 10 · 1207 ·