Page 52 - 《中国药房》2024年3期

表6 各组细胞内p-STAT3、STAT3、p53、SLC7A11蛋白
表达水平的检测结果（x±s，n＝3）

分组 p-STAT3/GAPDH STAT3/GAPDH p53/GAPDH SLC7A11/GAPDH
对照组 0.41±0.05 0.38±0.04 0.35±0.04 1.07±0.10
小檗碱组 0.04±0.01 a 0.17±0.02 a 0.89±0.09 a 0.36±0.05 a
STAT3组 0.57±0.06 0.82±0.07 0.33±0.03 1.09±0.12
STAT3+小檗碱组 0.30±0.04 b 0.65±0.07 b 0.51±0.04 b 0.73±0.06 b
50 μm 50 μm
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与小檗碱组比较，P＜0.01。
A. 对照组 B. p53 siRNA组
4 讨论

近年来，小檗碱因其低毒与抗肿瘤特性受到了广泛
关注，其对多种恶性肿瘤细胞均具有良好的抑制作用。
本研究结果表明，小檗碱能够降低MG63骨肉瘤细胞的
存活率。Ki67是一种与细胞增殖相关的蛋白，仅在处于
50 μm 50 μm 分裂期的细胞核内表达，是评价肿瘤细胞增殖活性、侵
袭能力的重要指标。有研究指出，Ki67表达水平的升高
C.小檗碱组 D. p53 siRNA+小檗碱组
[7]
图8 各组细胞线粒体膜电位的荧光显微图 与骨肉瘤的发生与发展呈正相关 。本研究结果显示，
表5 各组细胞的线粒体膜电位和细胞内 GSH 水平、 小檗碱处理后细胞中Ki67蛋白表达下调，这也进一步证
MDA含量测定结果（x±s，n＝3） 实了小檗碱能抑制骨肉瘤细胞的增殖。
相关研究已证实，铁死亡在骨肉瘤的治疗、预后以
分组 线粒体膜电位 GSH/% MDA/（μmol/mg）
对照组 1.00±0.07 100.00±2.36 1.37±0.12 及降低耐药性等方面发挥着重要作用 。细胞内 Fe 过
2+
[8]
p53 siRNA组 0.98±0.05 98.45±1.93 1.40±0.16 载是细胞铁死亡的重要标志，ROS 和脂质过氧化物
小檗碱组 0.29±0.02 a 45.67±1.74 a 3.75±0.34 a
p53 siRNA+小檗碱组 0.71±0.05 b 74.02±2.59 b 2.53±0.22 b MDA的蓄积以及GSH的过度消耗则是细胞铁死亡的必
[9]
a：与对照组比较，P＜0.01；b：与小檗碱组比较，P＜0.01。 要条件 。在本研究中，小檗碱处理MG63细胞后，细胞
2+
3.3 过表达 STAT3 对 MG63 细胞内 p-STAT3、STAT3、 内 Fe 、ROS 水平和 MDA 含量均升高，而 GSH 水平降
p53和SLC7A11蛋白表达水平的影响结果 低。此外，透射电镜结果显示，小檗碱处理后出现了细
与对照组比较，小檗碱组细胞内p-STAT3、STAT3和 胞线粒体体积变小、膜密度增加、线粒体嵴减少甚至消
失等铁死亡特征。这些结果表明，小檗碱能够诱导
SLC7A11蛋白表达水平均显著降低（P＜0.01），p53蛋白
MG63细胞铁死亡。
表达水平显著升高（P＜0.01）；与小檗碱组比较，STAT3+
SLC7A11可以将细胞外胱氨酸转运至细胞内，在细
小檗碱组细胞内p-STAT3、STAT3和SLC7A11蛋白表达
胞内部将胱氨酸还原为半胱氨酸，进而参与细胞内重要
水平均显著升高（P＜0.01），p53蛋白表达水平显著降低
抗氧化物GSH的合成。GSH在抑制细胞中脂质过氧化
（P＜0.01）。结果见图9、表6。
物累积方面有着重要作用，可防止细胞中铁死亡程序的
启动 。p53 作为一种肿瘤抑制蛋白，越来越多的证据
[10]
p-STAT3 88 kDa
指出，p53可通过抑制SLC7A11蛋白的表达来诱导多种
[11]
STAT3 88 kDa 肿瘤细胞铁死亡 。本研究结果显示，小檗碱处理后
MG63 细胞内 p53 蛋白表达水平升高，而 SLC7A11 蛋白
p53 53 kDa
表达水平降低；抑制 p53 的表达能够提高小檗碱处理组
细胞内 SLC7A11 蛋白表达水平，改善 GSH、MDA 和线
SLC7A11 35 kDa
粒体膜电位等铁死亡特异性指标。这些结果表明，小檗
碱 诱 导 MG63 细 胞 铁 死 亡 的 作 用 可 能 与 调 节 p53/
GAPDH 37 kDa
SLC7A11信号通路有关。
A B C D
A：对照组；B：小檗碱组；C：STAT3组；D：STAT3+小檗碱组。 STAT3的磷酸化在STAT3信号活化中起关键作用，
图9 各组细胞内 STAT3/p53/SLC7A11 信号通路相关 p-STAT3 蛋白表达水平也与细胞铁死亡有着密切关
[12]
蛋白表达的电泳图 系 。研究指出，p53 作为铁死亡的重要调节因子，

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