Page 55 - 《中国药房》2024年1期

3.4.2 转染后细胞线粒体膜电位降低比例和凋亡率 水平均显著降低（P＜0.05）。结果见图7、表6。
与对照组比较，PINK1 siRNA组线粒体膜电位降低 3.6.2 COX-2过表达后细胞线粒体膜电位降低比例
比例和细胞凋亡率均升高，但差异无统计学意义（P＞ 与对照组比较，COX-2组细胞线粒体膜电位降低比
0.05）。与氧化苦参碱组比较，PINK1 siRNA+氧化苦参 例升高，但差异无统计学意义（P＞0.05）。与氧化苦参
碱组细胞线粒体膜电位降低比例和凋亡率均显著降低 碱组比较，COX-2+氧化苦参碱组细胞线粒体膜电位降
（P＜0.05）。结果见表5。 低比例显著降低（P＜0.05）。结果见表6。
表5 转染后MG63细胞线粒体膜电位降低比例和凋亡 4 讨论
率的检测结果（x±s，n＝3） 肿瘤细胞凋亡水平的降低与其无限增殖有关 。
[6]
组别 线粒体膜电位降低比例/% 细胞凋亡率/% Bcl-2与Bax都属于Bcl-2蛋白家族成员，是肿瘤发生、发
对照组 4.07±0.28 3.46±0.33
[7]
PINK1 siRNA组 4.13±0.32 3.61±0.57 展的重要标志之一 。本研究结果显示，经氧化苦参碱
氧化苦参碱组 69.85±4.73 33.24±1.71 干预后，MG63细胞的凋亡率显著升高，而凋亡抑制蛋白
PINK1 siRNA+氧化苦参碱组 37.64±2.15 a 17.19±1.42 a
Bcl-2的表达水平显著降低，促凋亡蛋白Bax的表达水平
a：与氧化苦参碱组比较，P＜0.05。
显著升高，这表明氧化苦参碱能诱导骨肉瘤细胞的凋亡。
3.5 氧化苦参碱对 MG63 细胞中 COX-2 蛋白表达的
线粒体自噬是一种选择性自噬，其对肿瘤相关性疾
影响
病是一把“双刃剑”：一方面，线粒体自噬能提高肿瘤细
与对照组[（100.00±3.36）%]比较，氧化苦参碱 2.0、
胞对外界应激的耐受能力；另一方面，线粒体自噬的激
4.0、8.0 mg/mL 组细胞中 COX-2 蛋白的荧光强度[分别
活也能促进肿瘤细胞的凋亡，从而抑制肿瘤细胞的增
为（47.18±2.44）% 、（25.72±1.19）% 、（19.37±1.02）% ]
[8]
殖 。PINK1/Parkin信号通路在诱导线粒体自噬过程中
均显著降低（P＜0.05）。结果见图6。
3.6 COX-2 过 表 达 对 氧 化 苦 参 碱 干 预 MG63 细 胞 具有重要作用 [9―10] 。最新的研究指出，氧化苦参碱可激
PINK1/Parkin信号通路的影响 活PINK1/Parkin信号通路介导的线粒体自噬，从而抑制
[11]
3.6.1 COX-2 过表达后细胞中 COX-2、PINK1 和 Parkin 结直肠癌细胞的增殖 。本研究结果显示，经氧化苦参
蛋白表达水平 碱干预后，MG63 细胞中 PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表
与对照组比较，COX-2组细胞中COX-2蛋白表达水 达水平均显著升高。此外，免疫荧光染色结果证实，氧
平显著升高（P＜0.05）；PINK1蛋白表达水平降低，Parkin 化苦参碱促进了自噬蛋白LC3与线粒体标志物COX Ⅳ
蛋白表达水平升高，但差异无统计学意义（P＞0.05）。 的共定位。进一步的PINK1 siRNA干扰实验结果显示，
与氧化苦参碱组比较，COX-2+氧化苦参碱组细胞中 PINK1/Parkin信号通路参与了氧化苦参碱诱导的MG63
COX-2蛋白表达水平显著升高，PINK1、Parkin蛋白表达 细胞线粒体自噬活化。

DAPI

20 μm 20 μm 20 μm 20 μm

COX-2

20 μm 20 μm 20 μm 20 μm

Merge

20 μm 20 μm 20 μm 20 μm
A.对照组 B.氧化苦参碱2.0 mg/mL组 C.氧化苦参碱4.0 mg/mL组 D.氧化苦参碱8.0 mg/mL组
图6 MG63细胞中COX-2蛋白表达的免疫荧光图

中国药房 2024年第35卷第1期 China Pharmacy 2024 Vol. 35 No. 1 · 49 ·