Page 54 - 《中国药房》2024年1期
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PINK1 63 kDa
Bax 21 kDa
Parkin 52 kDa
Bcl 26 kDa
LC3-Ⅱ 14 kDa
β-actin 43 kDa β-actin 43 kDa
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ Ⅴ
Ⅰ:对照组;Ⅱ:氧化苦参碱2.0 mg/mL组;Ⅲ:氧化苦参碱4.0 mg/mL
Ⅰ:对照组;Ⅱ:氧化苦参碱2.0 mg/mL组;Ⅲ:氧化苦参碱4.0 mg/mL 组;Ⅳ:氧化苦参碱8.0 mg/mL组;Ⅴ:5-FU组。
组;Ⅳ:氧化苦参碱8.0 mg/mL组;Ⅴ:5-FU组。 图4 各组 MG63 细胞中 PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白
图2 各组MG63细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达的电泳图 表达的电泳图
表2 各组MG63细胞线粒体膜电位降低比例和线粒体 表3 各组 MG63 细胞中 PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白
自噬水平的检测结果(x±s,n=3) 表达水平的检测结果(x±s,n=3)
组别 PINK1/β-actin Parkin/β-actin LC3-Ⅱ/β-actin
组别 线粒体膜电位降低比例/% 线粒体自噬水平 对照组 0.090±0.005 0.041±0.003 0.208±0.009
对照组 4.37±0.48 1.61±0.39 0.381±0.014 a 0.176±0.008 a 0.383±0.011 a
氧化苦参碱2.0 mg/mL组 38.14±4.21 a 7.83±0.62 a 氧化苦参碱2.0 mg/mL组 a a a
氧化苦参碱4.0 mg/mL组 55.79±4.82 a 16.39±1.14 a 氧化苦参碱4.0 mg/mL组 0.824±0.035 a 0.330±0.010 a 0.471±0.014 a
0.484±0.012
氧化苦参碱8.0 mg/mL组
0.775±0.029
0.913±0.046
氧化苦参碱8.0 mg/mL组 70.90±6.05 a 24.27±1.48 a 0.439±0.020 a 0.432±0.015 a 0.560±0.022 a
5-FU组 76.23±5.57 a 19.52±1.26 a 5-FU组
a:与对照组比较,P<0.05。
a:与对照组比较,P<0.05。
3.4 线粒体自噬对氧化苦参碱致 MG63 细胞凋亡的影
3.3.2 细胞线粒体自噬水平 响结果
与对照组比较,氧化苦参碱各浓度组和 5-FU 组细 3.4.1 转染后细胞中PINK1、Parkin和 LC3-Ⅱ蛋白表达
胞中线粒体自噬水平均显著升高(P<0.05)。结果见图 水平
3(5-FU组图略)、表2。 与对照组比较,PINK1 siRNA组细胞中的PINK1蛋
白表达水平显著降低(P<0.05),Parkin 和 LC3-Ⅱ蛋白
表达水平降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。与氧
化苦参碱组比较,PINK1 siRNA+氧化苦参碱组细胞中
PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均显著降低(P<
0.05)。结果见图5、表4。
PINK1 63 kDa
5 μm 5 μm
Parkin 52 kDa
A.对照组 B.氧化苦参碱2.0 mg/mL组
LC3-Ⅱ 14 kDa
β-actin 43 kDa
Ⅰ Ⅱ Ⅲ Ⅳ
Ⅰ:对照组;Ⅱ:PINK1 siRNA组;Ⅲ:氧化苦参碱组;Ⅳ:PINK1
siRNA+氧化苦参碱组。
图5 转染后MG63细胞中PINK1、Parkin和LC3-Ⅱ蛋
5 μm 5 μm
白表达的电泳图
C.氧化苦参碱4.0 mg/mL组 D.氧化苦参碱8.0 mg/mL组 表4 转染后MG63细胞中PINK1、Parkin和LC3-Ⅱ蛋
图3 各组细胞线粒体自噬的显微图 白表达水平的检测结果(x±s,n=3)
3.3.3 细胞中PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平 组别 PINK1/β-actin Parkin/β-actin LC3-Ⅱ/β-actin
对照组 0.371±0.007 0.119±0.003 0.073±0.002
与对照组比较,氧化苦参碱各浓度组和 5-FU 组细 PINK1 siRNA组 0.015±0.001 a 0.122±0.005 0.070±0.005
氧化苦参碱组 1.194±0.013 0.936±0.012 0.802±0.011
胞中 PINK1、Parkin、LC3-Ⅱ蛋白表达水平均显著升高
PINK1 siRNA+氧化苦参碱组 0.079±0.002 b 0.287±0.008 b 0.243±0.009 b
(P<0.05)。结果见图4、表3。 a:与对照组比较,P<0.05;b:与氧化苦参碱组比较,P<0.05。
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